實(shí)驗(yàn)室中折光法快速測(cè)定展開(kāi)劑展開(kāi)效果

范 珍

安慶醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校 安徽安慶 246000

實(shí)驗(yàn)室中折光法快速測(cè)定展開(kāi)劑展開(kāi)效果

范 珍

安慶醫(yī)藥高等專科學(xué)校 安徽安慶 246000

在薄層層析實(shí)驗(yàn)中，用阿貝折射儀通過(guò)折射率測(cè)定各種展開(kāi)劑成份比例，與延長(zhǎng)時(shí)間變化的問(wèn)題，基于折射率的結(jié)果，實(shí)驗(yàn)者可以調(diào)節(jié)展開(kāi)劑的折光率獲得高品質(zhì)的試驗(yàn)結(jié)果。本文提供了一個(gè)快速，可信的方法來(lái)衡量和調(diào)整每個(gè)組件的比例，以滿足學(xué)生薄層色譜實(shí)驗(yàn)的需求。

展開(kāi)劑；折射率；阿貝折射儀；薄層色譜法試驗(yàn)

目前高校實(shí)驗(yàn)室中，學(xué)生所做的薄層色譜法、紙色譜法試驗(yàn)中，其中定性參數(shù)比移值Rf和相對(duì)比移值Rr是否符合目標(biāo)要求，亦即意味著實(shí)驗(yàn)成敗與否。在影響Rf值和Rr值的諸多因素中，展開(kāi)劑的影響最大。學(xué)生實(shí)驗(yàn)因?yàn)槠叫邪嗉?jí)多，延續(xù)時(shí)間長(zhǎng)且相互間隔時(shí)間不定，所用展開(kāi)劑配制量大，由于大多展開(kāi)劑以有機(jī)易揮發(fā)成分為主，隨著時(shí)間的推移及環(huán)境溫度的變化，展開(kāi)劑中各組分比率會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化，這種變化勢(shì)必影響到Rf值和Rr值的測(cè)定。本文利用阿貝折光計(jì)快速測(cè)定學(xué)生實(shí)驗(yàn)維生素E性質(zhì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)中展開(kāi)劑效果，根據(jù)折光率的變化調(diào)整展開(kāi)劑的組分比例，獲得滿意的實(shí)驗(yàn)效果，從而提供了一種簡(jiǎn)單可行的展開(kāi)劑測(cè)定方法。

一、儀器與藥物

1.儀器

阿貝折光計(jì)2WAJ，上海光學(xué)儀器廠生產(chǎn)。

2.藥物與試劑

環(huán)己烷(AR)(上海試劑一廠)、乙醚(AR)(上海試劑一廠)、維生素E膠囊(廈門(mén)魚(yú)肝油廠)、0.5%羧甲基纖維素鈉硅膠G薄板(青島海洋化工廠，自制)。

二、維生素E的薄層色譜分析

1.實(shí)驗(yàn)方法

(1)不同比例展開(kāi)劑折光率測(cè)定

選取展開(kāi)劑環(huán)己烷、乙醚不同的配置比例(見(jiàn)表1)，實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前使用阿貝折光計(jì)于室溫28℃下，等待阿貝折光計(jì)的棱鏡組在清潔、干燥后合上，從棱鏡組右邊側(cè)小孔滴加待測(cè)溶劑2～3滴，快速測(cè)定，分別測(cè)得其各自折光率。

表1 折光率檢測(cè)結(jié)果

n乙醚=1.3598，n環(huán)己烷=1.4182

n(環(huán)己烷:乙醚，4:1)=1.4043，1.4032，1.4038，1.4035

n(環(huán)己烷:乙醚，5:1)=1.4056，1.4067，1.4055，1.4062

n(環(huán)己烷:乙醚，6:1)=1.4062，1.4082，1.4075，1.4088

n(環(huán)己烷:乙醚，7:1)=1.4088，1.4090，1.4104，1.4104

n(環(huán)己烷:乙醚，8:1)=1.4105，1.4103，1.4104，1.4104

n(環(huán)己烷:乙醚，10:1)=1.4108，1.4121，1.4111，1.4117

(2)不同時(shí)間段，展開(kāi)劑折光率變化測(cè)定

選取學(xué)生實(shí)驗(yàn)大綱要求的展開(kāi)劑比例，即環(huán)己烷:乙醚=4:1，室溫28℃下，依據(jù)學(xué)生實(shí)驗(yàn)課程每課時(shí)45分鐘，課間休息15分鐘，間隔60分鐘采樣，使用阿貝折光計(jì)測(cè)定其折光率變化(見(jiàn)表2)：

表2

下干燥，置烤箱105℃活化30min后，取出放冷，沿一端1.5cm處用鉛筆輕劃一條起始線，用管口平整的毛細(xì)管于線上點(diǎn)樣，晾干。取6只層析缸，分別加入不同比例展開(kāi)劑，放入點(diǎn)好樣的薄板，蒸氣飽和5min，薄板下端浸入展開(kāi)劑約1cm處，蓋上缸蓋，上行展開(kāi)至展開(kāi)前沿距起始線15cm處，取出，劃下展開(kāi)前沿位置。空氣中自然晾干，噴濃硫酸溶液顯色，測(cè)量原點(diǎn)至各斑點(diǎn)中心及展開(kāi)劑前沿的距離，計(jì)算比移值(Rf)，結(jié)果見(jiàn)表3：

