幽門螺桿菌與膽囊結(jié)石相關(guān)性的研究

孫和平 郭定剛 吳建國

浙江省溫嶺市中醫(yī)院 317500

消化道潰瘍病的發(fā)生與H.pylori感染密切相關(guān)已無爭議，然而膽囊結(jié)石的發(fā)生是否與H.pylori感染有關(guān)目前還難以定論，很多學者做了相關(guān)的研究，發(fā)現(xiàn)膽囊結(jié)石患者的膽囊黏膜、膽汁、結(jié)石中均發(fā)現(xiàn)有H.pylori活動的蹤跡，推出 H.pylori的感染可能導致膽囊結(jié)石的發(fā)生，本文選擇消化道潰瘍患者為研究對象，驗證其中的H.pylori感染與膽囊結(jié)石的相關(guān)性，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008年9月1日－2010年5月31日在我院住院治療的87例上消化道潰瘍患者，根據(jù)快速尿素酶試驗法檢測H.pylori，分為H.pylori陽性組及H.pylori陰性組，比較兩組的膽囊結(jié)石患病率。H.pylori陽性組35例，男26例，女9例，年齡31～86歲，平均年齡55.6歲，其中胃潰瘍9例，十二指腸潰瘍20例，復合潰瘍6例，B超檢查見膽囊結(jié)石2例；H.pylori陰性組52例，男38例，女14例，年齡23～87歲，平均年齡58.7歲，其中胃潰瘍8例，十二指腸潰瘍32例，復合潰瘍12例，B超檢查見膽囊結(jié)石6例。兩組病例在性別、年齡組成上有無差異。入選標準：2008年9月1日－2010年5月31日在我院住院治療，并行胃鏡、膽囊B超、H.pylori檢查的病例；剔除標準：缺少上述3項檢查之一者，既往曾有過抗H.pylori治療史的病例。

1.2 方法 所有患者入院后均行腹部B超、胃鏡檢查及H.pylori檢測，行纖維胃鏡檢查時，于胃竇部距幽門口3～5cm處大彎側(cè)鉗取活組織一塊，采用福建三強生物化工有限公司提供的診斷試劑盒，將進行涂片后的黏膜浸于快速尿素酶液中，觀察5min，試劑由黃色變成紅色為陽性，無變化為陰性。

1.3 統(tǒng)計處理 采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件包處理數(shù)據(jù)，采用χ2檢驗，以P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

HP陰性組患者膽囊結(jié)石患病率為11.54%，H.pylori陽性組膽囊結(jié)石患病率為5.71%，χ2＝0.0034，P＞0.05，H.pylori陰性組的膽囊結(jié)石患病率高于H.pylori陽性組，然而統(tǒng)計學顯示兩者無顯著差異，詳見表1。

