崔建梅，汪曉陽(yáng)，張 磊，宋曉霞，劉鴻宇△

（1.中北大學(xué) 生理學(xué)實(shí)驗(yàn)室，山西 太原 030051；2.山西大學(xué)體育學(xué)院，山西 太原 030006）

1 引言

研究表明，中老年男子隨年齡增加，雄激素水平逐漸下降，繼而性功能下降，同時(shí)伴有不同程度的骨質(zhì)疏松、肌力和體力下降、身體肌肉和脂肪分布變化及記憶力減退等［1］。Nicolosi等對(duì)29個(gè)國(guó)家40歲～80歲的中老年男女進(jìn)行的調(diào)查結(jié)果顯示，性功能障礙患病率比較高，且隨年齡的增長(zhǎng)有增高的趨勢(shì)，尤其是中老年男性［2］。在我國(guó)，冷靜等對(duì)1582例男性檢查發(fā)現(xiàn)，隨著年齡的增長(zhǎng)男性老年人的性功能逐漸減退，且伴隨性激素及促性腺激素的內(nèi)在相應(yīng)變化［3］。

國(guó)內(nèi)外男性學(xué)工作者都在致力于開發(fā)增強(qiáng)男性性功能的藥物，但因其價(jià)格昂貴、臨床禁忌較多等原因，很難在臨床推廣。我國(guó)的中醫(yī)藥工作者充分利用天然藥物資源，開發(fā)出許多有效的純中藥制劑，對(duì)治療中老年男性性功能障礙顯示出較好的療效。雪芙蓉膠囊是一種中成藥，主要由蛇床子、淫羊霍、菟絲子、黃芪、當(dāng)歸、麥冬等組成。本文主要觀察該膠囊對(duì)去勢(shì)大鼠性激素水平及性功能是否有改善作用，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

2 材料與方法

2.1 動(dòng)物及分組

雄性健康成年 SD大鼠60只，雌雄各半，體重200g～250g，由山西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物飼養(yǎng)中心提供。標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類飼料飼養(yǎng)雌雄分籠，每籠各3只，自由攝食和飲水，室溫20℃ ±2℃，濕度45％ ±10％。

將30只雄性大鼠隨機(jī)分為去勢(shì)組、中藥組和空白對(duì)照組3組，每組各9只。去勢(shì)組：手術(shù)去勢(shì)，灌服等量生理鹽水。中藥組：手術(shù)去勢(shì)，灌服中藥雪芙蓉膠囊（5mg/kg體重）。空白對(duì)照組：不去勢(shì)，灌服等量生理鹽水，以上各組均連續(xù)灌胃28d。

2.2 制作去勢(shì)手術(shù)模型

大鼠腹腔注射25％烏來糖0.5 ml，麻醉后剪開陰囊中心部皮膚約1.0cm，將兩側(cè)睪丸與附睪尾部分離，結(jié)扎睪丸動(dòng)脈，切除兩側(cè)睪丸。術(shù)后腹腔注射青霉素2萬(wàn) u/kg/d，連續(xù)3d。

2.3 藥品和試劑

雪芙蓉膠囊0.40g/粒，山西草澤堂生物工程有限公司（批號(hào)20040611）。將該膠囊于乳缽中研磨后配制成1.5mg/ml的溶液，供動(dòng)物灌胃用。

睪酮（testosterone，T）放射免疫試劑盒由天津德普生物技術(shù)醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公司生產(chǎn)，批號(hào)S10940108，黃體酮注射液由浙江仙居制藥股份有限股份公司生產(chǎn)（批號(hào)H33020829），苯甲酸雌二醇注射液由上海通用藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)（批號(hào)050105）。

2.4 性功能測(cè)試

2.4.1 陰莖勃起時(shí)間測(cè)試 最后1次灌胃后即刻，將電刺激儀刺激電極放置于大鼠陰莖部位，給予4mA，25V電壓的電刺激，記錄從刺激開始至陰莖勃起的時(shí)間。

2.4.2 交配測(cè)試 最后1次灌胃后12h測(cè)試大鼠交配能力。

交配準(zhǔn)備：測(cè)試前，每天晚間將雌性大鼠置于籠中使其適應(yīng)環(huán)境，連續(xù)3d。測(cè)試前48h皮下注射苯甲酸雌二醇30/只，4h前再注射黃體酮50/只，使雌鼠處于發(fā)情期［4、5］。

觀察交配：最后1次灌胃后夜間20∶00～22∶00之間分別將各組雄性大鼠與發(fā)情雌性大鼠1∶1合籠，在安靜的暗室中進(jìn)行交配實(shí)驗(yàn)，監(jiān)控記錄大鼠性行為各項(xiàng)指標(biāo)。先將1只雄鼠放入籠中使其適應(yīng)環(huán)境10min，然后投入1只發(fā)情雌鼠，觀測(cè)下列指標(biāo)（30min內(nèi)）：①捕捉潛伏期（自雌鼠投入至雄鼠第1次撲捉雌鼠的時(shí)間）；②捕捉次數(shù)（雄鼠撲捉雌鼠的次數(shù)）；③騎跨次數(shù)（雄鼠從后面撲向雌鼠，出現(xiàn)騎跨式交尾行為的次數(shù)）；④ 捕捉率和騎跨率（各組雄鼠發(fā)生捕捉及騎跨的動(dòng)物數(shù)占組內(nèi)動(dòng)物數(shù)的百分率）。

