劉東權(quán),王曉文,陳 鑫,許桂艷
遼寧倍奇藥業(yè)有限公司,遼寧 丹東 118008
氯雷他定為長效三環(huán)類抗組胺藥,可通過選擇性地拮抗外周H1受體,抑制組胺所引起的過敏性癥狀,臨床主要用于緩解過敏性鼻炎的鼻部或非鼻部癥狀,如噴嚏、流涕、鼻癢、鼻塞、眼癢及眼部燒灼感,亦適用于緩解慢性蕁麻疹、瘙癢性皮膚病及其他過敏性皮膚病的癥狀及體征[1-2]。泡騰片為一種促進藥物快速崩解釋放的劑型,其崩解速度快、藥物分散均勻、溶出好、起效快,特別適用于兒童、老年人和不能吞咽固體制劑的患者[3]。
目前,針對氯雷他定泡騰片這一劑型,為了更好地控制其質(zhì)量,保證用藥量的準(zhǔn)確,筆者參照氯雷他定片國家藥品標(biāo)準(zhǔn)[4],按照《中國藥典》2005年版二部[5]藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證的要求,進行了氯雷他定泡騰片的含量和含量均勻度測定的研究。
LC-10A高效液相色譜儀 (日本島津公司),AE240電子分析天平(梅特勒-托利多公司)。
氯雷他定泡騰片(自制,批號:081221、081222、081223,規(guī)格:10 mg),氯雷他定對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號:100615-200602,含量:99.8%),甲醇為色譜純,磷酸二氫鉀為分析純。
色譜柱為 Thermo BDS HYPERSIL C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相為甲醇-0.02 mol/L 磷酸二氫鉀溶液(83∶17);檢測波長為247 nm;流速為 1.0 ml/min;進樣量為20 μl。 理論板數(shù)按氯雷他定峰計算不得低于1000。
2.2.1 對照品溶液的制備 取氯雷他定對照品約25 mg,精密稱定,置50 ml量瓶中,加流動相超聲溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取5 ml,置50 ml量瓶中,加流動相稀釋至刻度,搖勻。
2.2.2 供試品溶液的制備 取氯雷他定泡騰片20片,精密稱定,研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于氯雷他定10 mg),置50 ml量瓶中,加流動相適量,超聲或振搖,使氯雷他定溶解,加流動相稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液5 ml,置20 ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻。
2.2.3 陰性對照溶液的制備 取空白片,按“2.2.2”項下方法配制陰性對照溶液。
照上述色譜條件,分別取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各20 μl,注入高效液相色譜儀中測定,陰性樣品在氯雷他定峰處無干擾峰出現(xiàn),表明輔料對氯雷他定的測定無干擾。該HPLC條件下,系統(tǒng)的理論板數(shù)為5316。見圖1。
取氯雷他定對照品用流動相溶解并稀釋制成2.5 μg/ml的溶液,逐步稀釋,按上述色譜條件測定,選取儀器噪音10倍者作為定量限,求得定量限為 30 ng/ml×20 μl=0.6 ng。
精密稱取氯雷他定對照品50.02 mg,置50 ml量瓶中,加流動相超聲溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取1、3、5、7、10 ml,分別置于100 ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻,分別進樣20 μl,結(jié)果見表1。以峰面積A為縱坐標(biāo),濃度C(μg/ml)為橫坐標(biāo),得線性回歸方程:A=88824C+50233(r=0.9999), 表明在 10.0~100.0 μg/ml的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。具體數(shù)值,見表1。
按空白處方配比稱取各輔料,共9份,置于100 ml量瓶中,加入氯雷他定對照品約16、20、24 mg,精密稱定,各3份,分置上述量瓶中。加流動相使氯雷他定溶解并稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液5 ml,置20 ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻,進樣20 μl。用標(biāo)準(zhǔn)曲線分別計算氯雷他定的回收率。結(jié)果顯示,氯雷他定的平均回收率為99.4%,RSD為0.84%。見表2。
表1 線性關(guān)系試驗測定結(jié)果
表2 回收率試驗結(jié)果(n=9)
取樣品含量測定溶液 (批號:081221),精密量取20 μl注入色譜儀,重復(fù)進樣9次。測得峰面積分別為4402562、4437341、4460638、4444647、4504033、4467721、4455800、4521340、4529849,平均值為 4469326,RSD 為 0.88%。
取樣品含量測定溶液(批號:081221),放置8 h,分別于0、2、4、6、8 h 測定, 峰面積分別為 4406977、4412754、4396955、4396898、4439359, 平均值為 4410589,RSD為0.35%,說明樣品溶液在一般分析時間內(nèi)(8 h)穩(wěn)定。
取3批樣品和對照品,按“2.2”項下方法配制對照品溶液和供試品溶液,按“2.1”項下方法測定,以外標(biāo)法按峰面積計算樣品的含量,結(jié)果含量分別為100.7%、99.3%、100.5%。
取本品1片,置50 ml量瓶中,加流動相適量,超聲或振搖,使氯雷他定溶解,加流動相稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液5 ml,置20 ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。按“2.2.1”項下方法配制對照品溶液,按“2.1”項下方法測定,按外標(biāo)法以峰面積計算含量,結(jié)果見表3。
表3 含量均勻度測定結(jié)果
由表3可知,三批樣品含量均勻度測定結(jié)果均符合《中國藥典》2005年版二部附錄X E含量均勻度項下的有關(guān)規(guī)定(A+1.80S≤15.0)。
國家藥品標(biāo)準(zhǔn)中,氯雷他定片含量和含量均勻度測定均采用內(nèi)標(biāo)法[4],由于本品的處理步驟比較簡單,因此采用外標(biāo)法測定含量和含量均勻度。該標(biāo)準(zhǔn)中測定波長為254 nm,由于氯雷他定在247 nm處有最大吸收,因此選擇247 nm作為檢測波長。
綜上所述,用HPLC法測定氯雷他定泡騰片的含量和含量均勻度,方法靈敏、可靠、簡便,可有效地控制產(chǎn)品的質(zhì)量。
[1]張德強,柯東華,莫祝容.氯雷他定糖漿含量及有關(guān)物質(zhì)的HPLC測定[J].今日藥學(xué),2011,21(3):167-169.
[2]夏學(xué)勵.氯雷他定片的制備及質(zhì)量控制[J].中國藥房,2006,17(21):1624-1625.
[3]吳楊冰,唐皓.泛昔洛韋泡騰片的處方優(yōu)選[J].醫(yī)藥導(dǎo)報,2006,25(7):692-693.
[4]國家藥典委員會.國家藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn):氯雷他定片國家藥品標(biāo)準(zhǔn)[S].50冊.北京:人民衛(wèi)生出版社,2005:129.
[5]國家藥典委員會.中國藥典[S].二部.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:附錄172-173.