徐世霞

廣西壯族自治區(qū)北海食品藥品檢驗(yàn)所，廣西北海536000

雙嘧達(dá)莫 (又稱潘生丁)為一種含氮雜環(huán)的嘧啶類藥物，化學(xué)式為C24H40N8O4，是一類較強(qiáng)的冠狀動(dòng)脈血管擴(kuò)張劑，也是一種受體阻斷劑，它能促進(jìn)側(cè)枝循環(huán)發(fā)揮療效，臨床上主要用于治療和預(yù)防心絞痛，心肌梗死，還能抑制血小板聚集，防止血栓形成［1］。隨著雙嘧達(dá)莫臨床應(yīng)用的擴(kuò)大，其相關(guān)制劑的應(yīng)用也更為廣泛，質(zhì)量控制相關(guān)研究報(bào)道也更多。本文就近年來(lái)以下測(cè)定方法在雙嘧達(dá)莫含量測(cè)定中的應(yīng)用進(jìn)展報(bào)道作一綜述，供今后對(duì)雙嘧達(dá)莫及制劑中雙嘧達(dá)莫含量測(cè)定研究參考。

1 高效液相色譜法

朱旭等［2］用高效液相色譜法測(cè)定雙嘧達(dá)莫緩釋片的含量，采用Eclipse XDB C18色譜柱，流動(dòng)相為甲醇:水:磷酸:二乙胺 (275:225:0．3:0．1);檢測(cè)波長(zhǎng):283nm;結(jié)果雙嘧達(dá)莫在0.16～1.6μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率為100.63%。畢雨萌等［3］建立了銀杏達(dá)莫注射液中雙嘧達(dá)莫、槲皮素、山柰素和異鼠李素4種成分的反相高效液相色譜分析方法。他們選用SCIENHOME Kromasil C18柱，甲醇—0.4%磷酸溶液 (55:45)為流動(dòng)相，于360nm測(cè)定銀杏達(dá)莫注射液中上述4種成分的含量。結(jié)果雙嘧達(dá)莫、槲皮素、山柰素和異鼠李素分別在21.7～261.1μg/m L，8.0 ～ 96.0μg/mL、7.75 ～ 93.0μg/mL 及 5.75 ～69.0μg/mL內(nèi)峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系。4種成分的平均回收率分別為100.3%、100.0%、99.9%、99.8%。楊燕云等［4］建立了測(cè)定阿司達(dá)莫緩釋片含量的方法。采用HPLC法，色譜柱為 Diamonsil C18柱，流動(dòng)相為甲醇—0.05 mol/L磷酸二氫鉀緩沖液 (52:48)，檢測(cè)波長(zhǎng)275 nm。結(jié)果雙嘧達(dá)莫的線性范圍為20～120μg/ml，低、中、高3種濃度的平均回收率分別為98.6%±2.3%、99.0%±1.6%、101.4% ±2.3%。陳岐信等［5］建立了高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定雙嘧達(dá)莫阿司匹林胃內(nèi)漂浮片的含量。采用Zorbax SB－C18色譜柱，流動(dòng)相為甲醇—水—三乙胺—高氯酸 (50:48.75:0.75:0.5)。檢測(cè)波長(zhǎng)280nn。結(jié)果:雙嘧達(dá)莫和阿司匹林分別在80～400mg/L和10～50mg/L濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率分別為99.09%和98.73%。

2 非水滴定法

曾毅等［6］探討了高氯酸非水滴定法和高效液相色譜法測(cè)定雙嘧達(dá)莫原料藥含量的可行性。試驗(yàn)中非水滴定法采用電位法指示終點(diǎn)，并考察了不同溶劑對(duì)滴定的影響;HPLC法中，色譜柱為C18柱，流動(dòng)相為乙腈—20mmol·L－1磷酸二氫鉀 (含1．0%三乙胺，磷酸調(diào)pH至4．0)=35:65;并與《中國(guó)藥典》規(guī)定的溴酸鉀滴定法進(jìn)行比較。試驗(yàn)結(jié)果為:非水滴定法、HPLC法和溴酸鉀滴定法測(cè)得雙嘧達(dá)莫的含量分別為101.36%、101.11%、100.56%。通過試驗(yàn)可知高氯酸非水滴定法和HPLC法均可用于雙嘧達(dá)莫原料藥的含量測(cè)定，且高氯酸非水滴定法操作更簡(jiǎn)便、快捷。

