槲皮素和芹菜素對高尿酸血癥大鼠血尿酸及抗氧化能力的影響

姚芳芳，張 銳，傅瑞娟，何 偉*

(1.鄭州大學公共衛(wèi)生學院，河南 鄭州 450001；2.鄭州大學(河南省)醫(yī)藥科學研究院，河南 鄭州 450001)

槲皮素和芹菜素對高尿酸血癥大鼠血尿酸及抗氧化能力的影響

姚芳芳1，張 銳1，傅瑞娟1，何 偉2,*

(1.鄭州大學公共衛(wèi)生學院，河南 鄭州 450001；2.鄭州大學(河南省)醫(yī)藥科學研究院，河南 鄭州 450001)

目的：研究同等劑量的槲皮素和芹菜素對腺嘌呤+鹽酸乙胺丁醇誘導高尿酸血癥大鼠血尿酸及抗氧化能力的影響。方法：SD大鼠隨機分為5組，空白對照組、模型對照組、別嘌醇組、槲皮素組和芹菜素組。利用腺嘌呤加鹽酸乙胺丁醇片灌胃誘導SD大鼠制備高尿酸血癥模型，槲皮素和芹菜素預防治療3周，測定肝臟和血清中相關的酶活性及生化指標。結果：與模型組相比，槲皮素和芹菜素均能顯著降低高尿酸血癥大鼠血尿酸(SUA)、尿素氮(SUN)、血肌酐(SCr)和丙二醛(MDA)的水平，提高超氧化物歧化酶(SOD)、總抗氧化能力(T-AOC)的水平。結論：槲皮素和芹菜素均能很好的控制高尿酸血癥大鼠血清尿酸水平，并且能夠增強高尿酸血癥大鼠的抗氧化和清除氧自由基的能力，減少脂質過氧化。

槲皮素；芹菜素；高尿酸血癥；抗氧化

近年來，隨著人們生活水平的提高，飲食結構發(fā)生變化，糖、脂肪、蛋白質的攝入量明顯增加，高尿酸血癥和痛風的發(fā)病率日益增高，全球的發(fā)病率呈上升趨勢，已成為現(xiàn)代社會的流行病[1]。別嘌醇是一種黃嘌呤氧化酶抑制劑，是目前國內外治療高尿酸血癥的主要藥物[2]，然而一些嚴重的不良反應比如腎臟損傷以及過敏反應限制了別嘌醇的臨床使用[3-4]。因此臨床上急需要尋找一種既能降低血尿酸水平又對腎臟、肝臟沒有損害作用的飲食治療方法。

類黃酮是廣泛存在于蔬菜和水果中的一類植物化學物[5]，是強大的抗氧化劑，能有效防止氧化損傷。槲皮素和芹菜素是兩種主要的類黃酮。它們具有多種生物學作用[6-10]，如抗氧化、抗癌、抗炎、鎮(zhèn)靜等作用。在此基礎上，本研究探討同等劑量的槲皮素和芹菜素對腺嘌呤+鹽酸乙胺丁醇片誘導大鼠高尿酸血癥的血尿酸和抗氧化能力的影響，以達到為此類人群的膳食指導提供參考，減少降尿酸藥物帶來不良反應的目的。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

SPF級SD雄性大鼠50只，體質量(150±10)g，河南省動物實驗中心提供，許可證編號：SCXK(豫)2005-0001。動物飼養(yǎng)于鄭州大學(河南省)醫(yī)藥科學研究院SPF級動物房，動物使用許可證編號：SYXK(豫)2006-0008；清潔級鼠料由河南省動物實驗中心提供，許可證編號：SCXK(豫)2005-0001。

1.2 試劑與儀器

腺嘌呤 北京索萊寶科技有限公司；鹽酸乙胺丁醇上海醫(yī)藥(集團)有限公司信誼制藥總廠；槲皮素、芹菜素(純度均為98%) 南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司；別嘌醇片 廣東彼迪藥業(yè)有限公司；血尿酸(serum uric acid，SUA)、尿素氮(serum urea nitrogen，SUN)、血肌酐(serum creatinine，SCr)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、總抗氧化能力(total antioxidant capacity，T-AOC)試劑盒南京建成生物工程研究所。

722分光光度計 上海精密科學儀器有限公司；DJ-2000A電子天平 亞太電子天平廠；QL-901漩渦混勻器海門市其林貝爾儀器制造有限公司；AR1530精密天平美國Ohaus 公司；80-2臺式低速離心機 姜堰市新康醫(yī)療器械有限公司。

1.3 方法

1.3.1 分組和誘導模型

50只SD大鼠適應性喂養(yǎng)7d，按體質量隨機分為5組，分別設空白組、模型組、槲皮素組(10mg/(kg·d))、芹菜素組(10mg/(kg·d))和別嘌醇組(5mg/(kg·d))。模型組、槲皮素組、芹菜素組和別嘌醇組用腺嘌呤(100mg/(kg·d))+鹽酸乙胺丁醇(250mg/(kg·d))[11]在上午定時灌胃，空白組灌胃蒸餾水5mL/(kg·d)，各組均喂飼普通飼料。