表1 兩組膽囊結(jié)石患病率比較

3 討論

膽囊結(jié)石大多是膽固醇類結(jié)石，傳統(tǒng)認為是由于膽汁中膽固醇過飽和、膽汁中膽固醇成核過程異常以及膽囊功能異常等因素共同作用下形成，較少考慮到細菌的作用，直到1995年，Swidsinski等［1］采用分子生物學方法，在膽固醇結(jié)石中分離到細菌DNA，并進行擴增、克隆和測序，證明膽固醇結(jié)石中存在細菌，使得人們開始考慮細菌在膽固醇結(jié)石發(fā)病機制中的作用。此后Figura等［2］的研究進一步提出，H.pylori感染及H.pylori相關(guān)抗原可能是促進膽石形成的潛在危險因素。此后有很多學者通過不同的方法對膽囊標本的膽囊黏膜、膽汁、膽石進行細菌檢測，結(jié)果大相徑庭，有報道上述樣本中存在H.pylori DNA，也有人報道未發(fā)現(xiàn)，但細菌培養(yǎng)的結(jié)果基本一致，無幽門螺桿菌生長。Fox等［3］利用特異性的螺桿菌16SrRNA基因引物，對23例慢性膽囊炎患者的膽汁和膽囊黏膜行PCR檢測，其中13例膽汁和9例膽囊黏膜為陽性，并經(jīng)16SrRNA序列鑒定為 Helicobacter bilis，Helicobacter pullorum和Flex－ispira rappini，提示除了普通細菌以外，膽道疾病還可能與耐膽汁的螺桿菌感染有關(guān)，但Fox鑒定的結(jié)果并非是幽門螺桿菌。Rudi等［4］重復了Fox的實驗，報告50例標本通過培養(yǎng)及多種螺桿菌16SrRNA基因引物經(jīng)PCR和Southern印跡法檢測均無陽性，并認為兩者間無明顯相關(guān)性，抑或由地域差異引起。Robert等［5］同樣采用16S rRNA的方法也未能從膽囊結(jié)石患者膽汁中檢出H.pylori DNA；Chen等［6］雖從膽囊結(jié)石膽汁中檢出H.pylori DNA，但與無結(jié)石組間無差異，從而認為H.pylori并未參與膽囊結(jié)石的形成。Silva等［7］應用PCR檢測方法，發(fā)現(xiàn)H.pylori DNA在膽結(jié)石患者的膽汁、膽囊組織中的檢出率分別為31.3%、42.9%，但對膽結(jié)石患者的膽囊黏膜、膽汁進行細菌培養(yǎng)，未見H.pylori生長。國內(nèi)田志杰等［8］采用敏感性和特異性都較高的NP2PCR技術(shù)，對44例患者的膽囊結(jié)石核心，膽汁和膽囊黏膜進行螺桿菌16SrRNA基因片段檢測，發(fā)現(xiàn)螺桿菌DNA存在于膽囊結(jié)石、膽汁及膽囊黏膜中，但無法排除膽道中檢測到的細菌就是H.pylori或為與H.pylori相似的其他螺桿菌屬細菌，膽汁和膽囊黏膜標本經(jīng)需氧、厭氧和微需氧培養(yǎng)均未發(fā)現(xiàn)螺桿菌屬細菌生長。朱玉娟［9］120例膽囊結(jié)石患者膽汁、黏膜和膽石進行H.pylori培養(yǎng)，并以Ure A和CagA作引物進行擴增，培養(yǎng)結(jié)果為無H.pylori生長，使用PCR方法也未檢測到H.pylori DNA及 H.pylori CagA抗體，從而認為H.pylori可能經(jīng)Oddi’s括約肌逆行的進入膽道，但與膽囊結(jié)石并無明確相關(guān)性。顧建平［10］等通過對膽固醇結(jié)石及對照組進行碳13呼氣試驗和血清幽門螺桿菌IgG抗體檢測，結(jié)果顯示兩組間無差異，再通過膽汁和膽囊黏膜標本接種于微需氧和厭氧培養(yǎng)基培養(yǎng)，并采用PCR技術(shù)擴增幽門螺桿菌特異的Ure A基因，也顯示膽囊結(jié)石與非結(jié)石對照組間無顯著差異。王春敏［11］等通過對7929例被檢人群的幽門螺桿菌感染與良性膽囊疾病的檢測，得出膽囊結(jié)石與H.pylori感染無明確相關(guān)性。這與本文結(jié)果基本一致。

可見，雖然目前的研究，有部分學者在膽道結(jié)石患者的膽囊黏膜、膽汁、結(jié)石中檢測到了H.pylori DNA的存在，推測幽門螺桿菌的感染可能導致膽道結(jié)石的生成，然而作為檢測的金標準，膽道組織及膽汁中培養(yǎng)出H.pylori，至今尚無成功報道，使得H.pylori感染導致膽道結(jié)石的生成停留于理論階段，這有待于以后更加深入的研究。

［1］ Swidsinski A，Ludwig W，Pahlig H，et al.Molecular genetic evidence of bacterial colonization of cholesterol gallstones〔J〕.Gastroenterology，1995，108（3）：860－864.

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［3］ Fox JG，Dewhirst FE，Shen Z，et al.Hepatic Helicobacter species identified in bile and gallbladder tissue from Chileans with chronic cholecystitis〔J〕.Gastroenterology，1998，114（4）：755－763.

［4］ Rudi J，Rudy A，Maiwald M，et al.Helicobacter sp.are not detectable in bile from German patients with biliary diseases〔J〕.Gastroenterology，1999，116（4）：1016.

［5］ Robert R，Ernst J.Helicobacter species are notdetectable by 16sr DNA PCR in bile from dutch patientswith common〔J〕.Bile Duct Digestion，2002，66（1）：89－91.

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［7］ Silva CP，Pereir－Lima JC，Oliveira AG，et al.A ssociation of the presence of Helicobacter in gallbladder tissue with cholelithisasis and cholecystitis〔J〕.J Clin Microbiol，2003，41（12）：5615－5618.

［8］ 田志杰，韓天權(quán)，姜志宏，等.膽囊結(jié)石病膽道系統(tǒng)螺桿菌DNA的研究〔J〕.中國實用外科雜志，2004，2（24）：84－87.

［9］ 朱玉娟，謝健，周衛(wèi)東，等.幽門螺桿菌感染與膽囊結(jié)石形成的相關(guān)性分析〔J〕.重慶醫(yī)科大學學報，2005，30（5）：694－696.

［10］ 顧建平，黃桂余，徐子平，等.膽固醇結(jié)石患者膽道系統(tǒng)幽門螺桿菌研究〔J〕.中國普通外科雜志，2005，14（8）：18－19

［11］ 王春敏，楊一.膽囊疾病與幽門螺桿菌感染的相關(guān)性分析〔J〕.江蘇醫(yī)藥，2009，35（7）：839－840.