王皙瑋 ,吳玉梅 ,周 芹
(1.黑龍江省普通高等學(xué)校甜菜遺傳育種重點實驗室,哈爾濱150080;2.農(nóng)業(yè)部甜菜品質(zhì)監(jiān)督檢驗測試中心,哈爾濱150080)
甜菜屬藜科植物,有野生種和栽培種。糖用甜菜是栽培種中的一個變種,通稱甜菜。它的塊根中含蔗糖高,一般達15%~20%,是制糖工業(yè)的主要原料之一。隨著制糖工業(yè)的發(fā)展,人們由單純對甜菜產(chǎn)量的追求逐步轉(zhuǎn)向?qū)μ鸩似焚|(zhì)的要求。
鈉含量是甜菜的品質(zhì)性狀??扇苄院锖外?、鈉等灰分在制糖中不利于蔗糖結(jié)晶,其含量是衡量塊根工藝品質(zhì)的重要指數(shù)。Burba[1](2001)指出,收獲的糖甜菜品質(zhì)取決于其含糖量和包括Na+在內(nèi)的若干化學(xué)特性,這些陽離子影響著糖汁中的可溶性成分。Beek[2](1986)又指出糖甜菜的質(zhì)量由汁液中的糖含量和雜質(zhì)(主要是α-氨基氮、K+和Na+)決定。因此,如何快速準(zhǔn)確地測定甜菜中的鈉含量是判斷甜菜品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。本文應(yīng)用甜菜品質(zhì)分析儀對甜菜中的鈉含量進行了測定,并對結(jié)果進行了分析,得出甜菜品質(zhì)分析儀法是適合做為甜菜塊根中鈉含量測定的常規(guī)方法。
甜菜塊根,用鋸糊機鋸成糊。
1.2.1 儀器設(shè)備 比例分析天平:稱樣量范圍(26±5)g,精確度±0.01g,比例為 1∶6.821(±0.008)。 鋸糊機:轉(zhuǎn)速2900r/min,鋸片直徑250mm。處理新鮮甜菜:齒數(shù)300,4片組合鋸,厚度4mm;浸糖過濾聯(lián)動線:浸漬杯攪拌器轉(zhuǎn)速1400~2000r/min,總浸漬時間6min,浸漬杯自動刷洗烘干,濾液量應(yīng)大于50mL。維尼馬甜菜品質(zhì)自動分析儀(檢糖計、火焰分光光度計、熒光分光光度計)。
1.2.2 試劑 (1)硫酸鋁澄清液:3.8g/L。用于浸提液。(2)蔗糖、α-氮、鉀和鈉標(biāo)準(zhǔn)液:準(zhǔn)確稱取烘至恒重的蔗糖20.8g、1.900g L+谷氨酰胺、氯化鉀0.969g和氯化鈉0.380g,用蒸餾水溶解后移入1000mL容量瓶中,稀釋至刻度,混勻。(3)標(biāo)準(zhǔn)空白液:稱取1g硫酸鋁,用蒸餾水溶解后移入1000mL容量瓶中。(4)OPT-試劑:將1000mL A液、1mL B液和0.2mL C試劑混合,混勻。此試劑配制后只能使用5d。A液:稱取9.5g硼砂放入燒杯中,用800mL蒸餾水溶解后加入80mL 33%氫氧化鈉溶液,混勻,然后用稀氫氧化鈉溶液或鹽酸溶液調(diào)節(jié)溶液pH至10.3,然后移入1000mL容量瓶中,稀釋至刻度,混勻。B液:稱取0.15g鄰苯二甲醛于5mL試管中,用1mL無水乙醇溶解,保存在冰箱中。C試劑:1-硫代丙三醇。(5)硫酸鋰溶液:稱取0.15g硫酸鋰,用蒸餾水溶解后加入2.5mL乙酸,然后移入1000mL容量瓶中,稀釋至刻度,混勻。(6)燃燒間斷液:稱取氯化鉀0.194g、氯化鈉0.076g、硫酸鋰3g用蒸餾水溶解后,加入50mL乙酸和20L蒸餾水,混勻。(7)清洗液:1.5%次氯酸鈉500mL。
將樣品除去雜質(zhì),清洗干凈。逐株用鋸糊機在塊根非根溝(塊根著生側(cè)根部位)一面的居中處,縱向鋸溝至根體二分之一處鋸取甜菜糊。甜菜糊鋸碎的程度,應(yīng)使甜菜細胞全部破裂,足以保證可溶物很容易被浸漬出來。然后將集糊器內(nèi)的甜菜糊,充分混均并附卡片備檢,每份甜菜糊量應(yīng)不少于樣品質(zhì)量的5%。
通過重復(fù)性實驗可以驗證方法的精密度。在試驗過程中我們按照擬定的標(biāo)準(zhǔn)方法對選定的6個試樣進行9次平行測定,結(jié)果見表1。從表1可以看出,6個樣品測得的極差值在0.04%~0.06%之間,標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.015%~0.041%之間。一般化學(xué)分析中含量極差范圍在0.1%~10%之間,表明本方法的精密度較好,滿足一般分析方法的要求。
表1 鈉含量測定方法的重復(fù)性試驗結(jié)果
表2 測定方法的添加回收率試驗
添加回收率試驗是驗證測定方法準(zhǔn)確度的有效方法之一。本方法在選定的甜菜試樣中加入一定量的鈉基準(zhǔn)試劑,按照測定試樣相同的方法進行提取測定,將測得的鈉總質(zhì)量減去樣品中鈉質(zhì)量除以添加鈉的質(zhì)量即為該方法的添加回收率(見表2)。從表2可以看出,本方法的回收率在97.67%~98.67%之間,滿足了一般化學(xué)分析方法對于回收率的要求,同時也表明本方法測定鈉具有較高的準(zhǔn)確度。
3.1 甜菜品質(zhì)分析儀法無論在精密度還是在準(zhǔn)確度上,都符合分析要求,可以作為甜菜塊根中鈉含量測定的常規(guī)方法。
3.2 與其他方法相比,甜菜品質(zhì)分析儀法操作簡單,無需作標(biāo)準(zhǔn)曲線,但用樣量較大,成本較高,適合大批量樣品測定。
[1]Jansen R.,Burba M.Progress in sugarbeet quality by breeding[J].Proceedings of the 64 th IIRB Congress, June 2001,196-204.
[2]Beek M.A.D,Huijbregts A W M.Internal quality aspects of sugar beet[J].Proceedings Fertilizer Society, Inst.For Sugar Beet Research,1986,252:20-22.