3 電化學(xué)法

李瀟［7］報(bào)道了用聚氯乙烯膜雙嘧迭莫電極法測(cè)定雙嘧迭莫片中雙嘧迭莫含量的方法。試驗(yàn)利用該電極對(duì)雙嘧達(dá)莫的響應(yīng)，測(cè)定雙嘧達(dá)莫片含量。結(jié)果電極的Nermt響應(yīng)范圍為1.0×10－2～ 4.8×10－2mol/L，級(jí)差為 40mv/pC，檢出限為3.2×10－5mol/L。通過試驗(yàn)可知聚氯乙烯膜電極法可簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)片劑中雙嘧達(dá)莫的含量。李利軍等［8］在玻碳電極上成功地制備了多壁碳納米管修飾電極。研究了雙嘧達(dá)莫 (DPD)在該修飾電極上的電化學(xué)行為。基于表面活性效應(yīng)，得知十二烷基磺酸鈉 (SDS)可提高DPD在多壁碳納米管修飾電極的氧化電流，修飾電極對(duì)其具有明顯的增敏作用，并對(duì)存在的機(jī)理作了探討。在SDS介質(zhì)存在下，通過DPD在多壁碳納米管修飾電極上的氧化和高錳酸鉀在另一電極上的還原構(gòu)建不可逆雙安培檢測(cè)體系，建立直接測(cè)定DPD的新方法。在0.05mol/L H2SO4介質(zhì)中，DPD氧化峰電流與其濃度在1.5×10－6～1.0×10－3mol/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，方法檢出限為8.0×10－7mol/L。陳連山［9］報(bào)道了一種以雙嘧達(dá)莫與碘分子形成的締合物為電活性物的PVC膜雙嘧達(dá)莫涂絲選擇電極，測(cè)定了雙嘧達(dá)莫片的含量。電極的線性響應(yīng)范圍為1.0×10－2～4.0×10－5mol/L，級(jí)差電位為56mV/pC，檢測(cè)限為2.6×10－5mol/L。該電極響應(yīng)迅速，重現(xiàn)性好，結(jié)果與藥典法相符。

4 化學(xué)發(fā)光法

化學(xué)發(fā)光是一種由化學(xué)反應(yīng)引起的光輻射現(xiàn)象。它是基于分子發(fā)光強(qiáng)度和被測(cè)物含量之問的關(guān)系建立的分析方法［10］。石文兵［11］建立了反膠束化學(xué)發(fā)光法測(cè)定雙嘧達(dá)莫含量。其利用在酸性條件下，雙嘧達(dá)莫分子中氮原子質(zhì)子化后與陰離子AuCl4－1形成離子締合物，被氯仿帶入魯米諾的氯化十六烷基三甲基銨反膠束中，離解出來(lái)AuCl4－1立即與魯米諾產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。在一定濃度范圍內(nèi)，發(fā)光強(qiáng)度與雙嘧達(dá)莫的含量成線性關(guān)系，從而間接測(cè)定雙嘧達(dá)莫的含量。結(jié)果:在優(yōu)化的試驗(yàn)條件下，雙嘧達(dá)莫的檢測(cè)線性范圍為0.01～25mg/L，檢出限為0.3μg/L。試驗(yàn)結(jié)果表明該法簡(jiǎn)單、靈敏，可用于針劑和片劑中雙嘧達(dá)莫的測(cè)定。趙小輝等［12］在pH=1.98緩沖溶液中，利用雙嘧達(dá)莫可與染料探針曙紅Y通過相互結(jié)合，產(chǎn)生以315nm為特征峰的共振光散射增強(qiáng)信號(hào)。在該特征波長(zhǎng)下測(cè)定的增強(qiáng)共振光散射強(qiáng)度與雙嘧達(dá)莫濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，據(jù)此建立了測(cè)定痕量雙嘧達(dá)莫的共振光散射法。當(dāng)曙紅Y的濃度為 3.0×10－5moL/L時(shí)，雙嘧達(dá)莫的檢出限可達(dá)16.1nmoL/L。同時(shí)進(jìn)行了實(shí)際樣品的測(cè)定，回收率為(99.2±3.3)% ～ (102.0±1.7)%。劉清慧等［13］研究了雙嘧達(dá)莫在鐵氰化鉀－魯米諾化學(xué)發(fā)光反應(yīng)體系中的后化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，并在研究其反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)、化學(xué)發(fā)光光譜、熒光光譜以及一些相關(guān)問題的基礎(chǔ)上，探討了反應(yīng)機(jī)理;合成了雙嘧達(dá)莫的分子印跡聚合物，以此聚合物為分子識(shí)別物質(zhì)，利用鐵氰化鉀－魯米諾－雙嘧達(dá)莫后化學(xué)發(fā)光體系，建立了測(cè)定雙嘧達(dá)莫的高選擇性分子印跡－后化學(xué)發(fā)光分析方法。所建方法的線性范圍為1.0×10－8～1.0×10－6g/mL，檢出限為3 ×10－9g/m L。饒志明等［14］提出了雙嘧達(dá)莫與高錳酸鉀和羅丹明B的化學(xué)發(fā)光新體系，并發(fā)現(xiàn)表面活性劑吐溫－80可顯著增強(qiáng)該體系的化學(xué)發(fā)光，據(jù)此建立了流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光測(cè)定雙嘧達(dá)莫的新方法。該方法選擇性好，靈敏度高，線性范圍寬，雙嘧達(dá)莫在5.0×10－8～5.0×10－8g/mL范圍內(nèi)與發(fā)光信號(hào)呈線性關(guān)系，檢出限1.7 ×10－8g/mL。

