高 娃，鳳 英，劉曉松

（內蒙古農牧業(yè)科學院獸醫(yī)研究所，內蒙古 呼和浩特 010031）

新疆某羊場的多賽特羊和薩?？搜虬l(fā)生嚴重的脫毛病癥，羊互相啃毛，嚴重脫毛。脫毛病癥主要發(fā)生在進口羊（多賽特羊，薩?？搜颍?，發(fā)病也最嚴重，而同群的本地羊未見有脫毛癥狀。發(fā)病緩慢，病程較長，一般為1～3個月。發(fā)病率較高，為40%～60%，死亡率較低。發(fā)病羊只表現為體溫正?；蚱?，脈搏正常；毛粗糙無光澤、色灰暗；羊體營養(yǎng)狀況較差，有異嗜癖，表現為相互啃食被毛。進入枯草期后，羊毛逐漸失去光澤，皮膚表面有大量塵土，變?yōu)橥咙S色，皮膚粗糙，彈性稍差。

脫毛癥在枯草期（10月～翌年4月）開始發(fā)生，至翌年3月～5月達到高峰，在青草期（8月～9月）后一般可自愈，但是到枯草季節(jié)又引起發(fā)病。羊場全部羊只已按免疫程序要求，于春季注射了羊四聯苗（羊快疫、羊猝狙、羊腸毒血癥、羔羊痢疾）、口蹄疫疫苗和羊痘疫苗，并在春、秋兩季進行了驅蟲。

1 材料與方法

1.1 檢測樣品 采集健康羊和病羊血清共63份，羊毛12份，飼料和草料各1份。對病羊進行寄生蟲病原體檢查，結果未見寄生蟲蟲體及蟲卵；對病羊進行皮膚真菌檢查，結果也未見有無分枝的菌絲以及各種孢子。

1.2 樣品的采集與處理

1.2.1 飼料、牧草的采集與處理 采集該羊場羊日常食用的飼料1份，牧草1份。采集后揀凈其中雜物，用自來水和去離子水各沖洗3次，置于烘箱70℃干燥，粉碎備用。

1.2.2 毛樣的采集與處理 毛樣的采集按個體采樣，用剪毛剪子采集羊頸部毛樣10 g左右，揀去毛中雜物，裝入自封袋中，在實驗室用50℃～60℃的1%立白洗潔精浸泡10 min，傾出洗滌液后用自來水反復沖洗，再用蒸餾水和去離子水各沖洗3次，將潔凈的毛樣置濾紙筒中，60℃～65℃下烘干備用。

1.2.3 血樣的采集與處理 早晨空腹經頸靜脈采血，使用一次性血樣采集針，末端接一次性真空采血管采集全血10 m L，經3 500～4 000 r／min離心10 min，分離血清，分裝于經高壓滅菌的離心管中，－20℃保存?zhèn)溆?。備測其中礦物質元素的含量。

1.3 牧草硫、飼料硫、被毛硫的測定 牧草硫、飼料硫、被毛硫的測定按照《動物中毒與營養(yǎng)代謝病學》（黃有德等，2001）中的方法進行［1］。

1.4 樣品中鎂、銅、鋅、錳含量的測定－原子吸收分光光度法

1.4.1 樣品前處理 采用HNO3－HCl O4體系濕法消化法：用移液器準確取血清1.00 m L；準確稱取處理后的飼料、牧草、被毛各0.200 g，分別置于100 m L的三角瓶中，放玻璃珠3粒，加入混酸（HNO3∶HCl O4為3∶1）15～20 m L過夜后，將三角瓶置電熱板上消化，若變棕黑色，再加混合酸，直至冒白煙，消化液呈無色透明或略帶黃色，放冷用滴管將樣品消化液洗入或過濾入（視消化后樣品的鹽分而定）25 m L容量瓶中，期間用無離子水少量多次洗滌三角瓶，洗液合并于容量瓶中定容至刻度，混勻備用，同時以同樣方法處理2個空白對照管。

