鹿瓜復(fù)生膠囊抗股骨頭無(wú)菌性壞死的藥效學(xué)研究

趙五申，孫文格，霍文發(fā)

(1.河北省邢臺(tái)市中醫(yī)醫(yī)院，河北 邢臺(tái) 054001;2.河北省石家莊市中醫(yī)院，河北 石家莊 050051;3.河北省石家莊霍文發(fā)中醫(yī)骨傷醫(yī)院，河北 石家莊 050000)

股骨頭無(wú)菌性壞死發(fā)病率、致殘率日漸增高，尋找特效藥和確切的治療方法是當(dāng)前醫(yī)學(xué)界極為關(guān)注的課題。國(guó)內(nèi)外專家均主張?jiān)缙趬乃啦扇」孟⑹中g(shù)，晚期不可避免地行人工關(guān)節(jié)置換術(shù)。但總體而言，手術(shù)療法的痛苦大、費(fèi)用高、恢復(fù)期長(zhǎng)、局限性廣、遠(yuǎn)期效果不能盡善盡美，因此很多患者難以接受。鹿瓜復(fù)生膠囊以陽(yáng)和湯為基礎(chǔ)加減而得，在臨床上應(yīng)用多年，療效確切，已研究開(kāi)發(fā)成醫(yī)院制劑。筆者對(duì)鹿瓜復(fù)生膠囊抗股骨頭無(wú)菌性壞死的臨床作用進(jìn)行了藥效學(xué)研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

生物顯微鏡(日本Olympus Corporation)。鹿瓜復(fù)生膠囊(石家莊霍文發(fā)中醫(yī)骨傷醫(yī)院提供，批號(hào)為20071120，規(guī)格為0.35 g/粒);仙靈骨葆膠囊(貴州同濟(jì)堂制藥股份有限公司，批號(hào)為071116，規(guī)格為0.5 g/粒);膽固醇試劑盒、甘油三酯試劑盒均為中生北控生物科技股份有限公司產(chǎn)品;內(nèi)毒素(Sigma公司);注射用甲潑尼龍琥珀酸鈉(Pfizer Manufacturing Belgium NV，批號(hào)為R03321，規(guī)格為40 mg)。SD大鼠(清潔級(jí))，雄性，體重180～200 g，動(dòng)物合格證號(hào)為808080，動(dòng)物飼料為消毒飼料，墊料為消毒墊料，均由河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供;動(dòng)物室環(huán)境溫度為20～23℃，相對(duì)濕度45% ～60%;籠具用過(guò)氧乙酸溶液消毒;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)為SYXK(冀)2006-0047。

1.2 試驗(yàn)方法[1]

將大鼠隨機(jī)均分為6組，每組8只，分別設(shè)為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和鹿瓜復(fù)生膠囊小劑量組(0.25 g/kg，相當(dāng)于臨床用藥量的3.5倍)、中劑量組(0.5 g/kg，相當(dāng)于臨床用藥量的7倍)、大劑量組(1.0 g/kg，相當(dāng)于臨床用藥量的14倍)以及仙靈骨葆膠囊組(0.7 g/kg，相當(dāng)于臨床用藥量的14倍)。除正常對(duì)照組外，其余各組大鼠均舌下靜脈注射內(nèi)毒素1次，劑量為10 μg/kg，然后分別于24，48，72 h時(shí)肌肉注射甲潑尼龍琥珀酸鈉各1次，劑量為20 mg/kg，共3次。同時(shí)各給藥組開(kāi)始灌胃給藥，每日1次，連續(xù)6周，劑量為10 mL/kg，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給予等量純凈水。試驗(yàn)期間除正常對(duì)照組外，其余各組大鼠均采用飲水瓶懸吊，使動(dòng)物下肢直立飲水。末次給藥30 min后將動(dòng)物麻醉，腹主動(dòng)脈取血，分離血清，檢測(cè)總膽固醇和甘油三酯含量;剖取右側(cè)股骨頭，置10%甲醛溶液中固定，常規(guī)制成HE染色脫鈣骨切片，光鏡觀察。骨細(xì)胞壞死病理變化以空骨陷窩百分?jǐn)?shù)表示，即在100倍放大倍率下，任選20個(gè)高倍鏡視野，每個(gè)視野讀數(shù)50個(gè)骨陷窩，分別計(jì)數(shù)空骨陷窩數(shù)，計(jì)算空骨陷窩所占百分?jǐn)?shù)。數(shù)據(jù)以±s表示，應(yīng)用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件，采用 t檢驗(yàn)比較各組間差異情況。

