周競奇

(河南省濟(jì)源市人民醫(yī)院病理科 河南濟(jì)源 454650)

腫瘤的發(fā)生發(fā)展與細(xì)胞凋亡紊亂密切相關(guān)。Smac可以結(jié)合IAPs,從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。我們前期研究的結(jié)果顯示Smac在卵巢漿液性腫瘤中表達(dá)增加[1],為進(jìn)一步明確Smac和卵巢漿液性癌之間的關(guān)系,我們采用了組織芯片技術(shù),著重探討Smac和各種臨床指標(biāo)之間的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 材料

病例均來自濟(jì)源市人民醫(yī)院病理科2006年至2008年存檔材料。145例卵巢漿液性囊腺癌均經(jīng)復(fù)查和確診?；颊吣挲g45～65歲,平均55歲。其中高分化45例,中分化50例,低分化50例;并選取24例正常卵巢組織作為對照。兔IgG多克隆抗體Smac(進(jìn)口分裝),以及SP兩步法試劑盒和DAB顯色劑均購自北京中杉生物公司。

1.2 方法

組織芯片:用手電鉆在空白蠟塊上構(gòu)建點(diǎn)陣,用腹穿針把目標(biāo)組織穿刺取下圓柱狀標(biāo)本,種植到對應(yīng)的點(diǎn)陣中。38℃恒溫箱中烘烤2h,使與空白蠟塊融合為一體。采用sp兩步法,按照免疫組織化學(xué)檢測試劑盒說明書指導(dǎo)步驟進(jìn)行染色,光鏡下觀察。

1.3 結(jié)果分析和判斷

Smac陽性信號以細(xì)胞漿出現(xiàn)淡黃色為陽性。根據(jù)陽性細(xì)胞占全部腫瘤細(xì)胞的百分比判斷結(jié)果:陽性細(xì)胞數(shù)<10%為陰性;陽性細(xì)胞數(shù)>10%為陽性[2]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 11.5進(jìn)行t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)和單向方差分析。當(dāng)P＜0.05時(shí),其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 Smac在卵巢漿液性囊腺癌中及正常卵巢中的表達(dá)

2 結(jié)果

Smac在145例卵巢漿液性囊腺癌中125例表達(dá),表達(dá)率為86.2%,在對照組24例中14例表達(dá),表達(dá)率58.39%。陽性信號主要定位于細(xì)胞質(zhì)。Smac蛋白在卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)率和腫瘤患者的年齡,腫瘤的大小,等均無相關(guān)性(P>0.05),而不同分化程度的病例Smac蛋白表達(dá)率具有顯著性(P<0.05)(表1)。

3 討論

Smac是2000年Wang[3]實(shí)驗(yàn)小組首次報(bào)道從HeLa細(xì)胞中分離出一種新的線粒體蛋白質(zhì),定位于線粒體,在凋亡信號刺激下與細(xì)胞色素c一同從線粒體釋放到細(xì)胞質(zhì),與IAPs結(jié)合抑制其抗凋亡活性而促進(jìn)細(xì)胞凋亡[4]。本研究表明Smac在卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)率高于對照組。說明Smac在卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)是一個(gè)經(jīng)常性的事件,顯示其和卵巢漿液性囊腺癌的發(fā)生有關(guān),可能的原因?yàn)镾mac表達(dá)的增加相應(yīng)的導(dǎo)致了IAPs的增加,Smac在卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)與患者年齡、腫瘤大小等均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但與組織的分化程度成負(fù)相關(guān)(P<0.05),提示Smac在卵巢漿液性囊腺癌的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。

[1]胡瓊,李維山,鄭洪.卵巢漿液性腫瘤中凋亡調(diào)控因子Smac Caspase-9和Caspase-3的表達(dá)及意義[J].中國腫瘤臨床,2007,19(2):497～500.

[2]郭琦.Claudin-1和Claudin-3在食管鱗癌中的表達(dá)[J].中國腫瘤臨床,2009,36(6):340～344.

[3]Du c,Faag M,Li Y.Smac,a mitochondriel protein that promotes cy-tochrome c-dependent caspases,activation by eliminating IAP inhibition[J].Cell,2000,102(1):33～42.

[4]5 Wu G,Chai J,Suher TL,et a1.a1.structural basis of IAP recognition of IAP recognition by Smac／DIABLO[J].Nature,2000,408(68l5):1008～1012.