才曉玲，于龍鳳，何 偉，徐海平

（1.臨滄師范高等?？茖W校，云南臨滄 677000；2.臨滄市第三中學，云南臨滄 677000；3.臨滄市第二中學，云南臨滄 677000）

荷葉離褶傘菌研究進展

才曉玲1，于龍鳳1，何 偉2，徐海平3

（1.臨滄師范高等?？茖W校，云南臨滄 677000；2.臨滄市第三中學，云南臨滄 677000；3.臨滄市第二中學，云南臨滄 677000）

綜述荷葉離褶傘菌的生物學特性、人工培養(yǎng)馴化及營養(yǎng)成分，旨在為荷葉離褶傘菌的進一步開發(fā)利用提供一定的依據(jù)。

荷葉離褶傘菌；研究進展；生物學特性；生物活性物質(zhì)

荷葉離褶傘Lyophyllum decastes（Fr.：Fr.）sing又名荷葉蘑、粟窩、樹窩、一窩羊、茅草菌、北風菌、凍菌、冷菌和冷香菌，屬擔子菌亞門（Basidiomycotina）、層菌綱（Hymeno-mycetes），傘菌目（Agaricales），白蘑科（Tricholomataceae），離褶傘屬（Lyophyllum），在歐洲被稱為“Friedchi cken mushroom”〔1〕，菌肉肥厚細膩、清香撲鼻，味道鮮美，研究〔2-3〕表明荷葉離褶傘子實體中粗蛋白、氨基酸含量較高，脂肪含量低，而且還含有對人體有益的微量元素鋅、銅和硒以及大量的維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素B12和煙酸，具有很高的營養(yǎng)價值。同時，它的子實體可以作為一種傳統(tǒng)的藥物，其主要成分荷葉離褶傘多糖，具有抗腫瘤、降血糖、降血脂等生物活性〔4-5〕，該菌在國內(nèi)外深受消費者青睞，有著廣闊的開發(fā)前景。本文對荷葉離褶傘的生態(tài)特性、人工培養(yǎng)馴化及生物活性物質(zhì)等方面的研究進展進行總結(jié)，以期為進一步開發(fā)利用這一寶貴資源提供參考。

1 荷葉離褶傘生物學特性

1.1 地理分布及形態(tài)特征 荷葉離褶傘在世界各地分布廣泛，在國內(nèi)主要分布于云南、四川、貴州、福建、新疆、青海、河南、甘肅、江蘇、遼寧、吉林、黑龍江等地區(qū)〔1-6〕。荷葉離褶傘菌叢生或簇生在一起，其菌蓋呈扁半球形，后平展，中部稍凸起或稍下凹，蓋緣下彎、薄、波狀，有不規(guī)則淺裂，蓋面平滑，無毛或常有附生纖毛，平時有光澤，淺灰色、灰黑色或淡茶褐色。菌肉中部較厚，邊緣薄，有彈性，后柔軟，菌肉白色，味道柔和。菌褶直生至彎生，老后稍延生，較密而薄，顏色由白色至帶黃色，再到淺灰色，褶緣呈波狀。菌柄長6～10 cm，粗0.5～1.5 cm，中生或偏生，圓柱形，基部明顯膨大，多數(shù)常彎曲，實心，頂部粉狀，向下纖維狀，有彈性，白色至淡色，基部灰色至褐色。孢子平滑，無色，球形，直徑4～7 μm〔7〕。

1.2 生長條件 荷葉離褶傘菌秋季自然叢生于麻櫟、大齒蒙櫟等山毛櫸科闊葉林地上〔8〕，菌絲生長的溫度范圍是5～35℃，最適溫度25℃；子實體分化的溫度范圍13～22℃，最適溫度19℃；0～3℃的溫差有利于子實體的分化，溫差大于9℃子實體不能形成；孢子萌發(fā)的溫度范圍是10～25℃，最適溫度20℃；菌絲能在pH 4～11范圍內(nèi)生長，最適pH 4～5〔9〕，3 000 lx光照有利于子實體形成。

