王 真
(長(zhǎng)江大學(xué)農(nóng)學(xué)院,湖北 荊州 434025)
賀飛英
(長(zhǎng)江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,湖北 荊州 434025)
朱福興
(華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科技學(xué)院,湖北 武漢 430070)
防治水稻紋枯病菌的室內(nèi)藥劑篩選
王 真
(長(zhǎng)江大學(xué)農(nóng)學(xué)院,湖北 荊州 434025)
賀飛英
(長(zhǎng)江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,湖北 荊州 434025)
朱福興
(華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科技學(xué)院,湖北 武漢 430070)
采用菌絲生長(zhǎng)速率法,用6種常見的殺菌劑對(duì)水稻紋枯菌進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。結(jié)果發(fā)現(xiàn),醚菌酯和苯醚甲環(huán)唑的抑菌效果比較好,EC50分別為0.270 1 mg/L和0.766 2 mg/L;其次為菌核凈、多菌靈和三唑酮;抑菌效果最差的是福美雙,其EC50值達(dá)到5.392 5 mg/L。
水稻紋枯菌;生長(zhǎng)速率;防治
水稻紋枯病是世界各產(chǎn)稻區(qū)普遍發(fā)生的病害之一。 近幾年來,隨著施氮水平的不斷提高,水稻紋枯病的危害有逐年加重的趨勢(shì)[1]。目前防治水稻紋枯病的藥劑為井岡霉素。井岡霉素在我國(guó)使用已經(jīng)有二十多年的歷史,因此監(jiān)測(cè)其抗性發(fā)展情況尤為重要。周明國(guó)等[2]、金梅松等[3]檢測(cè)了江蘇、浙江等6省不同用藥水平的水稻紋枯病菌(Rhizoctoniasolania)對(duì)井岡霉素的抗藥性,認(rèn)為田間還未出現(xiàn)抗藥性問題。張穗等[4]發(fā)現(xiàn)引起水稻紋枯病的絲核菌有AG-1IA和AG-1IC 2個(gè)菌絲融合群,前者產(chǎn)生的菌株對(duì)水稻紋枯菌沒有產(chǎn)生抗性,而后者產(chǎn)生致病菌株的頻率雖然很小,但抗性水平卻很高。胡秀榮等[5]用井岡霉素對(duì)福建稻區(qū)的161株水稻紋枯菌進(jìn)行抗性監(jiān)測(cè),發(fā)現(xiàn)該地區(qū)的水稻紋枯菌對(duì)井岡霉素已經(jīng)產(chǎn)生了中等的抗性。鑒于水稻紋枯菌對(duì)井岡霉素存在一定的抗性風(fēng)險(xiǎn),為解決防治水稻紋枯病藥劑單一性的問題,有必要進(jìn)行藥劑的篩選,找出備選替代藥劑,以便為水稻紋枯菌的防治提供更多的理論依據(jù)。
水稻紋枯病菌:室內(nèi)轉(zhuǎn)代培養(yǎng)20次以上。
98.1%多菌靈原藥:用0.1 mol/L的鹽酸,溶解成1 000 mg/L的母液,放于棕色磨口瓶中冷藏備用;96%菌核凈原藥:浙江溫州農(nóng)藥廠生產(chǎn),用甲醇稀釋成1 000 mg/L的母液,放于棕色磨口瓶中冷藏備用;96.6%醚菌酯原藥(江蘇耕耘化工有限公司)、95%三唑酮原藥(四川化學(xué)研究設(shè)計(jì)院)、96%福美雙原藥(河北冠龍農(nóng)化有限公司):3種原藥用丙酮稀釋成10 000 mg/L的母液,放于棕色磨口瓶中冷藏備用。10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑:績(jī)溪農(nóng)華生物科技有限公司生產(chǎn)。
采用PDA培養(yǎng)基[6]。原料配方:去皮馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、蒸餾水1 000 mL。具體的制作方法:將馬鈴薯去皮,切成小塊,于鍋中加水1 000 mL煮沸30 min,用雙層紗布過濾,取其濾液加糖,并加水補(bǔ)足1 000 mL。
將上述6種殺菌劑用無(wú)菌水稀釋成不同濃度,然后按照一定比例注入熔融的PDA培養(yǎng)基中,配成不同濃度的含毒培養(yǎng)基。待含毒培養(yǎng)基冷卻后,用5 mm打孔器打取水稻紋枯菌斑外圍菌絲,用鑷子夾取打好的菌碟,菌絲面朝下放在培養(yǎng)皿的中央,封口后放在26 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h。每個(gè)濃度4次重復(fù),以不含藥培養(yǎng)基為對(duì)照,待對(duì)照的培養(yǎng)皿菌絲長(zhǎng)滿或快要長(zhǎng)滿時(shí),采用十字交叉法測(cè)量菌落的直徑,每個(gè)濃度的4個(gè)重復(fù)取平均值,處理成校正抑制率,抑制率轉(zhuǎn)化為機(jī)率值,濃度轉(zhuǎn)化為對(duì)數(shù)值,用DPS 7.01版軟件分析數(shù)據(jù),并求回歸方程Y=a+bx、相關(guān)系數(shù)r和EC50值。
