東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 李 杰 田 博 徐良梅＊ 單安山 王洪斌

在代謝過(guò)程中，機(jī)體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生一些氧自由基，這些氧自由基攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，其終產(chǎn)物丙二醛（MDA）等會(huì)引起膜脂、膜蛋白的交聯(lián)，最終使膜蛋白構(gòu)象發(fā)生改變，影響膜蛋白活性，進(jìn)而影響細(xì)胞的各種功能（Medow 等，1994；Urszula 等，1989）。同時(shí)，機(jī)體內(nèi)也存在著清除氧自由基的酶系統(tǒng)，其中包括SOD、CAT、GSH-Px等，能清除超氧陰離子自由基（O2-），保護(hù)細(xì)胞免受損傷，對(duì)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡起著重要作用。

近年來(lái)，尋找可清除體內(nèi)過(guò)量自由基外源植物活性成分，提高動(dòng)物機(jī)體抗氧化能力成為人們研究關(guān)注的熱點(diǎn)。許多試驗(yàn)表明，中草藥女貞子具有較強(qiáng)的抗氧化能力（劉玉芹等，2009；郭曉秋等，2007；張振明和葛斌，2006；李群道等，2005）。本試驗(yàn)在前人研究的基礎(chǔ)上，通過(guò)添加女貞子（生品）原粉、酒蒸女貞子（酒蒸品）原粉的日糧飼喂肉雞，進(jìn)一步研究不同類型的女貞子原粉對(duì)肉雞抗氧化功能的影響，深入探討女貞子及酒蒸女貞子替代抗生素的可行性，并確定最佳添加量及最優(yōu)配方，為肉雞的安全生產(chǎn)提供有效的調(diào)控措施。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及日糧 選用1日齡AA肉雞公雛360羽 ，試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧養(yǎng)分含量均達(dá)到或超過(guò)NRC（1994）標(biāo)準(zhǔn)，日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理 將360羽1日齡AA肉雞公雛隨機(jī)分為6組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。試驗(yàn)1組（對(duì)照組）飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)2～6組在基礎(chǔ)日糧中分別添加5 mg/kg黃霉素，0.5%、1%女貞子原粉，0.5%、1%酒蒸女貞子原粉。從1周齡開(kāi)始正式試驗(yàn)至8周齡結(jié)束。試驗(yàn)雞采用常規(guī)3層籠養(yǎng)，自由采食和飲水，控制舍內(nèi)的溫度、濕度和光照。具體實(shí)施依據(jù)《現(xiàn)代肉雞生產(chǎn)手冊(cè)》（單永利，2001）進(jìn)行。

1.3 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定 于試驗(yàn)4周和8周每個(gè)重復(fù)選2只體重接近平均體重的健康雞屠宰，頸靜脈采血，3000 r/min離心10 min，取上清液，同時(shí)采集肝組織，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

血清和組織中總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性測(cè)定采用黃嘌呤氧化酶法，丙二醛（MDA）含量測(cè)定采用硫代巴比妥酸法，谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活性測(cè)定采用DTNB顯色法，過(guò)氧化氫酶（CAT）活性測(cè)定采用可見(jiàn)光法，總抗氧化能力（T-AOC）測(cè)定采用菲啉絡(luò)合法，組織勻漿蛋白質(zhì)測(cè)定采用考馬斯亮蘭法，試劑均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒，測(cè)定過(guò)程完全按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS（Ver8.12）軟件包中的GLM過(guò)程（一般線性模型過(guò)程）對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果分析

2.1 不同處理對(duì)肉雞血清和肝臟中T-SOD活性的影響 見(jiàn)表2。4周齡時(shí)，各試驗(yàn)組血清中TSOD與對(duì)照組相比均有所提高，但差異不顯著（P＞0.05）。酒蒸女貞子組肝臟中T-SOD均高于其他各組（P＜0.05）。女貞子組肝臟中T-SOD均與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）。8周齡時(shí)，1%酒蒸女貞子組血清T-SOD活性顯著高于對(duì)照組 （P＜0.05），與其他組相比差異不顯著 （P＞0.05）。