2 結(jié)果

2.1 病理組織學(xué)檢查[2]

光鏡觀察可見(jiàn)正常對(duì)照組大鼠股骨頭組織結(jié)構(gòu)正常，骨小梁未見(jiàn)斷裂、變細(xì)，偶見(jiàn)骨陷窩空虛;模型對(duì)照組大鼠股骨頭組織結(jié)構(gòu)紊亂，部分有骨小梁斷裂、變細(xì)、稀疏現(xiàn)象，髓腔脂肪細(xì)胞明顯增多增大，空骨陷窩數(shù)明顯增多(P＜0.01);鹿瓜復(fù)生膠囊各劑量組大鼠股骨頭組織結(jié)構(gòu)較模型對(duì)照組改善，髓腔脂肪細(xì)胞均較少較小，骨小梁稀疏但未見(jiàn)斷裂，空骨陷窩數(shù)均較模型對(duì)照組減少(P＜0.05或 P＜0.01)。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 鹿瓜復(fù)生膠囊對(duì)股骨頭壞死大鼠空骨陷窩數(shù)的影響(±s)

表1 鹿瓜復(fù)生膠囊對(duì)股骨頭壞死大鼠空骨陷窩數(shù)的影響(±s)

注:與模型對(duì)照組比較，＊P ＜0.05，#P ＜0.01(下表同)。

組別正常對(duì)照組模型對(duì)照組鹿瓜復(fù)生膠囊 小劑量組中劑量組大劑量組仙靈骨葆膠囊組劑量(g/kg)——0.25 0.5 1.0 0.7空骨陷窩數(shù)(%)9.2±2.82#27.2±6.67 21.0±5.34＊21.4±3.50＊18.9±4.70#16.5±4.87#

2.2 對(duì)股骨頭壞死大鼠總膽固醇和甘油三酯的影響

模型對(duì)照組大鼠血清總膽固醇和甘油三酯水平均較正常對(duì)照組明顯升高(P＜0.01);鹿瓜復(fù)生膠囊各劑量組大鼠血清總膽固醇和甘油三酯水平均較模型對(duì)照組明顯降低(P＜0.05或 P＜0.01)。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 鹿瓜復(fù)生膠囊對(duì)股骨頭壞死大鼠總膽固醇和甘油三酯的影響(±s)

表2 鹿瓜復(fù)生膠囊對(duì)股骨頭壞死大鼠總膽固醇和甘油三酯的影響(±s)

組別正常對(duì)照組模型對(duì)照組鹿瓜復(fù)生膠囊 小劑量組中劑量組大劑量組仙靈骨葆膠囊組劑量(g/kg)——0.25 0.5 1.0 0.7總膽固醇(mmol/L)1.92±0.33#2.86±0.60 2.40±0.82 2.19±0.64＊2.11±0.46＊2.07±0.48#甘油三酯(mmol/L)0.69±0.11#1.42±0.40 1.06±0.18＊0.81±0.19#0.84±0.13＊0.82±0.20#

3 討論

鹿瓜復(fù)生膠囊主要由熟地黃、續(xù)斷、鹿角膠、骨碎補(bǔ)(燙)、芥子、肉桂、木瓜、丹參、當(dāng)歸、甘草等組成，臨床用于精血不足、筋骨損傷、瘀血阻絡(luò)之“骨蝕”所致髖部疼痛、活動(dòng)后加重、跛行、活動(dòng)受限、下肢無(wú)力、肌肉萎縮等，即西醫(yī)診斷的股骨頭無(wú)菌性壞死。本研究表明，鹿瓜復(fù)生膠囊可降低股骨頭缺血壞死大鼠股骨頭空骨陷窩數(shù)，改善股骨頭顯微結(jié)構(gòu)，并對(duì)其脂代謝紊亂有調(diào)節(jié)作用，在一定劑量范圍內(nèi)，隨著劑量增大，作用增強(qiáng)。該藥效學(xué)結(jié)果與臨床療效基本吻合，并為臨床用藥提供了一定的藥理學(xué)依據(jù)。

[1]李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1991:300-302，353-355.

[2]李 鴻，賈丙申.激素合并內(nèi)毒素誘導(dǎo)大鼠股骨頭壞死掃描電鏡觀察[J].中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志，2007，17(5):256-258.