表1 6種藥劑對(duì)水稻紋枯病菌的室內(nèi)毒力Table 1 Toxicity of 6 fungicides to Rhizoctonia solani Kuhn
6種殺菌劑對(duì)水稻紋枯菌的毒力測(cè)定結(jié)果見表1。從表1可以看出,6種單劑中對(duì)水稻紋枯病菌抑制效果最好的是醚菌酯,其EC50僅為0.270 1 mg/L,其次是苯醚甲環(huán)唑,其EC50值為0.766 2 mg/L。但從這2種藥劑對(duì)水稻紋枯病菌的毒力回歸方程可以發(fā)現(xiàn),其b值都非常小,即隨著濃度的提高,藥劑對(duì)水稻紋枯菌的抑制效果卻很慢,從而可能導(dǎo)致相應(yīng)的EC95值會(huì)很大,所以當(dāng)紋枯病菌大發(fā)生時(shí),這2種藥的治療效果會(huì)很有限,故推薦其作保護(hù)劑使用。多菌靈、菌核凈和三唑酮的EC50都在1.00~2.00 mg/L之間,防治效果相差不大。福美雙的抑菌效果相對(duì)差一些,EC50達(dá)到5.392 5 mg/L,是醚菌酯的20多倍。
表2 不同比例混配藥劑防治水稻紋枯菌的共毒系數(shù)Table 2 The co-toxicity coefficient of the fungicides mixture in different ratios
注:表中的配比以有效成分計(jì)。
選取藥劑福美雙和三唑酮,分別按照1∶1和3∶1的比例混配,結(jié)果如表2所示。從表2可以看出,當(dāng)福美雙和三唑酮2種藥劑的混配比為1∶1和3∶1時(shí),CTC(共度系數(shù))值都在50~200之間,表現(xiàn)為毒力相加作用。
選用常見的6種殺菌劑對(duì)水稻紋枯菌進(jìn)行室內(nèi)生物測(cè)定,發(fā)現(xiàn)醚菌酯的EC50值最小,表明其抑菌效果最好,抑菌效果最差的是福美雙。醚菌酯和福美雙都屬于保護(hù)性的殺菌劑[7],不能內(nèi)吸傳導(dǎo),但抑菌活性卻相差20多倍,這可能與它們作用靶標(biāo)不同有關(guān)。福美雙和三唑酮按照1∶1和3∶1的比例混配,表現(xiàn)為相加作用,但從二者的CTC可以看出,當(dāng)三唑酮的比例較大時(shí),相加作用更明顯,適當(dāng)增大三唑酮的比例,有可能會(huì)表現(xiàn)出更好的相加或增效作用。
[1]李熙英,呂龍石,權(quán)成武.水稻紋枯病化學(xué)防治初報(bào)[J].延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào),1998,20(4):294~295.
[2]周明國(guó),葉鐘音,劉經(jīng)芬.稻紋枯病菌對(duì)井岡霉素抗藥性檢測(cè)、監(jiān)測(cè)和誘導(dǎo)[J].中國(guó)水稻科學(xué),1991,5(2):73~78.
[3]金梅松,蔣文烈.浙江省水稻紋枯病菌對(duì)井崗霉素的抗藥性測(cè)定[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),1997,9(3):127~130.
[4]張 穗,許文霞,薛銀根,等.鄭州郊區(qū)水稻紋枯病菌對(duì)井岡霉素敏感性的初步研究[J].中國(guó)生物防治,1995,11(4):171~173.
[5]胡秀榮.水稻紋枯病對(duì)井岡霉素的抗性監(jiān)測(cè)及其風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[D].福州:福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文.2006.36~38.
[6]許志剛.普通植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1990.62~63
[7]徐漢虹.植物化學(xué)保護(hù)學(xué)(第4版)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2006.138~159.
2010-03-25
王 真( 1982-),男,湖北房縣人,農(nóng)學(xué)碩士,助教,主要從事病原菌抗藥性研究.
朱福興,E-mail:wz020514@163.com.
10.3969/j.issn.1673-1409(S).2010.02.003
S435.111.4+2
A
1673-1409(2010)02-S005-02