于翔輝,陶佳南

(佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心,黑龍江佳木斯 154007)

幾年來我們一直探討復(fù)合肥劑對(duì)大鼠各器官的影響。一系列實(shí)驗(yàn)工作表明,復(fù)合肥劑對(duì)大鼠睪丸酮水平?jīng)]有明顯影響[1]。但對(duì)大鼠一些器官組織超微結(jié)構(gòu)存在一定損傷機(jī)制[1,2]。本文探討復(fù)合肥劑對(duì)大鼠腎小球(基底膜)超微結(jié)構(gòu)的影響。

1 材料

1.1 動(dòng)物

健康 3月 Wistar大鼠,體重(101.8±3)g,佳木斯大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 試劑

環(huán)氧樹脂 812#為美國(guó)公司(Structure Probe.Inc.)生產(chǎn);鋨酸試劑為英國(guó)公司(Johnson Mat they Chemicals Ltd.)生產(chǎn);復(fù)合肥為市售;其他常用試劑如 50%戊二醛、丙酮等為國(guó)產(chǎn)。

2 方法

2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

將大鼠隨機(jī)分為 4組:1組為對(duì)照組;3個(gè)實(shí)驗(yàn)組,每組15只。實(shí)驗(yàn)周期分別設(shè)為 5月組,10月組,15月組。實(shí)驗(yàn)組大鼠用 15%復(fù)合肥劑(蒸餾水配制,高壓劑滅菌);經(jīng)口腔灌胃 2m L,每周 1次。對(duì)照組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為 5只。對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常規(guī)飼料飼養(yǎng)15個(gè)月。

2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果取材

各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物實(shí)驗(yàn)周期結(jié)束后,將動(dòng)物處死,取腎臟組織,戊二醛固定液(4%)固定,鋨酸固定液(1%)固定,丙酮梯度脫水,環(huán)氧樹脂 812#包埋,醋酸雙氧鈾電子染色,超薄切片(上海產(chǎn)KCQ-2型)切片,透射電子顯微鏡(日產(chǎn)JEO-1200EX)觀察分析,拍照。

3 結(jié)果

形態(tài)學(xué)現(xiàn)象:對(duì)照組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腎小球超微結(jié)構(gòu)未見異常。5月組、10月組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腎小球基底膜,血管內(nèi)皮,血管內(nèi)皮孔,基質(zhì),系膜區(qū)細(xì)胞,足突細(xì)胞未見異常(見圖 1,2)。

15月組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有 5只大鼠出現(xiàn)腎小球超微結(jié)構(gòu)病理學(xué)改變:腎小球血管內(nèi)皮出現(xiàn)斷裂、內(nèi)皮孔增大,足突細(xì)胞未見異常改變(見圖 3),有 2只大鼠出現(xiàn)腎小球基底膜增寬,基質(zhì)增多,但系膜區(qū)細(xì)胞、足突細(xì)胞未發(fā)生病理學(xué)改變(見圖 4),另有 5只大鼠腎小球血管內(nèi)皮孔略有增大,其他未見異常。

15月組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腎小球基底膜超微結(jié)構(gòu)發(fā)生病理學(xué)改變,基于此,我們認(rèn)為復(fù)合肥劑(15%)在一定程度上會(huì)對(duì)大鼠腎小球超微結(jié)構(gòu)產(chǎn)生損傷效應(yīng)。

4 討論

本實(shí)驗(yàn)表明,復(fù)合肥劑引起腎小球血管內(nèi)皮病理改變居多,血管內(nèi)皮斷裂,內(nèi)皮孔增大,這樣的病理改變可能會(huì)導(dǎo)致大鼠出現(xiàn)蛋白尿,如果這種損傷加重,體內(nèi)蛋白丟失會(huì)逐漸增加,進(jìn)而出現(xiàn)低蛋白體征。本實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的 2例基底膜增厚,基質(zhì)增多,疑似出現(xiàn)免疫復(fù)合物沉積,有輕度腎小球腎炎表現(xiàn),這是否是本實(shí)驗(yàn)引起的免疫反應(yīng),未作免疫復(fù)合物鑒定,此外,我們不能確定這 2只大鼠基底膜增厚,基質(zhì)增多是由復(fù)合肥劑引起的,也有可能是施加實(shí)驗(yàn)措施前已經(jīng)患上輕度腎炎。本次工作說明,隨著試驗(yàn)周期加長(zhǎng),對(duì)腎小球造成的損傷也在加重,同時(shí)也可以推斷,長(zhǎng)期使用農(nóng)藥殘留高的果蔬對(duì)人腎臟又不良影響。腎臟是動(dòng)物體內(nèi)化學(xué)物質(zhì)主要排泄器官,動(dòng)物體內(nèi)化學(xué)物質(zhì)主要經(jīng)肝臟分解代謝,復(fù)合肥劑經(jīng)肝臟代謝后的產(chǎn)物對(duì)腎臟有怎樣的影響是我們一直思考問題(未見資料報(bào)道)。目前我們實(shí)驗(yàn)室尚無技術(shù)條件對(duì)復(fù)合肥劑代謝后物質(zhì)進(jìn)行定性分析。故此,在此所說的一定劑量“復(fù)合肥劑”長(zhǎng)時(shí)間作用腎小球在一定程度上會(huì)對(duì)腎小球產(chǎn)生損傷效應(yīng)是指復(fù)合肥劑代謝后物質(zhì)所致。我們認(rèn)為化學(xué)物質(zhì)對(duì)腎小球造成損傷的條件是達(dá)到一定濃度、劑量和作用時(shí)間

[1]韓玉澤,陶佳南,侯麗然,等.復(fù)合肥生殖細(xì)胞—次級(jí)精母細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響對(duì)雄性大鼠[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2008,31(2):21-22

[2]韓玉澤,陶佳南,侯麗然,等.復(fù)合肥對(duì)大鼠肝臟細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2010,33(5):94-95