表1 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

表2 不同類型女貞子對(duì)肉雞血清和肝臟中T-SOD活性的影響

2.2 不同處理對(duì)肉雞血清和肝臟中MDA含量的影響 見(jiàn)表3。4周齡時(shí)，各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比血清、肝臟中MDA含量均有所降低。其中，1%酒蒸女貞子組血清中MDA含量與其他各組均差異顯著（P＜0.05）。1%女貞子組血清中MDA含量與對(duì)照組、黃霉素組相比差異顯著（P＜0.05）。1%酒蒸女貞子組肝臟中MDA含量與對(duì)照組有顯著差異（P＜0.05）。8周齡時(shí)，1%酒蒸女貞子組血清中MDA含量與1%女貞子組差異不顯著，但與其他各組均有顯著差異（P＜0.05）；1%女貞子組血清中MDA含量與對(duì)照組、黃霉素組相比差異顯著（P＜0.05）。各試驗(yàn)組肝臟中MDA含量與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表3 不同類型女貞子對(duì)肉雞血清和肝臟中MDA含量的影響

2.3 不同處理對(duì)肉雞血清和肝臟中GSH-Px活性的影響 見(jiàn)表4。4周齡時(shí)，各試驗(yàn)組血清和肝臟的GSH-Px活性與對(duì)照組相比均有所提高，但差異均不顯著（P＞0.05）。8周齡時(shí)，酒蒸女貞子組、1%女貞子組血清GSH-Px活性與對(duì)照組、黃霉素組、0.5%女貞子組相比差異顯著（P＜0.05）。酒蒸女貞子組肝臟GSH-Px活性與對(duì)照組、黃霉素組、0.5%女貞子組相比差異顯著（P＜0.05）。

2.4 不同處理對(duì)肉雞血清和肝臟中CAT活性的影響 見(jiàn)表5。4周齡時(shí)，血清CAT活性各試驗(yàn)組均比對(duì)照組高，但差異不顯著（P＞0.05）。1%酒蒸女貞子組肝臟中的CAT與對(duì)照組、黃霉組相比差異顯著（P＜0.05）。8周齡時(shí)，血清CAT活性各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異均顯著（P＜0.05）。肝臟中的CAT活性各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異不顯著（P ＞ 0.05）。

表4 不同類型女貞子對(duì)肉雞血清和肝臟中GSH-Px活性的影響

表5 不同類型女貞子對(duì)肉雞血清和肝臟中CAT活性的影響

2.5 不同處理對(duì)肉雞血清和肝臟T-AOC的影響 見(jiàn)表6。4周齡時(shí)，各試驗(yàn)組血清T-AOC均較對(duì)照組有所提高，但差異不顯著（P＞0.05）。肝臟T-AOC各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異顯著 （P＜0.05）。8周齡時(shí)，1%酒蒸女貞子組血清T-AOC與對(duì)照組、黃霉組相比差異顯著（P＜0.05），與女貞子組、0.5%酒蒸女貞子組差異不顯著 （P＜0.05）。酒蒸女貞子組肝臟T-AOC與對(duì)照組、黃霉素組相比差異顯著（P＜0.05），與女貞子組均無(wú)顯著差異（P ＞ 0.05）。

表6 不同類型女貞子對(duì)肉雞血清和肝臟中T-AOC防性的影響

3 討論

適量自由基對(duì)細(xì)胞的分裂、生長(zhǎng)、解毒、消炎等有積極作用。自由基過(guò)剩會(huì)誘發(fā)炎癥，免疫失調(diào)，惡性腫瘤等多種疾病，也是促進(jìn)機(jī)體衰老的重要因素（Marx，1987）。正常情況下，機(jī)體會(huì)不斷產(chǎn)生多種抗自由基的活性物質(zhì)，這些活性物質(zhì)不斷清除體內(nèi)過(guò)剩自由基，從而使機(jī)體免受損害。

