宋德花 ，吳立君 ，楊井坤 ，謝曉峰 ，張子群

（1.黑龍江畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院，黑龍江 雙城 150111；2.黑龍江出入境檢驗檢疫局，黑龍江 哈爾濱 150086）

2010年5月，黑龍江省雙城市某鄉(xiāng)先后有3位畜主來我院對其所養(yǎng)的5頭犢牛發(fā)病情況進行就診。通過詢問得知，這幾頭犢?；径际莿偝錾雮€月左右。病犢發(fā)熱，精神沉郁或昏迷。間有腹瀉，有2頭死前發(fā)生腹瀉，并有明顯的脖頸扭轉(zhuǎn)現(xiàn)象。另外2頭犢牛發(fā)病初期排出黃色粥樣糞便，后期排灰白色水樣糞便，混有未消化的凝乳塊、血塊和泡沫，酸臭，肛門失禁。當?shù)孬F醫(yī)對其注射黃芪多糖、替米考星及青鏈霉素等進行治療，效果不明顯。我們通過對其尸體剖檢、糞便實驗室檢查，確診為犢牛大腸桿菌病。經(jīng)臨床強力霉素、桿菌肽和恩諾沙星治療，同時調(diào)整胃腸機能，1周后這2頭犢牛痊愈?，F(xiàn)將診治情況報告如下。

1 診斷的方法與步驟

1.1 臨床剖檢診斷

死亡的犢牛，剖檢可見尸體消瘦，黏膜蒼白，眼眶下陷，肛門、尾部及后肢被稀糞污染。真胃內(nèi)有大量的凝乳塊，黏膜充血、紅腫，并覆有膠狀黏液，胃皺褶有點狀出血。腸內(nèi)容物混有血液和氣泡，惡臭。小腸黏膜充血，在皺褶部有出血，部分黏膜上皮脫落，直腸也可見此變化。腸系膜淋巴結(jié)腫大。肝臟和腎臟蒼白，間或有出血點，膽囊內(nèi)充滿粘稠、暗綠色膽汁。心內(nèi)膜有出血點。

1.2 實驗室診斷

1.2.1 材料準備 雙料乳糖膽鹽、EC肉湯、伊紅美藍瓊脂（EMB）、滅菌生理鹽水、革蘭氏染色液、恒溫箱、水浴鍋、天平、顯微鏡、溫度計、滅菌平皿（直徑90mm）、試管、廣口瓶或三角瓶、移液管、載玻片、接種針、玻璃珠（直徑約5mm）、酒精燈、試管架等。

1.2.2 糞便樣品稀釋 （1）以無菌操作將糞樣25 g放于盛有225 mL滅菌生理鹽水的滅菌三角瓶內(nèi)，經(jīng)充分振搖制成1:10的均勻稀釋液。（2）用l mL滅菌移液管吸取1:10稀釋液l mL，注入盛有9 mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi)，振搖混勻，制成1:100的稀釋液。（3）另取l mL滅菌移液管，按上項操作依次做10倍遞增稀釋液，每遞增稀釋1次，換用1支l mL滅菌吸量管。

1.2.3 發(fā)酵試驗 根據(jù)對檢樣污染情況的估計，我們選擇10倍、100倍、1000倍3個稀釋度，每個稀釋度接種分別接種于3個雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，接種量 l.5 mL。置于（36± l）℃溫箱內(nèi)，培養(yǎng)（24± 2）h。對于不產(chǎn)氣的廢棄，產(chǎn)氣的再進行下一步試驗。

1.2.4 分離培養(yǎng) 將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種在伊紅美藍瓊脂平板上，置于37℃恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng)18～24 h，然后取出觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色、鏡檢和證實試驗。

1.2.5 證實試驗 在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落l～2個進行革蘭氏染色，同時用另一半菌落接種乳糖復(fù)發(fā)酵管，置于（36±l）℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)（24±2）h，觀察產(chǎn)氣情況。

1.2.6 實驗結(jié)果 乳糖發(fā)酵試驗10倍、100倍稀釋的發(fā)酵管各有1管產(chǎn)氣，1000倍稀釋的有2管產(chǎn)氣；接種于伊紅美藍瓊脂平板，菌落紫黑色并有金屬光澤；顯微鏡檢查，可見中等大小的桿菌，無芽孢，革蘭氏染色陰性；再接種乳糖復(fù)發(fā)酵管都出現(xiàn)大量氣體，即可確診為大腸菌群陽性。

2 診斷結(jié)果

根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀和病理剖檢變化可做出初步診斷，再結(jié)合實驗室診斷即可確診。

