韓金多,謝洪云,程新平,徐芬芬
(上饒師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,江西 上饒 334001)
我國(guó)有2 000萬(wàn)hm2以上鹽漬化土地,約占全國(guó)可耕地面積的25%,且有逐年增加的趨勢(shì)。土壤鹽漬化是困擾農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的一大難題,也是嚴(yán)重影響農(nóng)作物產(chǎn)量的重要因素之一[1-4]?;ǚ勖劝l(fā)和花粉管生長(zhǎng)是高等植物有性生殖過(guò)程中的一個(gè)重要環(huán)節(jié),都需要有精確的調(diào)控才能順利完成[5-7]。
毛杜鵑(Rhododendron pulchrum)是杜鵑花科杜鵑花屬落葉灌木,是重要的園林綠化樹(shù)種,具有綠化和美化的雙重功能。通過(guò)遺傳改良的方法使其能適應(yīng)鹽堿地的立地條件,對(duì)于豐富濱海鹽堿地城市綠化樹(shù)種資源具有深遠(yuǎn)的意義和廣闊的應(yīng)用前景。目前關(guān)于環(huán)境脅迫對(duì)杜鵑的研究?jī)H限于水分脅迫[8-10],而未見(jiàn)鹽脅迫對(duì)其生長(zhǎng)特別是花粉萌發(fā)的報(bào)道。為此,試驗(yàn)采用花粉人工培養(yǎng)法研究了不同濃度的NaCl對(duì)毛杜鵑花粉萌發(fā)的影響,以期為毛杜鵑的雜交育種和鹽堿地的引種栽培提供一定的理論依據(jù)。
供試毛杜鵑植株種植于上饒師范學(xué)院校園。2011年4月30日取毛杜鵑微開(kāi)花朵,于晴天上午8∶00~9∶00 采集盛花期花粉。
基本培養(yǎng)基:100 mg/L蔗糖,10 mg/L硼酸,添加0.8%的瓊脂。基本培養(yǎng)基中加入不同濃度的NaCl(使 NaCl終濃度分別為:0、2、5、10、20、50 mmol/L)。
將加入了不同濃度的NaCl培養(yǎng)基分別滴到載玻片上,待培養(yǎng)基凝固后,把現(xiàn)采的花粉均勻地輕拍到培養(yǎng)基上。標(biāo)注培養(yǎng)基配方號(hào)和培養(yǎng)時(shí)間,置于25℃的恒溫箱內(nèi)暗處培養(yǎng)3 h后,開(kāi)始觀察花粉萌發(fā)情況,測(cè)定花粉萌發(fā)率和花粉管長(zhǎng)度,花粉萌發(fā)以花粉管伸長(zhǎng)超過(guò)花粉粒直徑為標(biāo)準(zhǔn)。每處理重復(fù)3次,每重復(fù)觀察5個(gè)視野,每個(gè)視野花粉粒數(shù)不小于50粒,每視野隨機(jī)選取3個(gè)花粉測(cè)量花粉管長(zhǎng)度。
花粉萌發(fā)率(%)=(萌發(fā)花粉數(shù)/花粉總數(shù))×100
由表1可知,低濃度的NaCl(2mmol/L)對(duì)毛杜鵑花粉萌發(fā)有促進(jìn)作用。當(dāng)NaCl濃度大于5mmol/L時(shí)對(duì)毛杜鵑花粉萌發(fā)有抑制作用,且抑制程度隨培養(yǎng)基中NaCl濃度的增大而加強(qiáng),50mmol/L幾乎完全抑制花粉萌發(fā)。NaCl顯著(P<0.05)抑制毛杜鵑花粉萌發(fā)的濃度為10mmol/L,此時(shí)花粉萌發(fā)率下降到19.30%。
表1 NaCl對(duì)毛杜鵑花粉萌發(fā)的影響
由表1可知,5mmol/L的NaCl就能夠顯著(P<0.05)抑制花粉管的生長(zhǎng),當(dāng)NaCl濃度達(dá)50mmol/L時(shí),花粉管長(zhǎng)度幾乎測(cè)不到(圖1)。這表明NaCl對(duì)紫荊花粉管的生長(zhǎng)有抑制作用,高濃度(50 mmol/L)的NaCl甚至可以完全抑制花粉管的伸長(zhǎng)。
圖1 不同濃度NaCl處理下毛杜鵑花粉萌發(fā)情況
目前,關(guān)于鹽脅迫對(duì)花粉萌發(fā)方面的報(bào)道較少。丁彬等[11-13]研究發(fā)現(xiàn),NaCl對(duì)百合花粉萌發(fā)有抑制作用,顯著抑制百合花粉萌發(fā)的濃度為25 mmol/L。王志春等[14]研究了鹽堿脅迫對(duì)水稻花粉萌發(fā)的影響,發(fā)現(xiàn)鹽堿脅迫下水稻花粉的掃描特征發(fā)生了變化,水稻花粉生活力隨鹽堿脅迫的增強(qiáng)而降低,離體花粉在培養(yǎng)基上的萌發(fā)率呈下降趨勢(shì)。試驗(yàn)測(cè)定了不同濃度NaCl脅迫下毛杜鵑花粉活力和花粉管長(zhǎng)度,結(jié)果表明,低濃度的NaCl(2 mmol/L)對(duì)毛杜鵑花粉萌發(fā)有促進(jìn)作用,高濃度NaCl(>5 mmol/L)抑制毛杜鵑花粉萌發(fā),且抑制程度隨培養(yǎng)基中NaCl濃度的增大而加強(qiáng)。表明毛杜鵑花粉萌發(fā)對(duì)NaCl較敏感,稍高濃度的NaCl即可能影響其受精過(guò)程。
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