2.5 末次灌胃后24h經(jīng)大鼠尾靜脈取血，分離血清，用放射免疫法測(cè)睪酮（T）、黃體生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）。

2.6 稱量附屬性腺器官濕重

取血后將大鼠處死，剝離剪取整個(gè)前列腺和精囊腺，去除殘留的組織，用生理鹽水洗凈，稱量前列腺+精囊腺的濕重，計(jì)算前列腺+精囊腺的器官指數(shù)（器官重量mg/100g體重）。

2.7 統(tǒng)計(jì)方法

3 結(jié)果

3.1 各組大鼠性激素水平和附性腺器官濕重及指數(shù)

結(jié)果表明，與空白對(duì)照組睪酮（309.34±25.99 ng/dl）比較，去勢(shì)組大鼠睪酮（3.61±2.47 ng/dl）降低（P＜0.01）；與去勢(shì)組比較，中藥組睪酮（10.12±5.37 ng/dl）含量增高（P＜0.01）；與空白對(duì)照組比較，去勢(shì)組大鼠的FSH及LH顯著增高（P＜0.01）；與去勢(shì)組比較，中藥組大鼠的 LH顯著減少（P＜0.05），F(xiàn)SH雖減少，但差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。

表1 大鼠性激素水平、附性腺器官濕重及指數(shù)測(cè)試結(jié)果±s，n=9）

表1 大鼠性激素水平、附性腺器官濕重及指數(shù)測(cè)試結(jié)果±s，n=9）

注：與去勢(shì)組比較：*P＜0.05，＊＊P＜0.01；Compared with the castrated group

組 別 T（ng/dl） FSH（Iu/l） LH（Iu/l） 前列腺+精囊腺濕重（mg）性腺指數(shù)mg/100g 體重空白對(duì)照組 309.34±25.99＊＊ 5.37±0.92＊＊ 1.08±0.22＊＊ 885.22±122.79＊＊ 319.92±183.6＊＊去 勢(shì) 組 3.61± 2.47 7.25±3.10 1.70±0.32 114.89± 14.90 38.04± 15.32中 藥 組 10.12± 5.37＊＊ 7.16±2.02 1.44±0.22* 133.67± 27.11* 47.56± 12.11*

與空白對(duì)照組（附性腺器官濕重885.22±122.79mg，指數(shù) 319.92±183.6 mg/100g體重）相比，去勢(shì)組前列腺和精囊腺均呈現(xiàn)不同程度縮小，其濕重（114.89±14.90mg）減輕（P＜0.01），臟器指數(shù)（38.04±15.32 mg/100g體重）減小（P＜0.01）。與去勢(shì)組相比，中藥組前列腺 +精囊腺濕重（133.67±27.11mg）增高，臟器指數(shù)（47.56±12.11 mg/100g體重）增加（P＜0.05）。

3.2 性功能測(cè)試結(jié)果

表2 大鼠性功能測(cè)試結(jié)果±s，n=9）

表2 大鼠性功能測(cè)試結(jié)果±s，n=9）

注：與去勢(shì)組比較：*P＜0.05，＊＊P＜0.01；Compared with the castrated group

組 別 捕捉潛伏期（s）捕捉次數(shù)（次）捕捉率（％）騎跨次數(shù)（次）騎跨率（％）陰莖勃起潛伏期（s）空白對(duì)照組 274.00±36.40＊＊ 14.44±3.40＊＊ 100＊＊ 3.55±1.59＊＊ 77＊＊ 20.45±3.55＊＊去 勢(shì) 組 424.67±57.74 4.88±3.05 56 0.44±0.73 33 29.63±2.91中 藥 組 345.89±59.15* 8.55±4.42* 78* 1.66±0.87＊＊ 56* 25.36±4.51*

結(jié)果表明，與空白對(duì)照組比較，去勢(shì)組陰莖勃起 潛伏期（29.63±2.91s）及捕捉潛伏期（424.67±57.74s）延長(zhǎng)（P＜0.01），捕捉次數(shù)（4.88±3.05）及騎跨次數(shù)（0.44±0.73）減少（P＜0.01），捕捉率（56％）和騎跨率（33％）減少（P＜0.01）；與去勢(shì)組比較，中藥組的陰莖勃起潛伏期（25.36±4.51s）及捕捉潛伏期（345.89±59.15s）縮短（P＜0.05），捕捉次數(shù)（8.55±4.42）和騎跨次數(shù)（1.66±0.87）增多（P＜0.05，P＜0.01），捕捉率（78％）和騎跨率（56％）增高（P＜0.05），上述結(jié)果提示雪芙蓉膠囊可增強(qiáng)去勢(shì)雄性大鼠的性功能。

