劉美玲 彭慧敏 郭旭光 陳 瓊

廣州醫(yī)學院 第三附屬醫(yī)院檢驗科，廣東 廣州 510150

蒼白密螺旋體蒼白亞種 (Treponema.pallidumsubsp.pallidum，Tp)俗稱梅毒螺旋體，是人類性傳播疾病(STD)梅毒 (syphilis)的病原體。梅毒是一種嚴重危害人類健康的性傳染性疾病，其不僅嚴重損害人體的多個器官從而引起全身性損害［1］。梅毒主要經(jīng)性接觸、血液和母嬰垂直途徑傳播，傳染性強。其實驗室檢測是診斷和發(fā)現(xiàn)梅毒的主要手段［2］。當人體感染梅毒螺旋體后4～10周，血清中可產(chǎn)生抗類脂抗原的非特異性抗體和抗梅毒螺旋體特異抗原的抗體［3］。本文對5928份標本用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme－linked immunoadsordent assay;ELISA)和化學發(fā)光分析 (chemiluminescence immunoassay，CLIA)檢測方法進行測定，并比對分析如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源。標本為某院2011年12月至2012年5月5928份血清標本。其中男性患者2951例，女性患者2977例，年齡0～88歲，平均年齡32.4±5.5歲。

1.2 試劑?；瘜W發(fā)光試劑購自雅培公司，ELISA檢測試劑盒購自北京華大吉比愛生物技術(shù)有限公司。

1.3 儀器。ABBOTT AXSYM Plus全自動化學發(fā)光免疫分析儀購自美國雅培公司。

1.4 方法。所有血清標本分別用ELISA法和化學發(fā)光法進行梅毒螺旋體特異性抗體血清學檢測。操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

2 結(jié)果

表1 ELISA和化學發(fā)光檢測梅毒螺旋體抗體的結(jié)果

在5928份血清標本中，ELISA法檢測陽性151例，陽性率2.55%，化學發(fā)光法檢測陽性198例，陽性率3.34%，兩者相比差異有統(tǒng)計學意義 (χ2=6.52，P＜0.05)。

3 討論

人體感染梅毒螺旋體后機體產(chǎn)生兩類抗體，一類是梅毒螺旋體破壞患者組織后釋放一種抗原物質(zhì)刺激機體產(chǎn)生的具有抗體物質(zhì)的反應素 (非特異性梅毒螺旋體抗體，)，另一類是抗梅毒螺旋體的特異性抗體，在梅毒感染的潛伏期即產(chǎn)生，感染2～4周即可檢出，治愈后相當長的時間內(nèi)仍然存在較高的陽性率，甚至終生陽性。

臨床應用中，梅毒反應素的檢測 (如RPR、USR和TRUST等)一般用于觀察梅毒的治療效果、判斷復發(fā)及現(xiàn)行感染。因檢測易出現(xiàn)假陽性，并且在疾病非活動期和治療后容易消失，對Ⅰ期、Ⅲ期梅毒和治療后梅毒的檢出率低，晚期梅毒時又可以轉(zhuǎn)陰，因此不適用于一期梅毒早期、三期梅毒的診斷。此類試驗結(jié)果必須結(jié)合梅毒螺旋體特異性抗體檢測。目前梅毒螺旋體特異性抗體常用的篩查方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA)與化學發(fā)光分析 (CLIA)等。必要時加做梅毒螺旋體抗體確證試驗。

本世紀70年代中期Arakawe首次報道用發(fā)光信號進行酶免疫分析，利用發(fā)光的化學反應分析超微量物質(zhì)，特別是用于臨床免疫分析中檢驗超微量活性物質(zhì)［4］。目前，這一技術(shù)已從實驗室的稀有技術(shù)過渡到臨床醫(yī)學的常檢測手段［5］?；瘜W發(fā)光免疫分析 (Chemiluminescence Immunoassay，CLIA)是將化學發(fā)光或生物發(fā)光體系與免疫反應相結(jié)合，用于檢測微量抗原或抗體的一種新型標記免疫測定技術(shù)。其檢測原理與放射免疫 (RIA)和酶免疫 (EIA)相似，不同這處是以發(fā)光物質(zhì)代替放射性核素或酶作為標記物，并借助其自身的發(fā)光強度直接進行測定［6］。

化學發(fā)光免疫分析既具有放射免疫的高靈敏度，又具有酶聯(lián)免疫的操作簡便、快速的特點，易于標準化操作。且測試中不使用有害的試劑，試劑保持期長，應用于生物學、醫(yī)學研究和臨床實驗診斷工作，成為非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一。國內(nèi)近年來新開發(fā)的CLIA梅毒特異性抗體檢查方法，采用儀器進行檢測分析，結(jié)果客觀準確，數(shù)據(jù)保存方便，同時也有利于對實驗室進行質(zhì)量控制等規(guī)范操作［7］。有報道認為，其敏感性和特異性與梅毒的確診試驗梅毒螺旋體抗體明膠顆粒凝集試驗 (TPPA)相當，可作為其替代試驗，在臨床中廣泛應用［8，9］。

綜上所述，與ELISA法相比，CLIA法檢測梅毒螺旋體抗體操作較規(guī)范，易批量操作，漏檢率低，是較為理想的梅毒篩查方法。

［1］蔣傳好，趙飛駿，吳移謀.梅毒螺旋體致病相關(guān)蛋白的研究進展.中南醫(yī)學科學雜志.2011.39(5):481－486.

［2］李璇，王輝.HIV/梅毒共感染國內(nèi)外研究進展.中國艾滋病性病.2011.17(5):610－612.

［3］蒙在楊，謝智光.梅毒檢測技術(shù)進展.檢驗醫(yī)學與臨床.2011.8(21):2627－2628.

［4］Olsson T，Brunius G，Carlsson HE，Thore A.Luminescence immunoassay(LIA):a solid－phase immunoassay monitored by chemiluminescence.J Immunol Methods.1979.25(2):127 －35.

［5］Neupert W，Oelkers R，Brune K，Geisslinger G.A new reliable chemiluminescence immunoassay(CLIA)for prostaglandin E2 using enhanced luminol as substrate.Prostaglandins.1996.52(5):385 －401.

［6］Yu F，Wu Y，Yu S，et al.A competitive chemiluminescence enzyme immunoassay for rapid and sensitive determination of enrofloxacin.Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc.2012.93:164－8.

［7］馬紅霞，周運恒，楊藺，黃斌，范列英.不同的梅毒血清學試驗方法檢測1808例血清標本結(jié)果分析.第二軍醫(yī)大學學報.2011.32(12):1350－1352.

［8］吳志周，祝新.TPPA法與化學發(fā)光法檢測梅毒螺旋體特異性抗體的比較［J］.嶺南皮膚性病科雜志，2008，15(3):138－139.

［9］侯曉菁，梁艷，陳潔，等.化學發(fā)光法檢測梅毒螺旋體特異性抗體的試驗評價［J］.檢驗醫(yī)學，2010，25(5):365－367.