1.3.2 給藥方法

從誘導模型時開始給藥。別嘌醇組按5mg/(kg·d)灌胃別嘌醇，槲皮素組和芹菜素組分別按10mg/(kg·d)(溶劑為0.4g/100mL的羧甲基纖維素鈉溶液(CMC))在下午定時灌胃槲皮素和芹菜素，每日一次；空白組和模型組按5mL/(kg·d)灌胃0.4g/100mL的CMC，共21d。

1.3.3 相關指標測定

1)血液生化指標測定：實驗干預的第21天，禁食12h，眼眶取血，分離的血清保存于－20℃，按試劑盒說明書方法測SUA、SUN、SCr和MDA的水平及SOD、T-AOC的活性。2)肝臟組織稱質量勻漿離心后，按試劑盒說明書方法測肝臟MDA的水平和SOD、T-AOC的活性。

1.3.4 數(shù)據(jù)分析

2 結果與分析

2.1 高尿酸血癥大鼠SUA、SUN、SCr的測定結果

表1 高尿酸血癥大鼠SUA、SUN、SCr的測定結果Table 1 Effects of Que and Api on SUA, SUN, and SCr contents in hyperuricemic rats

如表1所示，經(jīng)腺嘌呤加鹽酸乙胺丁醇片灌胃21d后，模型組與空白組相比SUA顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，說明造模成功；槲皮素組，芹菜素組的SUA與模型組相比均顯著降低(P＜0.05)，而與空白組相比差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；槲皮素組與芹菜素組相比SUA較低，但是沒有統(tǒng)計學意義，而SUN、SCr值都顯著低于芹菜素組(P＜0.05)；別嘌醇組的SUA顯著降低，與模型組和空白組相比均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；各組SUN和SCr與模型組相比均顯著降低(P＜0.05)，各組的SUN值與空白組相比，均升高且差異有顯著性意義(P＜0.05)，而只有槲皮素組的SCr與空白組相比無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

2.2 高尿酸血癥大鼠血SOD、T-AOC活性及MDA水平的測定結果

如表2所示，模型組與空白組相比，血清SOD和T-AOC的活性顯著降低(P＜0.05)，而血MDA的水平顯著升高(P＜0.05)；槲皮素組與芹菜素組的血清SOD、T-AOC活性與模型組相比顯著升高(P＜0.05)，MDA水平與模型組相比顯著降低(P＜0.05)，與空白組相比血清SOD活性、MDA水平均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，而兩組的血T-AOC與空白組相比顯著升高(P＜0.05)；槲皮素組SOD、T-AOC的值較芹菜素組高，MDA值較芹菜素組低，但是差異均沒有統(tǒng)計學意義；別嘌醇組的血清SOD和T-AOC活性與空白組相比顯著降低(P＜0.05)，而MDA水平與空白組相比顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

表2 高尿酸血癥大鼠血清SOD、T-AOC活性及MDA水平的結果Table 2 Effects of Que and Api on serum SOD activity, T-AOC activity and MDA level in hyperuricemic rats

2.3 高尿酸血癥大鼠肝臟SOD、T-AOC活性及MDA水平的測定結果

表3 高尿酸血癥大鼠肝臟SOD、T-AOC活性及MDA水平的測定結果Table 3 Effects of Que and Api on liver SOD activity, T-AOC activity and MDA level in hyperuricemic rats

如表3所示，模型組與空白組相比，肝臟SOD和T-AOC的活性顯著降低(P＜0.05)，而肝臟MDA的水平顯著升高(P＜0.05)；槲皮素組、芹菜素組的肝臟SOD、T-AOC的活性與模型組相比顯著升高(P＜0.05)，MDA水平顯著降低(P＜0.05)，而槲皮素組中肝臟SOD的活性顯著高于空白組(P＜0.05)；槲皮素組SOD、T-AOC活力的值較芹菜素組高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，而MDA值較芹菜素組低，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，別嘌醇組肝臟SOD和T-AOC的活性與空白組相比均顯著降低(P＜0.05)，而MDA水平升高，與空白組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

3 討 論

尿酸是人體中一種很重要的內源性抗氧化劑[12]，但是尿酸水平持續(xù)升高可加強體內的氧化應激反應[13]，導致脂質過氧化。

槲皮素和芹菜素是人類膳食中常見的類黃酮化合物之一，屬類黃酮化合物中的黃酮醇，廣泛存在于各種植物體中。研究表明，槲皮素、芹菜素具有抗氧化、抗炎、抗癌變、抗衰老、抗突變、抗動脈粥樣硬化等多種生物活性，這些生物活性與其清除自由基能力[14-15]密切相關。