4 討論

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，腎為先天之本，腎陽(yáng)為全身陽(yáng)氣之根源，腎陽(yáng)虛累及生殖系統(tǒng)時(shí)，患者可表現(xiàn)出性欲減退、陽(yáng)痿、早泄等性功能障礙癥狀［6］。

據(jù)報(bào)道，補(bǔ)腎中藥對(duì)腎陽(yáng)虛型性功能障礙的治療效果主要與其具有雄激素樣作用有關(guān)［7］。動(dòng)物的附性器官濕重是目前常用于檢測(cè)中藥方劑是否具有雄激素樣作用的一種研究方法，凡能使雄性動(dòng)物附性器官濕重增加的藥物，均表明具有雄激素樣作用［8］。有學(xué)者認(rèn)為，性腺萎縮、性器官重量減輕等是男性老年人生理性衰老和部分性功能障礙者病理改變的特征之一，認(rèn)為逆轉(zhuǎn)性腺萎縮、增加性器官重量是治療性功能障礙的有效途徑［9］。本實(shí)驗(yàn)通過給去勢(shì)大鼠灌服雪芙蓉膠囊28d，發(fā)現(xiàn)大鼠前列腺和精囊腺濕重（133.67±27.11mg）明顯高于去勢(shì)組（114.89±14.90mg）。結(jié)果顯示，雪芙蓉膠囊可以減輕去勢(shì)大鼠附性器官的萎縮程度，表明該藥具有雄激素樣作用。

研究表明，補(bǔ)腎陽(yáng)中藥能明顯提高男性老年人腦垂體對(duì)GnRH的反應(yīng)性，能提高雄性大鼠睪丸對(duì)促性腺激素的反應(yīng)性，無(wú)論是雌性大鼠還是雄性大鼠去勢(shì)后血中LH、FSH明顯高于空白對(duì)照組，這是由于外周靶腺切除后，血中性激素含量突然下降，對(duì)腦垂體的負(fù)反饋?zhàn)饔脺p弱，腦垂體促性腺機(jī)能增強(qiáng)，LH、FSH 分泌增多，血中 LH、FSH 含量上升［10］。本實(shí)驗(yàn)得出了相同結(jié)果，去勢(shì)組大鼠的LH及FSH明顯高于正常對(duì)照組，服用雪芙蓉膠囊28d后，中藥組大鼠LH含量顯著低于去勢(shì)組，F(xiàn)SH雖減少，但差異無(wú)顯著性，說明中藥雪芙蓉膠囊對(duì)大鼠因去勢(shì)造成的生殖內(nèi)分泌紊亂具有調(diào)節(jié)作用。

研究發(fā)現(xiàn)，雄激素與成年男子性行為有直接關(guān)系［11～13］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，中藥組血清睪酮水平（10.12±5.37ng/dl）比去勢(shì)組（3.61±2.47ng/dl）顯著增高，但遠(yuǎn)低于空白對(duì)照組（309.34±25.99 ng/dl）。由于大鼠雙側(cè)睪丸已被摘除，從理論上講，血清睪酮水平不會(huì)有太大升高。本實(shí)驗(yàn)血清睪酮增多，可能與該中藥作用于腎上腺皮質(zhì)網(wǎng)狀帶，促進(jìn)雄激素少量分泌有關(guān)。本研究認(rèn)為，雪芙蓉膠囊可使去勢(shì)大鼠睪酮降低的趨勢(shì)得到部分改善，對(duì)大鼠性功能恢復(fù)有所幫助。

以陰莖勃起實(shí)驗(yàn)及交配實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠性功能是目前應(yīng)用最廣泛的方法。受測(cè)動(dòng)物的陰莖勃起、騎跨、插入和射精等性行為發(fā)生頻率和潛伏期可直接反映其性功能的強(qiáng)弱［5］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，雪芙蓉膠囊可以縮短去勢(shì)雄性大鼠的陰莖勃起潛伏期及捕捉潛伏期，使去勢(shì)雄性大鼠捕捉次數(shù)和騎跨次數(shù)增多、捕捉率和騎跨率增多。

上述結(jié)果表明，雪芙蓉膠囊可以降低血清黃體生成素水平，提高血清睪酮水平，改善去勢(shì)大鼠的性功能，其機(jī)理可能與雪芙蓉膠囊具有雄激素樣作用及改善性激素的分泌有關(guān)。因此，雪芙蓉膠囊可作為補(bǔ)腎壯陽(yáng)藥物進(jìn)行研究和應(yīng)用。

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△通訊作者：劉鴻宇，男，醫(yī)學(xué)博士，教授，從事神經(jīng)生物學(xué)研究。