董永和 邱敏 龐海 劉欣媛 武海軍 楊玉梅

青風(fēng)藤來源于防己科植物青藤及毛青藤的干燥藤莖[1，2]，含有清風(fēng)藤堿甲等多種生物堿，能祛風(fēng)通絡(luò)，治療風(fēng)濕骨痛，氣微，味苦[3，4]。以往研究已證實(shí)青風(fēng)藤制劑具有祛風(fēng)除濕、活血化瘀、溫經(jīng)止痛、免疫調(diào)節(jié)等作用，且毒性小，副作用少等優(yōu)點(diǎn)，但對其免疫調(diào)節(jié)功能文獻(xiàn)報道較少。本文主要觀察了青風(fēng)藤對小鼠非特異性免疫功能的影響，以期進(jìn)一步為青風(fēng)藤開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 藥品與試劑青風(fēng)藤提取物(每克提取物相當(dāng)于生藥1.4 g):青風(fēng)藤，加水煎煮二次，煎液濾過，濾液合并，靜置使沉淀，濾過，濾液濃縮，干燥。臨用時用蒸餾水配成所需濃度。醋酸地塞米松片，新鄉(xiāng)市常樂制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號070114。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 青風(fēng)藤對非特異性免疫功能的影響-碳粒廓清法檢測小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能小鼠50只，雌雄各半，體重18～22 g，隨機(jī)分為5組:第1組，生理鹽水組;第2組，陽性對照組，地塞米松0.004 g/kg;第3～5組，青風(fēng)藤大、中、小劑量組，分別為0.9 g/kg(相當(dāng)于生藥量1.26 g)、0.45 g/kg(相當(dāng)于生藥量0.63 g)、0.225 g/kg(相當(dāng)于生藥量0.315 g)。各組皆灌胃給藥，0.2 ml/10 g，1次/d，連續(xù)灌胃7 d。末次給藥1 h后，各組小鼠均尾靜脈注射印度墨汁(按1∶5稀釋)，立即計(jì)時，注射2 min、20 min用玻璃毛細(xì)吸管分別從眼眶內(nèi)眥靜脈叢準(zhǔn)確取血20 μl。將取得的血液加到2 ml的0.1%碳酸鈉溶液中，用721B型分光光度計(jì)在650 nm波長處測定光密度(A值)，取0.1%碳酸鈉溶液校正零點(diǎn)。取血完畢，用頸椎脫臼法處死小鼠，剖開小鼠腹腔，取其肝臟和脾臟，用濾紙吸干臟器血污，稱重，計(jì)算廓清指數(shù)K和吞噬指數(shù)α，以吞噬指數(shù)α值表示小鼠MΦ的吞噬功能。K=(lgA1-lgA2)/(t1-t2)(A1、A2分別代表注射墨汁2 min和20 min時的A值;t為采血時間)α=(K1/3)(W/WLS)(W是體重，WLS是肝脾和重)。

1.2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)資料應(yīng)用SPSS 11.5進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

青風(fēng)藤提取物大劑量組能夠明顯抑制腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬百分率和吞噬指數(shù)，而中、低劑量組具有降低趨勢但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(P＜0.05，＊＊P＜0.01)(見表1)。

表1 青風(fēng)藤提取物對小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(±s，n=15)

表1 青風(fēng)藤提取物對小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(±s，n=15)

注:與對照組比較*P＜0.05，＊＊P＜0.01

分組劑量(g/kg)廓清指數(shù)(K)吞噬指數(shù)(α)生理鹽水組0.03±0.015.67±1.09地塞米松組0.0040.01±0.01＊＊4.03±2.40*青風(fēng)藤提取物小劑量組0.90.02±0.015.40±0.85青風(fēng)藤提取物中劑量組0.450.02±0.014.95±1.39青風(fēng)藤提取物大劑量組0.2250.01±0.01＊＊4.38±2.23-*

3 討論

青風(fēng)藤是常用中藥，該藥藥理功效明確，化學(xué)成分穩(wěn)定，提取方法簡單，臨床應(yīng)用廣泛，是一個很有醫(yī)用價值和開發(fā)前景的中藥。目前對于青風(fēng)藤藥理作用的研究多集中在中樞神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)[5]和心血管系統(tǒng)。此外，青風(fēng)藤及青藤堿是很有研究價值和前景的天然戒毒藥物，它們對阿片類戒斷綜合征療效確切，而藥物本身無成癮性。對其抗嗎啡依賴作用及機(jī)理的深入研究，將有助于全面評價青風(fēng)藤和青藤堿在戒毒方面的應(yīng)用[6，7]。隨著對青風(fēng)藤有效成分提取分離、含量檢測以及藥理機(jī)制的深入研究，青風(fēng)藤及其有效成分在臨床將會得到更廣泛的應(yīng)用。

巨噬細(xì)胞的吞噬作用是機(jī)體維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的重要因素，是構(gòu)成非特異性免疫的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，也是機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答的基礎(chǔ)。大多數(shù)抗原經(jīng)巨噬細(xì)胞處理后，免疫原性會大大增強(qiáng)，從而刺激機(jī)體產(chǎn)生良好的免疫應(yīng)答[8]。青風(fēng)藤提取物能降低小鼠的單核-腹腔巨噬細(xì)胞吞噬和碳廓清能力。結(jié)果提示:青風(fēng)藤提取物具有降低小鼠非特異性免疫功能的作用。

[1]黃筑艷，張?jiān)ⅲ軑?青風(fēng)藤化學(xué)成分的研究(Ⅱ).中草藥，2009，40(2):193-196.

[2]中國藥典[S].一部.化學(xué)工業(yè)出版社，2005.

[3]曹吉慧，趙桂森，馮延江.青風(fēng)藤的化學(xué)成分與藥理作用.國外醫(yī)藥·植物藥分冊，2008，23(2):62-66.

[4]王曉玉，齊新.青風(fēng)藤抑制補(bǔ)體活化在心肌梗死中的保護(hù)作用.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2007:5(10):973-974.

[5]方勇飛，張瑩，王勇.青藤堿對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者滑膜細(xì)胞凋亡細(xì)胞周期及bal-2蛋白的影響.中國藥物與臨床，2008，8(4):261-264.

[6]蔡紅兵，莫志賢，李欣.青風(fēng)藤及青風(fēng)藤堿在體內(nèi)外對嗎啡依賴模型戒斷反應(yīng)的影響.北京中醫(yī)藥，2008，27(8):652-655.

[7]張國梅，莫志賢，王彩云.青風(fēng)藤醇提液及其有效成分防治嗎啡戒斷癥狀的實(shí)驗(yàn)研究.中藥材，2009，32(9):1414-1418.

[8]柳翰凌，康小紅.灌胃雙歧桿菌BB1對免疫低下小鼠非特異性免疫功能的影響.實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)，2008，25(1):6-7.