3 治療

本病的治療原則是抗菌、補液、調(diào)節(jié)胃腸機能和調(diào)整腸道微生態(tài)平衡。

3.1 抗菌

發(fā)病后及時治療，可內(nèi)服高錳酸鉀水，每次4～8 g，配成0.5%水溶液灌服，2～3次/d?；蛴媒?jīng)藥敏試驗對分離的大腸桿菌有抑制作用的抗生素，如土霉素、鏈霉素、硫酸新霉素、強力霉素、恩諾沙星、磺胺咪等。

3.2 補液

根據(jù)病犢牛脫水程度可適當補液。當犢牛有食欲或能自吮時，可給予口服補液鹽（氯化鈉3.5 g，氯化鉀1.5 g，碳酸氫鈉2.5 g，葡萄糖20 g，加常水1000 mL），讓犢牛自由飲用。不能自吮時，可用6%低分子右旋糖酐、生理鹽水、5%葡萄糖、5%碳酸氫鈉各250 mL，氫化考的松100 mg，維生素C 10 mL，混溶后給犢牛1次靜脈注射。補液速度宜慢。重病犢牛也可輸全血治療，選擇病犢牛的母牛血液，用2.5%枸櫞酸鈉50 mL加全血450 mL混合后1次靜脈注射。

3.3 調(diào)節(jié)胃腸機能

可用乳酸2 g、魚石脂20 g、加水90 mL調(diào)勻，每次灌服5 mL，2～3次/d。也可內(nèi)服保護劑和吸附劑，如次硝酸鉍5～10 g、白陶土50～100 g、活性炭10～20 g等，以保護腸黏膜，減少毒素吸收，促進早日康復(fù)。有的用復(fù)方新諾明，按0.06 g/kg，乳酸菌素片5～10片、食母生5～10片，混合后1次內(nèi)服，2次/d，連用2～3 d，療效良好。

3.4 調(diào)整腸道微生態(tài)平衡

當犢牛病情有所好轉(zhuǎn)時、可停止應(yīng)用抗菌藥，內(nèi)服調(diào)整腸道微生態(tài)平衡的生態(tài)制劑。例如，促菌生6～12片，配合乳酶生5～10片，2次/d；或康復(fù)生1～2包，2次/d；或其他乳桿菌制劑。

4 小結(jié)與討論

4.1 大腸桿菌病是由致病性大腸桿菌引起的主要侵害幼畜禽及人的一種傳染病。大腸桿菌是Escherich在1885年發(fā)現(xiàn)的，當時被認為是腸道的一種正常菌群。直到20世紀中葉，才發(fā)現(xiàn)有一些血清型的大腸桿菌對人和動物具有致病性。犢牛大腸桿菌病是初生犢牛的一種急性傳染病，致死率極高。常見的血清型主要是 O78，其次是 O101、O9 、O8、O111、O115、O15、O26等。

4.2 本病多發(fā)于冬春舍飼期間，呈地方流行性或散發(fā)。主要見于生后10日齡左右的犢牛，年齡較大者少見。犢牛主要通過消化道感染，也可通過子宮內(nèi)感染和臍帶感染發(fā)病。凡能降低犢牛機體抵抗力的因素都可以促進本病的發(fā)生，如母牛體質(zhì)瘦弱，飼料中蛋白質(zhì)供應(yīng)不足或維生素缺乏，廄舍陰冷潮濕，犢牛未吮食初乳或哺乳不及時等。

4.3 本病潛伏期很短，僅數(shù)小時。在臨床上常見有3種類型，如敗血型、腸毒血型、白痢型。敗血型常于出現(xiàn)癥狀后數(shù)小時至1 d內(nèi)死亡，有的未出現(xiàn)明顯癥狀即死亡，可在血液和臟器分離到病原性大腸桿菌；腸毒血型較少見，常突然死亡。病程稍長的病例，可見到神經(jīng)癥狀，死前多發(fā)生腹瀉；白痢型病初體溫升高，食欲減退，出現(xiàn)下痢后體溫降至正常。初期排出黃色粥樣糞便，后期排灰白色水樣糞便，混有未消化的凝乳塊、血塊和泡沫，酸臭，肛門失禁，及時治療，一般可治愈，但發(fā)育緩慢。

4.4 犢牛發(fā)病后要及時診斷、治療，常用痢菌凈、硫酸新霉素、強力霉素、鹽酸四環(huán)素、桿菌肽、恩諾沙星等。另外要注意調(diào)整胃腸機能，防止酸中毒。

4.5 為預(yù)防本病，減少對犢牛的危害，在冬春寒冷季節(jié)，圈舍注意保溫，給母牛補充營養(yǎng)。母牛分娩前后，對圈舍要徹底清掃消毒。犢牛出生后要盡早哺乳，可防止本病的發(fā)生。