1.4.2 標準溶液及標準系列應用液的制備 各礦物質元素標準溶液的制備按照中華人民共和國國家標準GB／T 602-2002中單元素標準溶液的制備方法。將配好的各元素標準溶液用去離子水配成標準系列應用液：鎂為0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00μg／m L；銅為0.00，0.01，0.05，0.25，0.50，1.00，2.50，5.00μg／m L；鋅為0.00，0.01，0.02，0.04，0.08，0.16，0.32，0.64，1.28μg／m L；錳為0.00，0.01；0.02；0.04，0.08，0.32，0.64μg／m L。1.4.3 儀器工作條件 儀器工作條件具體見表1。

表1 儀器工作條件

1.4.4 樣品測定 設置好分析條件后，將標準應用液系列、空白液、樣品液分別導入原子吸收火焰，在Mg、Cu、Zn、Mn空心陰極燈下測定各自濃度。

1.4.5 計算方法

式中，Cx為樣品中各元素的含量；C1為儀器所測樣品濃度值；C0為儀器所測空白濃度值；m為樣品體積或質量。

1.5 樣品中硒的測定－熒光分光光度法 樣品中硒含量的測定按照張捷（2009）中的具體方法進行［2］。

2 數據處理與統(tǒng)計分析

試驗數據用SPSS 17.0軟件包進行單因素方差分析，差異顯著時用LSD法進行多重比較。數據結果用±SD表示。

3 結果

3.1 飼、草料和被毛中硫元素含量 飼草料、被毛中硫元素的含量測定結果見表2。

表2 飼、草料和被毛中硫元素含量（DM基礎）

3.2 飼、草料、血清和被毛中鎂、銅、鋅、錳、硒元素含量 土壤、飼草料、血清和被毛中鎂、銅、鋅、錳、硒元素含量結果見表3。

4 討論

4.1 動物營養(yǎng)代謝病與羊脫毛癥 營養(yǎng)代謝病種類繁多，發(fā)病機理復雜，一般缺乏特征性的臨床癥狀，但是在其發(fā)生、發(fā)展和臨床經過等方面具有群發(fā)性、無傳染性、地方流行性、病程較長與發(fā)病緩慢、缺乏特征性的臨床癥狀、發(fā)病動物體溫正常范圍內或偏低等特征。此次，病羊發(fā)病流行特點和臨床表現均符合營養(yǎng)代謝病的特征。

表3 飼、草料、血清和被毛中鎂、銅、鋅、錳、硒元素含量（DM基礎）

4.2 飼、草料和被毛中硫元素含量 ARC（農業(yè)研究委員會）（1980）和NRC（全國科學研究委員會）（1985）分別指出飼料中硫含量為0.15%～0.20%可維持正常瘤胃功能，NRC推薦成年羊硫的需要量為0.14%～0.18%［3－4］。發(fā)病羊場的牧草、飼料中硫含量分別為0.37%和0.29%，均在正常范圍。

健康羊和病羊羊毛中的硫含量，經分析無顯著差異（P＞0.05），但明顯低于正常羊毛中硫含量（3.06%～3.48%）。

4.3 飼、草料，血清和被毛中鎂、銅、鋅、錳、硒元素含量

4.3.1 飼、草料，血清和被毛中鎂元素含量 NRC（1985）和SCA（農業(yè)常務委員會）（1990）規(guī)定：綿羊對鎂的需要量分別為1.2～1.8 g／kg DM和1.2 g／kg DM［3，5］。一般認為血鎂濃度是診斷低血鎂癥的重要指標。據相關文獻報道，羊血清鎂含量的正常范圍為28.56±1.2 mg／L，只有低于9.84 mg／L才被視為低血鎂［6］。從表3可知，本羊場飼、草料中鎂含量顯著低于正常值，血清和被毛中的鎂含量在正常范圍內。