5 其他方法

隨著各種新技術(shù)的發(fā)展，近年來(lái)運(yùn)用新技術(shù)新儀器測(cè)定雙嘧達(dá)莫含量的報(bào)道也越來(lái)越多。李華侃等［15］用光度法研究了雙嘧達(dá)莫與氯冉酸之間發(fā)生的電荷轉(zhuǎn)移反應(yīng)，其中雙嘧達(dá)莫是電子給予體，氯冉酸是電子接受體，反應(yīng)介質(zhì)是乙醇－丙酮混合溶劑。應(yīng)用等摩爾連續(xù)變換法和摩爾比法測(cè)得荷移絡(luò)合物的組成為1:1，穩(wěn)定常數(shù)為3.9×104。絡(luò)合物在526nm波長(zhǎng)處有最大吸收，雙嘧達(dá)莫濃度在10～380mg/L范圍內(nèi)服從比耳定律，相關(guān)系數(shù)為0.9996，表觀摩爾吸光系數(shù)為1.34×103L/mol/cm，回收率為98.4%。應(yīng)用該法可以快速測(cè)定雙嘧達(dá)莫片中有效成分的含量，結(jié)果滿意。彭慧等［16］建立一種簡(jiǎn)便、快速的高效液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法 (HPLC－ESI－MS)測(cè)定中國(guó)健康人體內(nèi)血漿中雙嘧達(dá)莫濃度的方法。筆者以乙腈沉淀處理血樣，采用MACHEREY－MAGEL NUCLEODUR 100－5 C18柱，流動(dòng)相的組成為乙腈－水 (含30mmol/L醋酸銨)=41.3:58.7;流速0.25mL/min。質(zhì)譜條件采用正離子檢測(cè)的電噴霧電離方式 (+)ESI，其噴霧電壓3.30kV，第一級(jí)錐孔電壓59V;掃描方式為選擇離子監(jiān)測(cè) (SIR)，用于定量分析監(jiān)測(cè)的離子雙嘧達(dá)莫為 505.6m/z，唑吡坦 (內(nèi)標(biāo))為308.3m/z。試驗(yàn)結(jié)果為:雙嘧達(dá)莫最低檢測(cè)限為3.0μg/L。線性范圍20～2500μg/L。高、中、低濃度回收率分別為105.0%、105.6%、100.4%。該方法靈敏度高、快速、簡(jiǎn)便、無(wú)雜質(zhì)干擾，適合于雙嘧達(dá)莫血藥濃度檢測(cè)及藥物動(dòng)力學(xué)研究。

6 結(jié)語(yǔ)

雙嘧達(dá)莫為一種含氮雜環(huán)的嘧啶類藥物，結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜，這使得有關(guān)雙嘧達(dá)莫含量測(cè)定方法的研究報(bào)道很多。HPLC法因儀器普遍、操作簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性好而優(yōu)于其他方法而被大量應(yīng)用。電化學(xué)法具有較高的選擇性和靈敏度、修飾電極易于制作、穩(wěn)定性和重現(xiàn)性良好、樣品處理方法簡(jiǎn)單快速，適合于實(shí)時(shí)在線分析。化學(xué)發(fā)光法是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種靈敏度極高的痕量元素分析新技術(shù)，其具有靈敏度高、分析速度快、分析成本低、線性范圍寬、儀器設(shè)備簡(jiǎn)單等特點(diǎn)。筆者認(rèn)為隨著發(fā)光檢測(cè)體系的不斷優(yōu)化，新的高效能發(fā)光試劑和發(fā)光體系的不斷開發(fā)，該技術(shù)和其他檢測(cè)技術(shù)聯(lián)用的不斷發(fā)展，化學(xué)發(fā)光法的應(yīng)用前景將十分廣闊。

［1］ 張文升，李安良．藥物化學(xué) ［M］．北京:高等教育出版社，1999:296．

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