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      鹿鞭及其偽品鑒定方法的研究進(jìn)展

      2011-08-15 00:53:40張麗華
      中國醫(yī)藥科學(xué) 2011年18期
      關(guān)鍵詞:區(qū)帶牛鞭龜頭

      劉 洋 張麗華 薄 艷

      1.吉林市中心醫(yī)院藥學(xué)部,吉林 132002;2.北華大學(xué)藥學(xué)院,吉林 132013

      鹿鞭(Testis et Penis Cervi)系鹿科動(dòng)物梅花鹿(Cervus nippon Temm inck)、馬鹿(C. elaphusL.)的干燥帶睪的陰莖。其味甘、咸,性溫,具有補(bǔ)腎、壯陽、益精的功能,臨床可用于治療勞損、腰膝酸痛、腎虛耳聾、耳鳴、陽痿、宮冷不孕等癥。自古以來其組方很多,如金丹、鹿腎粥以及三鞭、三腎丸等。因其用藥歷史悠久,療效確切,貨源稀少,價(jià)格昂貴,為常用珍貴中藥之一。

      我國鹿的種類主要有梅花鹿、馬鹿、白鹿、白唇鹿、水鹿等,《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》收載的正品來源多為鹿科動(dòng)物梅花鹿和馬鹿兩種。故正品分為梅花鹿鞭、馬鹿鞭兩種,主產(chǎn)于吉林、遼寧、黑龍江及河北等地。在商品市場(chǎng)上各種充偽品屢見不鮮,本研究就鹿鞭的鑒定方面的研究進(jìn)展綜述如下。

      1 性狀鑒別

      主要從整體性狀、色澤、龜頭、尿道、橫環(huán)紋、包皮及鋒毛形狀等方面來鑒別。

      1.1 正品

      馬鹿鞭陰莖呈兩側(cè)稍扁的長圓柱形,長45~60 cm,直徑2~3 cm。表面灰黃色至黃棕色,呈半透明狀。在陰莖體兩側(cè)中間,有縱溝槽,頂端包皮略呈囊狀或卷曲成環(huán)套狀隆起,包皮前端形成鋒毛,在鋒毛上呈現(xiàn)毛鋒端色重、毛根部色淺的現(xiàn)象,也有呈現(xiàn)褐色、褐黑色毛梢;毛粗而扁,富彈性。龜頭藏于包皮內(nèi)或裸露,其先端鈍圓,整個(gè)龜頭似扁指狀,可見縱棱及縱溝,表面具致密的短線狀紋理。在陰莖全長靠基部端的1/3~1/2處附有睪丸1 對(duì),睪丸呈長橢圓形,或鼓或癟,棕褐色,有的具長的系帶(輸精管),質(zhì)堅(jiān)硬,不易折斷,或切斷面可見最外層為纖維體(俗稱皮膜),厚約1~2 mm,中間大部分為疏松的海綿體,可見尿道口和血管孔。氣腥,味微咸。

      梅花鹿鞭與馬鹿鞭的區(qū)別是前者較短小,長25~35 cm,直徑1~2 cm。龜頭長2.8~10 cm。先端漸尖,多皺縮,表面灰黃色、黃棕色。睪丸長橢圓形。

      1.2 偽品

      1.2.1 牛鞭 稍扁的長圓柱形,全長35~60 cm,直徑2~3 cm,表面黃白色,不具光澤。腹部?jī)蓚?cè)的中間有一條縱溝槽,包皮一般無毛,個(gè)別夾有可脫落毛。龜頭圓錐形,先端尖,尿道口在龜頭先端尖部。一般無睪丸,帶睪丸者形似茄苞狀,較大,表面紫褐色或棕黃色。陰莖外層纖維體厚以致中間海綿體的環(huán)形肋紋不明顯,熱水泡后膻腥氣極明顯,味微咸。

      1.2.2 驢鞭 長圓柱形,稍彎曲,表面黃棕色,不具光澤。背腹兩側(cè)的中間有一條縱溝槽,包皮一般無毛。龜頭較大,呈黑色,多皺縮,有橫向紋理。睪丸呈類圓形。

      1.2.3 用豬皮制作的假鹿鞭

      1.2.4 用動(dòng)物的腸制作的假鹿鞭

      1.2.5 用其他動(dòng)物的腿筋偽造

      1.3 真?zhèn)温贡薷饔衅洳煌攸c(diǎn)

      真鹿鞭特點(diǎn)明顯,藥用價(jià)值高 ,偽假鹿鞭無藥理作用,不能藥用,特別是粘接的鹿鞭,由于使用工業(yè)用膠還會(huì)對(duì)人體健康有害[1-2]。

      2 理化鑒別

      2.1 顯微鑒別

      利用動(dòng)物殘留獸毛對(duì)正品梅花鹿鞭、馬鹿鞭及混淆品馴鹿鞭,偽品驢鞭、牛鞭進(jìn)行顯微鑒別,不同科動(dòng)物獸毛顯微結(jié)構(gòu)差異較大,同科的則總體相同,其毛髓質(zhì)細(xì)胞形態(tài)、發(fā)達(dá)程度均不相同。為鹿鞭以原粉存在于中成藥中的鑒別提供了有力依據(jù)[3]。

      2.2 光譜鑒別

      比較氯仿浸出物的紫外光譜,鹿鞭與其偽品牛鞭略有區(qū)別。紅外光譜和紫外光譜,特別是前者,對(duì)鹿鞭及其偽品牛鞭具有鑒別意義,但考慮到受樣品來源、實(shí)驗(yàn)條件的局限,此種鑒別方法還需要深入研究。

