對人結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29轉(zhuǎn)染shRNA重組質(zhì)粒后Survivin基因變化的研究

袁禧先 張爽 徐宗云 王鳳榮 董慧慧

[摘要] 目的 通過對人結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29轉(zhuǎn)染shRNA重組質(zhì)粒后觀察Survivin基因的變化。 方法 設(shè)計(jì)兩條針對Survivin基因CDS區(qū)不同位點(diǎn)的siRNA片段并構(gòu)建shRNA表達(dá)載體，重組質(zhì)粒使用陽離子脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29。RT-PCR，Western-blot檢測轉(zhuǎn)染后mRNA及蛋白表達(dá)。 結(jié)果 轉(zhuǎn)染shRNA重組質(zhì)?？捎行б种艸T-29細(xì)胞Survivin的表達(dá)，Survivin mRNA和蛋白表達(dá)下調(diào)，表明Survivin基因沉默效果較高；兩個(gè)轉(zhuǎn)染組之間相比pshRNA1組Survivin基因的表達(dá)量低于pshRNA2組。 結(jié)論 人結(jié)腸癌細(xì)胞株中的Survivin基因表達(dá)率可通過shRNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染而發(fā)生變化；siRNA1和siRNA2序列中Survivin基因表達(dá)量存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示我們在今后有關(guān)Survivin基因靶向治療研究中是否需要考慮到序列的選擇以提高作用效果。

[關(guān)鍵詞] Survivin；結(jié)腸癌HT-29；SiRNA；RT-PCR；Western-blot

[中圖分類號] R730.2[文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A[文章編號] 1673-9701（2012）15-0001-03