郭海玲
北京中醫(yī)藥大學東方醫(yī)院腎內科北京100078
(2010-11-25收稿 責任編輯 姜春霞)
自由基是一種能獨立存在的,含有一個或一個以上未成對電子的任何原子或原子團,具有高度反應活性的粒子[1]。正常情況下機體內存在清除自由基的酶系統(tǒng),如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶和谷胱甘肽-S轉移酶等以及非酶系統(tǒng),如維生素E、維生素C、血漿銅藍蛋白和尿酸等,從而使體內自由基處于不斷產生與清除的動態(tài)平衡之中[2]。研究[3-4]表明體內產生少量的自由基不會對機體造成威脅,但數量過多或清除能力降低時就會氧化生物分子,如核酸、蛋白質和脂類等。已知多種疾病與生物大分子的氧化有關,如動脈粥樣硬化、缺血性心臟病、高血壓、癌癥、糖尿病、炎癥及休克等。因此,尋找一種安全有效的能夠清除機體內產生多余自由基的保健食品具有重要意義。體內外實驗[5-6]表明葛根黃酮具有抗氧化活性。所以,作者以葛根提取物作為受試物探討其抗氧化活性,為其開發(fā)利用提供實驗依據。
1.1 樣品 葛根提取物由某保健品有限公司提供;人體推薦量為40 mg/(kg·d)。
1.2 實驗動物 48只清潔級雌性SD老齡大鼠(12個月齡),由河南省實驗動物中心提供,合格證書:豫醫(yī)動字第4104035號。環(huán)境溫度20~24℃,相對濕度40% ~70%,12 h光照/12 h黑暗。
1.3 試劑與儀器 丙二醛(MDA)試劑盒、SOD試劑盒和GSH-Px試劑盒均購自南京建成生物工程研究所;水浴鍋:江蘇金壇有限公司;SPACE全自動生化分析儀:美國;低速臺式離心機:北京醫(yī)用器械廠。
1.4 觀察指標測定 按照衛(wèi)生部保健食品功能檢測與評價技術規(guī)范,大鼠適應環(huán)境3 d。將動物分為3 個劑量組(0.2、0.4 和1.2 g/kg)及1 個對照組,連續(xù)經口給予不同劑量葛根提取物60 d,灌胃量為10 mL/kg。實驗結束時采血并分離血清,測定MDA含量、SOD和GSH-Px活性。
1.5 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 10.0進行數據分析,先對數據進行正態(tài)性檢驗和方差齊性檢驗,采用單因素方差分析比較各組大鼠血清MDA水平、SOD和GSH-Px活性的差異,兩兩比較采用SNK-q檢驗,檢驗水準α=0.05。
各組大鼠血清MDA水平、SOD及GSH-Px活性比較見表1。
表1 各組大鼠血清MDA水平、SOD及GSH-Px活性比較(n=12)
葛根為豆科植物野葛的根,主要活性成分為異黃酮類化合物如葛根素、大豆苷元及大豆苷等?!渡褶r本草經》記載:“葛根,味甘平,主消渴,身大熱,嘔吐,諸痹,起陰氣,解諸毒”;《中國藥學大辭典》記載:葛根具有升陽、解肌、生津、止渴等功能。胡琴等[5]報道葛根黃酮在一定濃度范圍內,其抗氧化作用、清除羥自由基、超氧陰離子的能力及抑制過氧化脂質產物MDA的作用均呈劑量效應關系;朱慶磊等[7]報道葛根素能清除超氧陰離子和羥自由基,抑制過氧化氫引起的紅細胞溶血和脂質過氧化生成。體內研究[8]表明葛根提取物具有抗糖尿病大鼠氧化應激作用,葛根素預處理對大鼠肝缺血再灌注氧化損傷具有保護作用[9],葛根黃酮對亞急性衰老模型小鼠具有抗氧化作用[6]。該研究以正常老齡大鼠為實驗動物模型探討葛根提取物的抗氧化作用,為保健食品的開發(fā)利用提供依據。
該實驗結果表明,老齡大鼠經口連續(xù)60 d給予不同劑量的葛根提取物后,與對照組相比,1.2 g/kg劑量組大鼠血清 MDA含量明顯降低,而GSH-Px活性明顯升高;0.4和1.2 g/kg劑量組大鼠血清SOD活性較對照組升高。研究[10]表明,SOD廣泛存在于各種生物體內,是清除超氧陰離子自由基的一種重要的酶,與GSH-Px有協(xié)同作用,它能催化超氧陰離子生成O2和H2O2,而H2O2再由GSH-Px催化轉變?yōu)镺2和H2O,從而使H2O2迅速清除,二者聯(lián)合作用可有效防止組織細胞受到過氧化損傷,能有效清除氧自由基,使細胞膜穩(wěn)定性增加[10]。該研究結果提示葛根提取物可能通過提高SOD和GSH-Px活性,淬滅自由基的生成,使脂質過氧化產物MDA生成減少而起到抗氧化作用。但至于其在人群中的應用還需要進一步研究。
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