羅明富,郭 瑩,張 棟,馬惠敏,王淑友
(中國中醫(yī)科學(xué)院 針灸研究所,北京 100700)
研究證明,循經(jīng)高溫現(xiàn)象(紅外輻射軌跡)是經(jīng)絡(luò)生物物理特性的一個顯著特征,是反映經(jīng)穴生理或病理現(xiàn)象較客觀的指標(biāo)之一[1]。已有實驗證明,兔膽囊炎模型可在腹部沿膽經(jīng)出現(xiàn)高溫反應(yīng)現(xiàn)象。去甲腎上腺素(NE)、E(腎上腺素)和5-羥色胺(5-HT)對組織物質(zhì)能量代謝有調(diào)控作用。目前,對NE、5-HT、E在循膽經(jīng)高溫反應(yīng)組織內(nèi)的變化還缺乏了解。故本實驗以兔膽囊炎模型為基礎(chǔ),觀察NE、E、5-HT與循膽經(jīng)高溫反應(yīng)的相關(guān)性。
清潔級日本大耳白家兔14只,體重1.5kg~2.5kg,雌雄各半,由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心提供。飼養(yǎng)1周后,隨機分為對照組6只,膽囊炎模型組(簡稱模型組)8只。
AGA-782型紅外熱像儀系統(tǒng)(AGA公司產(chǎn)),AH-2型高級顯微鏡(OLYMPUS),酶聯(lián)免疫試劑盒(北京華英生物技術(shù)研究所),STAT FAX 2100全自動酶標(biāo)儀。
按照張棟等報道的膽囊炎模型制作方法造模[2],術(shù)后家兔自由飲食。對照組除不做手術(shù)外,其他處理均與模型組相同。
造模后,飼養(yǎng)動物 11d,期間分 3d、7d、11d 3個時段沿膽經(jīng)腹段,采用紅外熱像儀系統(tǒng)做體表熱像圖觀察和記錄,并用標(biāo)記筆標(biāo)記出高溫線的具體位置。
紅外熱像觀察結(jié)束后麻醉動物,在左右腹側(cè)沿膽經(jīng)的位置,迅速切取模型組的循經(jīng)高溫反應(yīng)部位和對照組相應(yīng)部位的皮下組織(0.5g/只)進行勻漿,12000 rpm離心5 min離心處理后取上清液,采用酶聯(lián)免疫技術(shù)對上清液內(nèi)的 NE、E、5-HT進行檢測。
用SPPS 11.5統(tǒng)計軟件分析,數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,組間采用單因素方差分析,以t檢驗對實驗數(shù)據(jù)進行顯著性分析。
體表紅外熱像檢測結(jié)果顯示模型組在造模后的第3、7、11天,約70%的動物在左右腹側(cè)沿膽經(jīng)的位置出現(xiàn)長短不一的循經(jīng)溫度變化帶或區(qū),與對照組或造模前比較循經(jīng)高溫反應(yīng)一般隨天數(shù)的增加而增加,特別在第7天和11天后,循經(jīng)高溫反應(yīng)則逐漸明顯。這些循經(jīng)高溫反應(yīng)的帶或區(qū),其走行與膽經(jīng)相近,出現(xiàn)率右側(cè)腹部(患部)多于左腹部側(cè)(對側(cè)),而對照組相應(yīng)部位的溫度變化則不明顯(圖1A~D)。結(jié)果顯示模型組的循經(jīng)高溫反應(yīng)均比造模前或?qū)φ战M的循經(jīng)溫度升高約0.5℃ ~1.4℃。
表1顯示,取膽囊炎模型兩側(cè)腹部循膽經(jīng)發(fā)生高溫反應(yīng)部位的組織和對照組相應(yīng)部位組織進行勻槳和離心等處理,采用酶免疫法對各樣品 NE、E和5-HT含量進行檢測和統(tǒng)計學(xué)處理。結(jié)果如下:與對照組比較,模型組兩側(cè)腹部循膽經(jīng)發(fā)生高溫反應(yīng)部位的組織內(nèi) NE、5-HT含量升高,差異有顯著性意義(P<0.05)。同體的對側(cè)(左側(cè))與患側(cè)(右側(cè))比較,NE和5-HT含量變化均沒有顯著性差異性,2組E含量沒有顯著性差異(P>0.05)。