已發(fā)現(xiàn)多種天然中草藥具有延緩衰老的作用，其作用機(jī)理與自由基有關(guān)。研究表明，女貞子多糖可顯著抑制機(jī)體免疫器官退化及提高免疫功能，還可清除動(dòng)物體內(nèi)羥自由基、超氧陰離子自由基和活性氧，提高抗氧化酶活力（張振明和葛斌，2006）。Li和 Wang 等（2004）研究表明，女貞子及其有效成分齊墩果酸能清除自由基，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化物丙二醛的生成。李群道等（2005）報(bào)道，女貞子及五味子可提高肉雞血清和心臟SOD活性，降低血清和心臟MDA含量。張振明等（2005）研究表明，女貞子能使衰老模型小鼠肝、腎組織中SOD及GSH-Px活力提高，MDA含量下降。郭曉秋等（2007）報(bào)道，女貞子水提物可提高肉仔雞血清和組織中SOD活性，降低心臟和肝臟中MDA含量。劉玉芹等（2009）報(bào)道，女貞子、五味子可提高肉雞血清和心臟SOD活性，降低血清和心臟MDA含量。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料中添加1%女貞子原粉可顯著降低血清MDA含量，顯著提高肉雞生長(zhǎng)早期血清T-AOC，生長(zhǎng)后期血清GSH-Px、CAT活性，進(jìn)一步證實(shí)了女貞子具有抗氧化作用，與前人報(bào)道結(jié)果一致。同時(shí)，酒蒸女貞子原粉可通過(guò)提高肉雞血清和肝臟T-SOD、CAT、GSH-Px活性，降低血清MDA含量來(lái)發(fā)揮抗氧化作用。

4 結(jié)論

（1）飼料中添加女貞子可顯著提高血清中GSH-Px活性。

（2）女貞子、酒蒸女貞子均可降低血清中MDA的含量，其中添加1%酒蒸女貞子抵制脂質(zhì)過(guò)氧化效果最佳。

（3）酒蒸女貞子可提高肉雞血清和肝臟中TSOD、GSH-Px 、CAT、T-AOC 活性。

（4）女貞子原粉、酒蒸女貞子原粉可以取代抗生素作為飼料添加劑，其中1%酒蒸女貞子替代效果最好。

[1]單永利.現(xiàn)代肉雞生產(chǎn)手冊(cè)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2001.

[2]郭曉秋，單安山，趙云，等.女貞子水提物對(duì)AA肉仔雞抗氧化指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2007，19（1）：81 ～ 85.

[3]李群道，單安山，馬得瑩，等.女貞子、五味子與寡糖配伍對(duì)肉雞抗氧化功能和血液生化指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2005，17（1）：45 ～ 48.

[4]劉玉芹，楊彩然，董淑珍.女貞子五味子對(duì)肉雞抗氧化功能的影響[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2009，45（1）：51 ～ 52.

[5]張振明，蔡曦光，葛斌，等.女貞子多糖的抗氧化活性研究[J].中國(guó)藥師，2005，8（6）：489 ～ 491.

[6]張振明，葛斌.女貞子多糖的抗衰老作用[J].中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2006，4（2）：108 ～ 111.

[7]Li H，Wang Q J.Evaluation of free hydroxyl radical scavenging activities of some Chinese herbs by capillary zone electrophoresis with amperometric detection[J].Anal Bioanal Chem，2004，378：1801 ～ 1805.

[8]Marx J L.Oxyen free radical linked to many disease[J].Science，1987，235（4788）：520 ～ 524.

[9]Medow M S，Kletter L B，Trachtman H.Increased lipid fluidity in synaptosomes from brains of hyperosmolal rats[J].Biochim Biophys Acta，1994，1193（2）：323 ～ 329.

[10]National Research Council.Nutrient Requirement of Poultry 9th[M].Washington，D C： National Academe Press，1994.

[11]Urszula R，Guangjiu Liu，Robert A F.Peroxidation induced changen in synaptosomal transport of dopamine and r-aminobutyric[J].Free Rad Biol Med，1989，6：485 ～ 492.