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      尿素試劑對(duì)葡萄糖測定有攜帶污染

      2011-04-13 04:08:46付柳平
      關(guān)鍵詞:緩沖液分析儀江西

      付柳平

      (劉公廟鎮(zhèn)衛(wèi)生院,江西 樟樹 331212)

      筆者使用TC6060全自動(dòng)生化分析儀檢測同一標(biāo)本的腎功能常規(guī)和葡萄糖的過程中,發(fā)現(xiàn)尿素試劑對(duì)葡萄糖測定有攜帶污染,當(dāng)改變測定項(xiàng)目的分析順序,可有效避免尿素試劑對(duì)葡萄糖測定帶來的攜帶污染?,F(xiàn)報(bào)道如下。

      1 材料與方法

      1.1 儀器 TC6060全自動(dòng)生化分析儀,江西特康科技有限公司生產(chǎn)。

      1.2 試劑

      1.2.1 尿素試劑 江西特康科技有限公司生產(chǎn)。單液體試劑,為酶聯(lián)速率法。試劑組成:Tris緩沖液115mmol/L,谷氨酸脫氫酶>800U/L,NADH0.35mmol/L,二磷酸腺苷1.5mmol/L,α-酮戊二酸7.5mmol/L,尿素酶>40000U/L,非反應(yīng)性填充物及穩(wěn)定劑適量。

      1.2.2 葡萄糖試劑 江西特康科技有限公司生產(chǎn)。雙液體試劑,為GOD-POD法。試劑組成Ⅰ:磷酸鹽緩沖液110mmol/L,葡萄糖氧化酶250U/L,4-羥基苯甲酸10mmol/L,4-氨基安替比林0.3mmol/L。試劑Ⅱ:磷酸鹽緩沖液110mmol/L,過氧化物酶250U/L,非反應(yīng)性填充物及穩(wěn)定劑適量。

      1.2.3 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液 江西特康科技有限公司生產(chǎn)。批號(hào):542716443,靶值:5.05mmol/L。

      1.3 方法

      1.3.1 葡萄糖測定參數(shù) 方法:終點(diǎn)法;溫度:37℃;波長:510nm;樣本用量;4.0μl;試劑Ⅰ用量:240μl,反應(yīng)時(shí)間:120s;試劑Ⅱ用量:60μl,反應(yīng)時(shí)間:400s;檢測點(diǎn)數(shù):3。

      1.3.2 尿素測定參數(shù) 檢測方法:兩點(diǎn)法;溫度:37℃;主波長:340nm;樣本用量:3.0μl;試劑用量:300μl;反應(yīng)時(shí)間:60s;檢測點(diǎn)數(shù):15。

      2 結(jié)果

      2.1 取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液,單獨(dú)測定GLU10次,測得其均值為4.92mmol/L。

      2.2 用尿素試劑當(dāng)作病人標(biāo)本,測定葡萄糖10次,測得其均值為22.83mmol/L。

      2.3 攜帶污染試驗(yàn) 按先測定尿素,再測定葡萄糖的分析程序,測定葡萄糖10次,測得其均值為9.20mmol/L,平均偏差值為:9.20-4.92=4.28,偏差率為:4.28/4.92=87%。

      2.4 改變項(xiàng)目分析順序,具體為:由原來尿素→葡萄糖,改變?yōu)槟蛩亍偰懝檀肌咸烟?。用多份混合血清單?dú)測定葡萄糖10次,測得其均值為5.47mmol/L,然后按上述改變后的分析順序測定葡萄糖10次,測得其均值為5.56mmol/L,平均偏差率為:(5.56~5.47)/5.47=1.65%。實(shí)驗(yàn)表明:通過改變項(xiàng)目分析順序,可以避免尿素試劑對(duì)葡萄糖測定帶來的攜帶污染。

      3 討論

      任何品牌的全自動(dòng)生化分析儀的自凈率都是有限的[1],檢測試劑排序不當(dāng)就會(huì)出現(xiàn)不可逆轉(zhuǎn)的誤差[2],直接影響檢測結(jié)果的可靠性[3],很容易給臨床造成無效數(shù)據(jù),影響臨床診療水平。尿素試劑對(duì)葡萄糖測定有攜帶污染,通過用尿素試劑當(dāng)作病人標(biāo)本進(jìn)行葡萄糖測定,其均值高達(dá)22.83mmol/L,而尿素試劑作為標(biāo)本分別與葡萄糖試劑Ⅰ,Ⅱ進(jìn)行葡萄糖測定,二者測定值均幾乎為零。具體原因,江西特康科技有限公司的工程師確認(rèn)為尿素試劑成分中的葡萄糖直接參加了葡萄糖氧化酶—過氧化物酶的反應(yīng)。因此我們在工作過程中,既要有敏銳的觀察力,又要對(duì)所用試劑的成分有足夠了解,設(shè)計(jì)最佳的項(xiàng)目分析順序,防止試劑針的攜帶污染。

      [1]郭 杰.全自動(dòng)生化分析儀的精密度和交叉污染率的評(píng)價(jià)[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2004,19(2):140-142.

      [2]韓來新.總膽固醇試劑對(duì)總膽汁酸測定有攜帶誤差[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2004,19(1):51-53.

      [3]鄭家齊.編.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量控制[M].第1版,北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:269-271.

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