表1 2組腹部循膽經(jīng)組織內(nèi)NE、5-HT、E含量的變化(ng/L)±s)
表1 2組腹部循膽經(jīng)組織內(nèi)NE、5-HT、E含量的變化(ng/L)±s)
注:與對照組比較:*P<0.05;與對照組比較:#P>0.05,E含量的變化(μg/L)
組 別 n NE 患側(cè)對側(cè)5-HT E NE 5-HT E對照組 6 26.61±1.5 37.98±2.09 2.01±0.19 27.19±1.3238.92± 2.12 1.95±0.14模型組 8 34.59±8.18* 47.26±7.39* 2.08±0.32# 32.51±5.72* 49.70±12.15* 2.03±0.48#
結(jié)果表明,NE和5-HT與膽囊炎引起的腹部循膽經(jīng)高溫反應(yīng)有一定相關(guān)性。
圖1 (A)造模前,左右腹側(cè)沿膽經(jīng)的熱像圖溫度約35.8℃;(B~D)分別為造模后第3、7、11天,循膽經(jīng)的熱像圖溫度依次為 35.3℃、36℃、37.2℃
循經(jīng)感傳是經(jīng)絡(luò)的主要功能之一,也是臨床判斷針灸療效的重要標(biāo)準(zhǔn)?,F(xiàn)代紅外技術(shù)證明,臟腑發(fā)生病變可在體表出現(xiàn)循經(jīng)高溫反應(yīng),為經(jīng)絡(luò)研究提供客觀指標(biāo)。本實驗觀察到,在模型組右側(cè)和左側(cè)腹部循膽經(jīng)高溫反應(yīng)組織內(nèi)NE含量明顯高于對照組,表明循經(jīng)高溫反應(yīng)組織內(nèi)NE釋放增多。NE可作用于脂肪細(xì)胞 β3受體,通過UCP使細(xì)胞產(chǎn)熱增加,進而使組織溫度增加影響局部組織的溫度變化或循經(jīng)感傳。5-HT又稱血清素,它既是神經(jīng)遞質(zhì)又是炎癥介質(zhì),參與免疫調(diào)節(jié)過程。5-HT其相應(yīng)的受體可分為7種類型和至少14種亞型,除5-HT3受體為配體門控離子通道外,其余則為G蛋白偶聯(lián)受體,可見5-HT從中樞到外周廣泛分布,參與機體的許多生理或病理過程[3]。根據(jù)臨床研究,5-HT使內(nèi)皮細(xì)胞上的5-HT1受體啟動,可通過釋放內(nèi)皮細(xì)胞舒張因子(EDRF)和前列腺素(PGS)使血管平滑肌收縮、毛細(xì)血管擴張、通透性增高,引起皮膚紅斑水腫、發(fā)紅發(fā)熱、出血、疼痛及瘙癢等炎癥反應(yīng)。據(jù)實驗研究報道,電針穴位所產(chǎn)生的氣至病所效應(yīng)與抑制上述炎性介質(zhì)的釋放有關(guān)[4]。眾所周知,熱反應(yīng)是炎癥的主要癥狀之一,實驗性膽囊炎所引起的循經(jīng)高溫現(xiàn)象也是一種病理反應(yīng)的結(jié)果,并與5-HT含量的增加呈正相關(guān)性,表明5-HT作為一種炎癥介質(zhì)可能參與了臟腑體表相關(guān)的病理反應(yīng)過程。
當(dāng)然,本研究的這些結(jié)果只是從NE和5-HT等因素對循經(jīng)高溫現(xiàn)象進行一些探索,對循經(jīng)高溫反應(yīng)復(fù)雜機制的揭示還需做更深入的研究。
[1]胡翔龍,培清,許金森,等.人體體表循經(jīng)紅外輻射軌跡的熱源及其形成機理的探討[J].針刺研究,2002,27(6):258-260.
[2]張棟,付衛(wèi)星,葉燕燕,等.實驗性膽囊炎家兔體表循經(jīng)高溫線顯示[J]. 上海針灸雜志,2001,20(1):42-43.
[3]周舒,婁艾琳.5-羥色胺的生理和病理生理[M].北京:人民衛(wèi)生社,1998.1-49.
[4]李熳,施靜,李玲俐,等.“氣至病所”對相關(guān)皮瓣浸泡液內(nèi)5-羥色胺、腎上腺素、去甲腎上腺素含量的影響[J].針刺研究,2001,26(4):292-298.