4.3.2 飼、草料，血清和被毛中銅元素含量 微量元素銅作為人和動物所必須的礦物質元素，在體內發(fā)揮著多種生物學效應。銅與動物的生長性能、免疫功能都有密切的關系。銅的缺乏對動物的造血功能、神經系統(tǒng)、骨骼、皮膚和被毛的生長發(fā)育均會造成不同程度的不良影響，特別是對于皮膚和被毛的影響更為嚴重。

李光輝［7］（1995）報道，飼、草料干物質中含銅適宜量為2～6 mg／kg，其中低于3～5 mg／kg視為缺乏。劉宗平（2003）也指出，飼、草料中銅低于3 mg／kg可引起發(fā)病，而10 mg／kg以上可滿足動物的需要［8］。劉宗平（2003）指出，血清銅含量的降低是動物低銅血癥的直接指示性指標之一，并指出健康動物血銅水平為0.5～1.5 mg／L，大部分為0.8～1.2 mg／L［8］。李亞奎（2005）指出，綿羊血銅正常范圍為0.7～1.3 mg／L，低于0.3 mg／L或0.5 mg／L被認為是銅缺乏或低銅狀態(tài)［9］。由于被毛容易采集，其被毛銅含量也可作為診斷動物銅缺乏的輔助指標，但因個體差異、洗滌方法及外源性污染限制了其含量的測定，劉宗平（2003）報道，健康羊被毛銅含量為3.68±0.74 mg／kg［8］。按照上述標準，由表3可知，該羊場的飼、草料，血清和被毛中銅元素含量都處于正常范圍。

4.3.3 飼、草料，血清和被毛中鋅元素含量 微量元素鋅是動物的必需微量元素，參與動物體內200多種酶的組成，參與維持上皮細胞和皮毛的正常形態(tài)、生長和健康 。鋅對免疫的影響最明顯，鋅的缺乏使機體的免疫功能受損，對疾病的敏感性增加，可產生食欲、采食量和生產性能下降以及皮膚和被毛損害。動物缺鋅最敏感的部位是皮膚和被毛系統(tǒng) 。動物缺鋅可發(fā)生脫毛及皮膚角化不全，發(fā)病動物的被毛纖維變直、變細，被毛松散，易脫落，嚴重者造成成片脫落。脫落部位的皮膚為粉紅色、增厚和起皺，其中嚴重者可發(fā)生皮炎。

飼、草料中鋅含量不足是動物鋅缺乏的主要原因。劉宗平（2003）報道指出，我國大部分省份屬貧鋅地區(qū)，如新疆、內蒙古、山西、甘肅等。NRC推薦的綿 羊 鋅 需 要 量 為 20～33 mg／kg［3］。劉 宗 平（2003）指出，飼、草料含鋅量低于20 mg／kg可引起發(fā)病。血清鋅水平能反映動物鋅營養(yǎng)狀況。綿羊正常血清鋅含量為0.8～1.2 mg／L，羊血清鋅含量低于0.392 mg／L為鋅缺乏的標志［10］。被毛鋅含量與日糧鋅水平有一定的相關性，但不作為鋅缺乏敏感的指標，劉宗平［8］（2003）指出，健康綿羊被毛鋅含量為84～142 mg／kg，李亞奎（2005）也報道，健康綿羊的毛鋅含量為115±80 mg／kg［9］。由表3可知，該羊場飼、草料，血清和被毛中鋅元素含量均在正常水平。

4.3.4 飼、草料、血清和被毛中錳元素含量 魏時來（2000）、李亞奎（2005）報道，飼、草料中錳的適宜水平為20～60 mg／kg，其中低于20 mg／kg以下為錳缺乏［6，9］。由表3可知，發(fā)病地區(qū)飼、草料中錳的含量均處于正常范圍內，表明該羊場飼、草料能夠滿足羊只對錳的需要。