趙繼紅等[16]研究發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物抗氧化活性的強弱與分子的結構因素相關，包括羥基數(shù)目，以及羥基位置等。張欣等[17]通過對幾種多酚化合物抗氧化性的研究也發(fā)現(xiàn)，同等劑量的槲皮素和芹菜素，槲皮素清除氧自由基和抗氧化的能力均強于芹菜素，本實驗中血清和肝臟的SOD、T-AOC的值槲皮素均高于芹菜素，而MDA的值則低于芹菜素，與他們的研究一致。

Mo等[18]研究發(fā)現(xiàn)槲皮素、芹菜素等類黃酮具有顯著降低氧嗪酸鉀致高尿酸小鼠血尿酸水平，但未涉及對老鼠機體抗氧化能力的影響。本研究通過對高尿酸血癥大鼠模型進行干預，結果顯示：用腺嘌呤(100mg/(kg·d))+鹽酸乙胺丁醇(250mg/(kg·d))灌胃21d模型組血清尿酸值顯著高于空白組，說明大鼠高尿酸血癥模型誘導成功，槲皮素組、芹菜素組均有很好的降尿酸能力，并且對大鼠腎臟具有一定的保護作用。從大鼠血清和肝臟中SOD、MDA、T-AOC指標測定結果可以知道，槲皮素、芹菜素能夠顯著提高高尿酸血癥大鼠血清和肝臟中SOD、T-AOC活性，降低血清和肝臟中MDA的含量，而別嘌醇雖然能顯著的降低血清尿酸水平，但是對機體抗氧化能力沒有作用，還會導致機體脂質過氧化損傷，損害腎臟。同時別嘌醇組血尿酸值顯著低于空白組，盡管升高的尿酸水平能夠增加痛風發(fā)生的風險，并且可能導致其他的病理學改變，但是也有研究[19]證明了尿酸的抗氧化能力，特別是抑制DNA損傷的能力。過度的降低血尿酸的水平可能會產(chǎn)生相反的效應。

由此可以得出以下結論：1)槲皮素、芹菜素能夠有效地干預腺嘌呤+鹽酸乙胺丁醇片誘導的高尿酸血癥，并能增強機體總抗氧化和清除氧自由基的能力，減少脂質過氧化。2)槲皮素降尿酸和保護腎臟的效果比芹菜素好，可能因為槲皮素的抗氧化，清除氧自由基的能力強于芹菜素。具體機制有待于進一步研究。3)別嘌醇雖然能夠有效地降低血尿酸水平，但是其對腎臟的損害以及導致機體脂質過氧化的副作用不容忽視。

在臨床上別嘌醇所引起的肝腎損害等副作用較為明顯，而槲皮素、芹菜素既可有效降低血清尿酸水平，又能增強機體總抗氧化能力，減輕脂質過氧化顯示了其在預防治療高尿酸血癥上的潛在前景。

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Effects of Quercetin and Apigenin on Serum Uric Acid and Antioxidant Capacity in Hyperuricemic Rats

YAO Fang-fang1，ZHANG Rui1，F(xiàn)U Rui-juan1，HE Wei2,*
(1. College of Public Health, Zhengzhou University, Zhengzhou 450001, China；2. Henan Academy of Medical and Pharmaceutical Sciences, Zhengzhou University, Zhengzhou 450001, China)

Objective: To study the effects of quercetin (Que) and apigenin (Api) at the same dose on blood uric acid and antioxidant capacity in hyperuricemic rats induced by adenine combined with ethambutol hydrochloride. Methods: SD rats were divided into 5 groups, normal control, model control, allopurinol group, Que group, and Api group. Hyperuricemia and renal failure in rats were induced by adenine and ethambutol hydrochloride tablets intragastrically, and then Que and Api were separately administrated for 3 weeks. Enzyme activity and serum biochemical indicators in liver and serum were measured at the end of 21-day administration. Results: Que and Api could effectively lower the levels of serum uric acid (SUA), serum urea nitrogen (SUN), serum creatinine (SCr) and malondialdehyde (MDA), and elevate the activity of superoxide dismutase (SOD)and total antioxidant capacity (T-AOC) in serum and liver. Conclusion: Que and Api can reduce serum uric acid and lipid peroxidation level so as to improve antioxidant and free radical scavenging capacities in hyperuricemic rats.

quercetin；apigenin；hyperuricemia；antioxidant effect

Q946.8

A

1002-6630(2011)05-0287-04

2010-07-11

姚芳芳(1986—)，女，碩士研究生，研究方向為營養(yǎng)與疾病。E-mail：yaofang7293@126.com

*通信作者：何偉(1963—)，男，研究員，博士，研究方向為營養(yǎng)與疾病。E-mail：weibho@163.com