      2.3 薄層鑒別

      利用薄層色譜法,在不同的展開劑系統(tǒng)中,分別對(duì)鹿鞭及其類似品貂鞭、驢腎、狗腎中的氨基酸、甾體類成分作了比較鑒別。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在與天門冬氨酸、甘氨酸及膽甾醇相應(yīng)的位置上,鹿鞭及其類似品均有相同顏色的斑點(diǎn)。

      2.4 電泳鑒別

      根據(jù)電泳中蛋白質(zhì)的遷移速率不同,可將電泳區(qū)帶分為A、B、C三個(gè)區(qū)域。梅花鹿鞭和馬鹿鞭各有兩條區(qū)帶,牛鞭有1條區(qū)帶。梅花鹿鞭和馬鹿鞭在A區(qū)和C區(qū)各有1條區(qū)帶,在B區(qū)沒有區(qū)帶,并且各區(qū)帶的遷移率相同[4]。

      2.5 X線攝片影像技術(shù)

      通過X線攝片,參與比較的鹿鞭除白唇鹿鞭外表及攝片均無斜肌紋理外,無論外表有無斜肌紋理,只有斷面呈纖維狀結(jié)構(gòu)的,其攝片均可清晰見到斜肌紋理結(jié)構(gòu)。牛鞭攝片大多為極密集的點(diǎn)狀或短直線狀細(xì)碎紋理,少數(shù)呈細(xì)短,稀疏的斜肌紋理。

      3 生物學(xué)鑒別

      3.1 免疫學(xué)鑒別

      采用免疫學(xué)方法,即以大分子抗原物質(zhì)免疫動(dòng)物而獲得抗血清,后者與免疫動(dòng)物的抗原物質(zhì)可發(fā)生免疫血清學(xué)反應(yīng),這種反應(yīng)具有高效、專一的特點(diǎn),從而達(dá)到用已知抗體鑒定未知抗原的目的。

      3.2 DNA分子標(biāo)記鑒別

      近年來隨著分子生物技術(shù)的發(fā)展,已廣泛應(yīng)用于中藥材品種的鑒別。DNA分子作為遺傳信息的直接載體,不受外界因素和生物體發(fā)育階段及器官組織差異的影響,以DNA分子特征進(jìn)行物種鑒別準(zhǔn)確可靠。

      用于中藥材品種高特異性鑒別引物基礎(chǔ)上的PCR鑒別技術(shù),雖然也是以PCR反應(yīng)為基礎(chǔ), 但在中藥鑒定中是一個(gè)新的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路。通過對(duì)正品藥材及其偽品的某些DNA片段的序列研究,設(shè)計(jì)出高度特異性的正品藥材鑒別引物。當(dāng)有樣本需要鑒定時(shí),提取DNA后,用鑒別引物對(duì)樣本的DNA進(jìn)行一次PCR反應(yīng),經(jīng)電泳檢測(cè),可達(dá)到準(zhǔn)確鑒別樣本真?zhèn)蔚哪康?,檢測(cè)時(shí)不需與已知正品藥材作對(duì)照實(shí)驗(yàn)[5-6]。

      中藥材的鑒定最終是對(duì)其生物學(xué)本質(zhì)進(jìn)行鑒定,尋找有效的鑒定方法是實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的迫切任務(wù)。DNA分子標(biāo)記鑒定技術(shù)的優(yōu)勢(shì)是特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好,結(jié)果直觀、可靠,便于進(jìn)一步分析。存在的問題:方法不夠完善,資料不豐富,需專門儀器和專業(yè)人員,成本偏高,已涉及的中藥品種和研究人員不夠廣泛,無法有效推廣到生產(chǎn)第一線。

      在今后的研究中,推動(dòng)DNA分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)更多中藥品種進(jìn)行鑒定,比較各種方法的特點(diǎn)和適用范圍,將更多的DNA分子標(biāo)記技術(shù)應(yīng)用到該領(lǐng)域;開發(fā)簡(jiǎn)便易行的新方法;降低成本提高效率。

      相信DNA分子標(biāo)記技術(shù)將會(huì)與傳統(tǒng)鑒定方法并存發(fā)展,共同闡明中藥材真?zhèn)蝺?yōu)劣,成為中藥材鑒定的有力工具,共同推進(jìn)中藥現(xiàn)代化進(jìn)程。

      [1]姚玉霞,李澤鴻.感官鑒別真?zhèn)温贡轠J].經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào),2000,4(4):21-23.

      [2]李慧珍,李水福.鹿鞭的真?zhèn)蝺?yōu)劣鑒定[J].中國藥業(yè),2008,17(10):66-69.

      [3]王遠(yuǎn)志,李鋒,康廷國.鞭類藥材電泳及顯微鑒定研究[J].中藥科技,2004,2(6):34-35.

      [4]金躍明,李峰.鹿鞭藥材及偽品的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒別研究[J].遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2005,7(6):623-625.

      [5]Dooley JB,Kelly EP,Stephen DG,et al.Detection of meat[J].Animal Sciences,2007,31(3):159-163.

      [6]崔雨新,王小明,梁云媚.在線粒體DNA細(xì)胞色素b基因序列水平上對(duì)鬣羚系統(tǒng)發(fā)育的研究[J].獸類學(xué)報(bào),2001,21(4):251-258.

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