2 人工培養(yǎng)馴化

國內(nèi)許多學者先后對野生荷葉離褶傘子實體進行分離、人工馴化研究。1973年李植森〔10〕曾利用蕨臺根和茅草為培養(yǎng)料在林地內(nèi)仿野生栽培研究；2005年李林玉等〔11〕對荷葉離褶傘菌絲營養(yǎng)條件進行了初步研究；2006年魏生龍等〔9〕研究發(fā)現(xiàn)可在PDA培養(yǎng)基上獲得子實體。2007年上海豐科生物科技股份有限公司首次在中國成功實現(xiàn)了該菌（FLD-1）的工廠化栽培，但荷葉離褶傘還存在著發(fā)菌期較長、單瓶收量偏低的缺點，而且許多原材料如玉米芯、樹皮等雖然適合該菌的正常發(fā)菌，但是在出菇期間經(jīng)常不發(fā)生子實體，或者子實體發(fā)生后無法繼續(xù)生長〔11〕，因此，研究者還需探究更合理的培養(yǎng)基配方。研究人員〔9〕對荷葉離褶傘菌株ZY48-1菌絲生長最適碳源和氮源進行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在蔗糖和葡萄糖為碳源生長勢強；在以麥麩為氮源生長速度快，長勢旺盛；能在C/N15/1～50/1的范圍內(nèi)生長，C/N為50/1時生長速度最快；而李林玉等研究表明該菌絲生長最適碳源是果糖，最適氮源是牛肉膏，最適碳氮比是20∶1～1∶30；席亞麗等〔12〕采用搖瓶發(fā)酵法對該菌株發(fā)酵條件研究表明，菌絲體生長的最適碳源為玉米面；最適氮源為麩皮；最適碳氮比為16∶1；最佳培養(yǎng)基配方為玉米面200 g/L，蔗糖15 g/L，麩皮35 g/L，酵母膏1.5 g/L；最適發(fā)酵條件：pH值7.0，溫度26℃，接種量10%，轉(zhuǎn)速160 r/min。王治江等〔13〕在研究該菌株（ZY48-1）菌絲生長條件時發(fā)現(xiàn)，在荷葉離褶傘母種培養(yǎng)基（馬鈴薯200 g，麩皮100 g，葡萄糖20 g，KH2PO42 g，Mg SO4·H2O 1 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，PH自然）中，加入20%荷葉離褶傘發(fā)生地土壤腐殖質(zhì)浸出液，對荷葉離褶傘菌絲生長有促進作用；加入松枝浸出液，無論是干松枝還是鮮松枝，低濃度對荷葉離褶傘菌絲生長有促進作用，高濃度對荷葉離褶傘菌絲生長有抑制作用；魏生龍等〔14〕研究發(fā)現(xiàn)在荷葉離褶傘母種培養(yǎng)基（葡萄糖20 g，蛋白胨3 g，瓊脂20 g，蒸餾水1 000 mL，pH自然）中加入1 mg/mL KCl促進荷葉離褶傘菌絲生長；0.8 mg/mL的MnSO4和CuSO4以及0.5 mg/mL FeSO4、0.5 mg/mL CoCl2和0.8 mg/mL ZnSO4促進菌絲生長；維生素B6、維生素C、維生素PP和維生素B1可促進菌絲生長，在含有10 μg/L維生素B6的培養(yǎng)基上菌絲生長速度最快；吲哚丁酸、吲哚乙酸、奈乙酸對菌絲生長具有促進作用。此外，程繼紅等〔11〕在對荷葉離褶傘進行工廠化栽培的研究中發(fā)現(xiàn)荷葉離褶傘的抗雜菌能力很弱，接種與培養(yǎng)環(huán)節(jié)尤為重要，低污染率是栽培成功的關(guān)鍵。

3 生物活性物質(zhì)研究

目前，對于荷葉離褶傘中生物活性物質(zhì)的研究很少，主要是對荷葉離褶傘多糖的研究，在多糖的提取方面，張芬琴等〔15〕通過研究確定了荷葉離褶傘多糖提取的最佳工藝為：溫度85℃、pH 9.0、料液比1∶15、提取時間1.5 h，用苯酚-硫酸法測定最佳提取工藝條件下固形物中多糖含量為65.52%。閆培生等〔16〕首次利用10 L發(fā)酵罐研究了荷葉離褶傘菌胞內(nèi)和胞外多糖產(chǎn)量，以及6種酶對發(fā)酵菌絲體多糖的提取效果，結(jié)果表明，在25℃、120 r/min，空氣流量為200 L/h的條件下發(fā)酵，8 d時胞內(nèi)多糖含量（63.1 mg/g干菌絲體）和胞外多糖產(chǎn)量（3.54 g/L）達最高，9 d時菌絲體產(chǎn)量（17.86 g/L）及胞內(nèi)多糖產(chǎn)量（1.11 g/L）達最高，與搖瓶發(fā)酵相比，其產(chǎn)量均顯著提高。溶壁酶酶解處理菌絲體獲得的多糖產(chǎn)量最高，而中性蛋白酶是最經(jīng)濟適宜的酶類，與不加酶的水提法相比，多糖提取率分別提高了459.29%和376.11%，中性蛋白酶酶解制備菌絲體多糖的適宜條件為：在1%酶用量下，30℃酶解2 h后，95℃提取2次，每次2 h。Yuuichi Ukawa等〔17〕從荷葉離褶傘子實體的熱水提取物中分離出11種多糖，可以抑制腫瘤的生長；也有研究〔18〕證明荷葉離褶傘多糖能夠提高小鼠的免疫功能及清除鼠機體內(nèi)超氧陰離子自由基，能夠增強機體抗氧化作用，延緩衰老。Toshihiro Miura等〔4〕報道，荷葉離褶傘水提取物可以降低胰島素依賴型小白鼠的血糖濃度。

4 存在問題及展望

荷葉離褶傘作為一種亟需開發(fā)的珍稀野生食用菌，研究者對荷葉離褶傘生物學特性已經(jīng)有所掌握，并且基本實現(xiàn)了對該菌的工廠化栽培，但還存在生物轉(zhuǎn)化率低、生產(chǎn)周期很長等缺點，若要大面積商業(yè)栽培還需要進一步篩選出更合理的培養(yǎng)基。目前，人們對荷葉離褶傘中生物活性物質(zhì)還知之甚少，僅對荷葉離褶傘多糖的提取及藥理作用進行了初步研究，如荷葉離褶傘多糖具有抗腫瘤、降血糖、降血脂等生物活性〔4-5〕，這為抗癌、降血糖、降血脂等藥物研發(fā)提供了新的來源，但對于其他生物活性物質(zhì)的研究還需要進行不斷的探索和研究。

〔1〕Cleland C L.Integrating recent advances in neuroscience into undergraduate neuroscience and physiology courses〔J〕.Adv.Physiol.Educ.，2002（26）：271-277.