表3

2.校正實(shí)驗(yàn)

另取環(huán)己烷:乙醚為6:1、7:1、8:1混合液各500ml，分別加入乙醚約25ml、46.5ml、55.5ml攪勻，分別調(diào)整其折光率至1.4040，放入層析缸，測(cè)得Rf(α-生育酚醋酸酯、α-生育酚、α-生育酚對(duì)苯醌)值為0.5:0.7:0.9。

3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

從上述結(jié)果看來(lái)，達(dá)到實(shí)驗(yàn)分離效果的展開(kāi)劑，折光率不大于1.4060，也就是環(huán)己烷:乙醚的比例不超過(guò)5:1；當(dāng)展開(kāi)劑折光率大于1.4060時(shí)，各組分的Rf值變小，且間距縮??；當(dāng)展開(kāi)劑折光率大于1.4104時(shí)，各組分無(wú)法分離；同時(shí)隨著時(shí)間的變化，原先配制的展開(kāi)劑折光率發(fā)生變化，RF值逐漸發(fā)生漂移，最終不符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊蟆?/p>

基于折光率的變化，對(duì)展開(kāi)劑適量補(bǔ)充相應(yīng)組分，調(diào)整其折光率值至與正確比例展開(kāi)劑相近時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求。

4.討論

20世紀(jì)初，俄國(guó)植物學(xué)家茨維特建立了柱色譜法，20世紀(jì)20年代、30年代又相繼出現(xiàn)了薄層色譜法和紙色譜法。在此基礎(chǔ)上，經(jīng)過(guò)一個(gè)世紀(jì)的發(fā)展色譜法已成為一種分析速度快，靈敏度高，分離效果好，應(yīng)用范圍廣泛的重要分析方法。正因?yàn)樯V法有著如此多的優(yōu)點(diǎn)，在醫(yī)藥、衛(wèi)生、食品和化工等行業(yè)應(yīng)用越來(lái)越廣泛。在高校的實(shí)驗(yàn)室里，它也正式成為有機(jī)分析及藥品分析實(shí)驗(yàn)中越來(lái)越重要的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容之一。

折光率(n)是液體和透明半透明固體的物理性質(zhì)之一。液態(tài)單質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)條件下有其固定折光率，同密度、熔點(diǎn)、沸點(diǎn)一樣，可視為常數(shù)。折光率也用于確定液體混合物的組成，當(dāng)組分的結(jié)構(gòu)相似和極性小時(shí)，混合物的折光率和濃度之間常呈線性關(guān)系。溶液中，溶質(zhì)含量的不同，相應(yīng)產(chǎn)生的折光率也不同。上述實(shí)驗(yàn)中,展開(kāi)劑的組分簡(jiǎn)單,僅兩種成分,當(dāng)他們按一定比例混合后,相應(yīng)產(chǎn)生不同折光率。通過(guò)建立工作表,即可快速判斷展開(kāi)劑的效果,是否適用于實(shí)驗(yàn)。

三、結(jié)束語(yǔ)

由本文的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可看出，在大批量，長(zhǎng)時(shí)間的學(xué)生實(shí)驗(yàn)中，用折光率快速判定展開(kāi)劑組分能滿足展開(kāi)要求，簡(jiǎn)單、方便、準(zhǔn)確，同時(shí)在實(shí)驗(yàn)中，我們還可以根據(jù)折光率的數(shù)值變化，相應(yīng)補(bǔ)充某一組分，使其達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，這樣可以達(dá)到提高試劑利用率，減低實(shí)驗(yàn)成本，減少試劑對(duì)環(huán)境影響的目的。因此用阿貝折光計(jì)快速測(cè)定展開(kāi)劑的折光率來(lái)判斷其展開(kāi)效果，不失為一條簡(jiǎn)單可行之路。

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[2]牛彥輝.藥物分析[M].北京：高等教育出版社，2006

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[5]李彤,張慶合,張維冰.高效液相色譜儀器系統(tǒng)[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2004

[6]石東方.藥物分析[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006

Fast tracing the result of developing agent by refractive index could improve the quality of student’s TLC experiment

Fan Zhen
Journal of Anqing medical and pharmaceutical college, Anqing, 246000, China

In order to solve the problem that the ratio of each component of the developing agent in TLC experiment will be changed with the time extended, this paper check refractive index to do fast tracing of the change of components’ by Abbe refractometer. Based on the result of refractive index, experimenter could adjust the developing agent to get high quality experiment result. This paper provides one fast and believable method to measure and adjust the ratio of each component to meet the demand of student’s TLC experiment.

developing agent; refractive index; Abbe refractometer; TLC experiment

2010-04-15

范珍，本科，實(shí)驗(yàn)師。