張培培，韓春超

(山東中醫(yī)藥大學藥學院，山東 濟南 250355)

當歸為傘形科植物Angellica sinensis(Oliv)Diels.的根。具有補血調(diào)經(jīng)，活血止痛，潤腸通便的功效。主要用于熱血虛諸癥，血虛血瘀，月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉，痛經(jīng)，虛寒性腹痛，跌打損傷，癰疽瘡瘍，風寒痹痛，血虛腸燥便秘［1］。當歸所含有效成分主要是阿魏酸［2］，具有促進細胞免疫和體液免疫，增強單核細胞的吞噬功能［3］。本實驗以阿魏酸為指標綜合評判，對萃取法與索氏提取法進行對比研究。

1 儀器與材料

MA110型電子分析天平(上海第二分析儀器廠);KQ—100B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);LXI—Ⅲ離心沉淀器(上海醫(yī)療器械三廠);Agilent 1100高效液相色譜儀。

阿魏酸對照品(批號:110773－200611，供含量測定用)購自中國藥品生物制品檢定所;甲醇為色譜純，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 樣品液的制備 將當歸中藥材粉碎，稱取10～20目的當歸粗粉25 g，浸泡0.5 h，用中性水加熱回流提取3次(加水量依次為藥材重量的10，8，8倍，提取時間依次為3.0，3.0，3.0 h)，提取液用8層紗布分別濾過，濾液離心(3000 r·min－1，15 min)，合并上清液，在水浴鍋上濃縮并定容。

2.2 提取方法比較

2.2.1 索氏提取法制備供試液 取樣品液于蒸發(fā)皿中水浴蒸至近干，加硅藻土3 g，攪勻，烘干，研細，以甲酸－乙酸乙酯(1∶19)索氏提取2 h，回收溶劑，殘渣加適量甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，得到供試液A。

2.2.2 萃取法制備供試液 取樣品液用甲酸－乙酸乙酯(1∶19)萃取(20 mL×6次)，合并萃取液，回收溶劑至干，殘渣加適量甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，得到供試液B。

2.3 對照品溶液的制備 精密稱取阿魏酸對照品2.370 mg，用甲醇－1%冰醋酸(30∶70)溶解并定容至5 mL，制成對照液A(每1 mL含當歸液0.474 mg)，取對照液A，用甲醇－1%冰醋酸(30∶70)稀釋成 0.0077 mg·mL－1，0.0159 mg·mL－1，0.0316 mg·mL－1，0.0633 mg·mL－1，0.1263 mg·mL－1對照液 A1～5。

2.4 阿魏酸的含量測定

2.4.1 色譜條件 色譜柱為 Kromasil C18柱(5 μm，250 mm×4.6 mm);流動相為甲醇－1%冰醋酸(30∶70);檢測波長320 nm;進樣量20 μL;柱溫30 ℃。

2.4.2 線性關系考察 精密吸取2.3項下對照品溶液A1～5，按2.4.1項下色譜條件，依法測定。以進樣濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，計算回歸方程為:Y=3151.9X－3.7704，r=0.9999，表明在0.0077～0.1263 mg·mL－1濃度范圍內(nèi)線性關系良好。

2.4.3 含量測定［4］依次吸取阿魏酸對照品溶液和2.2項下供試液A、B，按2.4.1項下色譜條件，依法測定，結果見圖1、圖2 和圖3、表1。

圖3 索氏提取法的阿魏酸圖譜

表1 2種供試液中阿魏酸成分的含量比較

3 小結與討論

3.1 根據(jù)阿魏酸含量測定結果比較，索氏提取法提取阿魏酸高于萃取法，表明當歸有效成分的提取索氏提取法優(yōu)于萃取法。

3.2 采用不同比例甲醇－水溶液進行試驗，結果發(fā)現(xiàn)加入冰醋酸可明顯改善峰形，提高柱效?？梢罁?jù)不同色譜柱，調(diào)整甲醇與水的比例，以縮短分析時間。

［1］高學敏.中藥學［M］.2版.北京:中國中醫(yī)藥出版社，2007:460.

［2］匡海學.中藥化學［M］.北京:中國中醫(yī)藥出版社，2003:99.

［3］袁麗霞，王紅.HPLC法測定當歸苦參丸中阿魏酸的含量［J］.中國藥事，2008，22(1):61.

［4］張兆旺，王英姿，孫秀梅.當歸苦參丸2種方法提取液的成分比較［J］.中國中藥雜志，1999，24(12):734－735.