〔2〕張漢燚，張芬琴，王小明，等.荷葉離褶傘子實體營養(yǎng)成分分析與評價〔J〕.菌物學報，2008，27（5）：696-700.

〔3〕席亞麗，茆愛麗，王曉琴，等.荷葉離褶傘子實體、菌絲體及發(fā)酵液蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值評價〔J〕.菌物學報，2010，29（4）：603-607.

〔4〕Toshihiro Miura，Kubo M I，Asushi Itoh Y，etal.Antidiabetic Activity of Lyophyllum decastes in Genetically Type 2 Diabetic Mice〔J〕.Biol.Pharm.Bul.，2002，25（9）：1234-1237.

〔5〕UkawaY，F(xiàn)uruichi Y.Effect of H atakeshimeji（Lyophyllum decastes Sing.）Mushroom on serum lipid levels in rats〔J〕.J.Nutr.Sci.Vitam.Inol.，2002，48（1）：73-76.

〔6〕李曉，李玉.中國離褶傘屬真菌研究進展〔J〕.食用菌學報，2009，16（3）：75-79.

〔7〕上海農(nóng)業(yè)科學院食用菌研究所.中國食用菌志〔M〕.北京：中國林業(yè)出版社，1991.

〔8〕卯曉嵐.中國大型真菌〔M〕.鄭州：河南科學技術(shù)出版社，2000：64.

〔9〕魏生龍，王治江，于海萍，等.荷葉離褶傘生物學特性研究〔J〕.菌物學報，2006，25（1）：101-108.

〔10〕陳士瑜.菇菌栽培手冊〔M〕.北京：科學技術(shù)文獻出版社，2003：537-540.

〔11〕程繼紅，鄭慧芬，賁偉東，等.荷葉離褶傘工廠化栽培〔J〕.食用菌學報，2008，15（2）：20-22.

〔12〕席亞麗，王治江，魏生龍，等.荷葉離褶傘搖瓶發(fā)酵條件研究〔J〕.河西學院學報，2011，27（2）：68-74.

〔13〕王治江，魏生龍.荷葉離褶傘菌絲在不同培養(yǎng)基上培養(yǎng)試驗〔J〕.食用菌，2006，28（5）：9-10.

〔14〕魏生龍，連海麗，于海萍，等.礦質(zhì)營養(yǎng)與其他生長物質(zhì)對荷葉離褶傘菌絲生長的影響〔J〕.菌物學報，2008，27（2）：201-208.

〔15〕張芬琴，李彩霞，李鵬，等.荷葉離褶傘可溶性多糖提取工藝研究〔J〕.食品工業(yè)科技，2010，31（5）：224-225.

〔16〕閆培生，馬麗雅，朱國振，等.荷葉離褶傘液體發(fā)酵及生物酶法提取菌絲體多糖的研究〔J〕.中國農(nóng)業(yè)科技導報，2010，12（4）：84-89.

〔17〕Kawa Y U U，Ito H I，Isamatsu M A H.Antitumor effects o（f1→3）-β-D-glucan and（1→6）-β-D-glucan purified from newly cultivated mushroom，Hatakeshimeji（Lyophyllum decastes Sing）〔J〕.Journal of Bioscience and Bioengineering，2000，90（1）：98-104.

〔18〕賈寧.荷葉離褶傘多糖對小鼠免疫功能影響和抗氧化作用研究〔A〕.中國畜牧獸醫(yī)學會獸醫(yī)病理學分會第十六次學術(shù)研討會、中國病理生理學會動物病理生理專業(yè)委員會第十五次學術(shù)研討會論文集〔C〕.2009：367.

Research on Lyophyllum decastes

CAI Xiaoling1,YU Longfeng1,HE Wei2,XU Haiping3
（1.Lincang Teachers College,Lincang，Yunnan 677000,China;2.No.3 Middle School of Lincang,Lincang，Yunnan 677000,China；3.No.2 Middle School of Lincang,Lincang，Yunnan 677000,China）

The study of Lyophyllum decastes,including its biological characteristics,cultivation and bioactive products,was summarized in order to provide basis for further development and utilization.

Lyophyllum decastes；research review；biological characteristics；bioactive products

Q-1［文獻標志碼］A［文章編號］1672-2345（2012）04-0053-03

2011-09-26

才曉玲，講師，主要從事土壤與植物營養(yǎng)研究.

（責任編輯 毛本勇）