Hidiroglou（1979）報道，牛和羊血液錳含量低于0.02μg／m L是日糧錳缺乏的標志［11］。黃有德等（2001）、劉宗平等（2003）分別指出，被毛錳含量變化范圍較大，成年羊和羔羊被毛錳含量分別為11.1 μg／g和18.7μg／g，飼喂低錳日糧時可降低為3.5和6.1μg／g［1，8］。按照上述標準，本次所測的脫毛羊體內血清錳含量（低于0.01 mg／L）顯著低于報道值，被毛錳含量處于正常范圍內。

4.3.5 飼、草料和被毛中硒元素含量 飼、草料，血液，被毛和組織中硒含量分析是診斷硒缺乏或硒中毒的主要依據。中國農業(yè)科學院畜牧研究所通過對國內1094個縣的主要飼料、牧草硒含量分析后指出，飼、草料干物質中硒的適宜水平為0.1～1.0 mg／kg，牧草含硒量在0.03～0.05 mg／kg為一般缺硒區(qū)，小于0.02 mg／kg的地區(qū)為嚴重缺硒地區(qū)［11］。由表3可見，本羊場的飼、草料的含硒量均處于缺硒水平。

李亞奎（2005）指出，毛硒含量是預測缺硒狀態(tài)的有效指標，動物被毛中硒含量可反映出體內硒狀態(tài)。他還進一步指出，健康反芻動物毛硒含量應大于0.25 mg／kg，被毛中硒濃度低于0.06～0.23 mg／kg，則可能發(fā)生白肌病［9］。李光輝（1997）指出，正常地區(qū)羊毛含硒0.203 mg／kg，缺硒地區(qū)0.079 mg／kg，富硒地區(qū)2.200 mg／kg。本次所測的脫毛羊被毛硒含量處于臨界值。

5 結語

通過檢測發(fā)病地區(qū)飼、草料和羊體內某些礦物質、微量元素的含量，同時與這些指標的正常值進行差異比較分析，結果表明，在羊脫毛癥發(fā)病季節(jié)，發(fā)病地區(qū)飼草料處于鎂、硒缺乏的環(huán)境中。發(fā)病羊血清中錳顯著低于正常值。發(fā)病羊被毛中硒處于臨界值。根據發(fā)病流行特征，臨床表現和檢測結果綜合確診，飼、草料、羊機體中礦物質元素鎂、錳、硒缺乏是此次羊脫毛癥發(fā)生的原因。

［1］黃有德，劉宗平.動物中毒與營養(yǎng)代謝病學［M］.蘭州：甘肅科學出版社，2001.

［2］張婕.外源Se對綿羊孕期相關微量元素、酶、MDA和NO影響的研究［D］.呼和浩特：內蒙古農業(yè)大學，2009.

［3］NRC（National Research Council）.Nutrient Requirement of sheep［M］.6th ed.Washington：National Academv of Science，1985.

［4］ARC（Agricultural Research Council）.The nutrient requirements of ruminant livestock［M］.Slough：Commonwealth Agricultural Bureaux，1980：256-262.

［5］SCA（Standing Committee on Agriculture）.Feeding standards for Australian livestock： Ruminants［M］. Melbourne：CSIRO，1990.

［6］魏炳棟.不同季節(jié)對青海海南地區(qū)“土－草－畜”放牧生態(tài)系統(tǒng)氮、硫、鈣、磷豐缺影響的研究［D］.蘭州：甘肅農業(yè)大學，2005.

［7］李光輝，王鈺.微量元素在土壤、飼料與畜體中的含量（續(xù)）［J］.飼料研究，1995（2）：12-13.

［8］劉宗平.現代動物營養(yǎng)代謝病學［M］.北京：化學工業(yè)出版社，2003.

［9］李亞奎.內蒙古四子王旗地區(qū)放牧綿羊礦物質營養(yǎng)限制因子的研究［D］.呼和浩特：內蒙古農業(yè)大學，2005.

［10］李光輝，王玨.微量元素在土壤、飼料與畜體中的含量［J］.飼料研究，1995（1）：13-14.

［11］王俊東，董希德.畜禽營養(yǎng)代謝與中毒?。跰］.北京：中國農業(yè)出版社，2001.