• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

      響應(yīng)面法優(yōu)化油橄欖葉中橄欖苦苷超聲輔助提取工藝

      2012-06-01 10:59:46閆樹軍蘇艷紅饒在生
      食品科學(xué) 2012年18期
      關(guān)鍵詞:葉中油橄欖橄欖

      閆樹軍,王 遠(yuǎn),蘇艷紅,饒在生,李 暉

      (四川大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院,四川 成都 610065)

      響應(yīng)面法優(yōu)化油橄欖葉中橄欖苦苷超聲輔助提取工藝

      閆樹軍,王 遠(yuǎn),蘇艷紅,饒在生,李 暉*

      (四川大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院,四川 成都 610065)

      目的:研究油橄欖葉中橄欖苦苷超聲輔助提取最佳工藝條件。方法:選定甲醇體積分?jǐn)?shù)、料液比和提取時間作為影響因素,以橄欖苦苷提取率為評價指標(biāo)。在單因素試驗的基礎(chǔ)上,通過3因素3水平Box-Behnken試驗,建立橄欖苦苷提取率的二次多項式回歸方程,經(jīng)響應(yīng)面回歸分析得到優(yōu)化組合條件。結(jié)果:最佳工藝條件為甲醇體積分?jǐn)?shù)93.5%、料液比1∶25(g/mL)、提取時間26min。結(jié)論:油橄欖葉中橄欖苦苷提取率可達(dá)7.83%。

      油橄欖葉;橄欖苦苷;超聲提??;響應(yīng)面分析

      油橄欖(Olea europare Linn)又名洋橄欖、齊墩果、阿列布等,為木犀科、木犀欖屬常綠喬木,主要分布在地中海沿岸國家和美國加州地區(qū),現(xiàn)在世界各國均有栽培[1-2]。研究發(fā)現(xiàn)油橄欖葉中含有大量的生物活性物質(zhì),主要成分有裂環(huán)環(huán)烯醚萜及其苷(橄欖苦苷為主要成分)、黃酮及其苷、雙黃酮及其苷、低分子單寧等?,F(xiàn)代藥理研究表明,橄欖苦苷具有抗真菌、抗炎、抗病毒、抗氧化,以及抗癌和降血糖等多種作用[3-4]。

      目前油橄欖葉中橄欖苦苷的傳統(tǒng)提取方法主要采用水提和醇提法,提取物為含量3%~5%的粗制品,該法得率較低、操作費時、能耗大[5-12]。近年來,超聲波輔助提取方法廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物的提取中,其主要是利用超聲波的空化效應(yīng)增大介質(zhì)分子的運動速度,使可溶性活性成分迅速溶出,從而提高提取率,縮短提取時間,并且避免高溫對提出成分的影響[13-14]。本實驗利用超聲輔助提取油橄欖葉中橄欖苦苷,采用響應(yīng)面分析(response surface methodology,RSM)多元二次回歸方程來擬合影響因素與響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系[15],通過對回歸方程進(jìn)行分析優(yōu)化工藝參數(shù),為橄欖苦苷提取工藝的進(jìn)一步開發(fā)利用提供依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 材料、試劑與儀器

      油橄欖葉購于甘肅;橄欖苦苷對照品(純度≥98%)成都曼思特生物科技有限公司;甲醇(分析純)、乙腈(色譜純) 美國天地公司;高效液相色譜用水為三次蒸餾水。

      BS-224S電子天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司;KH-5200DE型數(shù)控超聲波清洗器 昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司;1200高效液相色譜儀(配有四元泵及DAD檢測器) 美國安捷倫科技有限公司。

      1.2 方法

      1.2.1 橄欖苦苷的提取

      將在60℃干燥至質(zhì)量恒定的油橄欖葉粉碎后過篩(30~40目),備用。準(zhǔn)確稱取一定量的油橄欖葉粉,加入適量甲醇溶液,稱量,在100W超聲功率下提取一定時間后,冷卻至室溫,稱量,用甲醇溶液補(bǔ)充缺失質(zhì)量,搖勻,過濾,棄去初濾液,取3 mL續(xù)濾液,過0.45μm濾膜,待測,計算油橄欖葉中橄欖苦苷提取率。

      式中:C為橄欖苦苷質(zhì)量濃度/(g/mL);V為加入甲醇溶液體積/mL;m為油橄欖葉質(zhì)量/g。

      固定試驗條件提取時間3 0 mi n、甲醇體積分?jǐn)?shù)90%、提取功率100W、料液比1∶25(g/mL)進(jìn)行單因素試驗,研究各因素對橄欖苦苷提取率的影響。

      綜合單因素試驗結(jié)果,采用Box-Behnken試驗設(shè)計原理,優(yōu)化超聲提取油橄欖葉中橄欖苦苷的工藝條件。

      1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

      準(zhǔn)確稱取橄欖苦苷對照品7.88mg,加甲醇定容至5mL,搖勻,配成質(zhì)量濃度1.576mg/mL的對照品溶液。分別移取395、315、235、155、80μL用甲醇定容至5mL,以峰面積對質(zhì)量濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程:y=5.593×10-8x(R2=0.9986),其中y為橄欖苦苷質(zhì)量濃度/(mg/mL);x為橄欖苦苷峰面積/(mAU·s)。結(jié)果表明橄欖苦苷在0.025~0.125mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

      1.2.3 色譜條件

      色譜柱:Agilent extend C18(150mm×4.6mm,5μm);柱溫30℃;流動相:乙腈-水(21∶79,V/V)[16];檢測波長230nm;紫外檢測器;流速1mL/min。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 單因素試驗

      2.1.1 甲醇體積分?jǐn)?shù)對提取率的影響

      由圖1可知,橄欖苦苷提取率在90%甲醇溶劑處出現(xiàn)最大值。油橄欖葉中有很多極性不同的化合物,它們最適合的溶劑極性各不相同。因此,橄欖苦苷的提取率會隨著甲醇體積分?jǐn)?shù)的增加先增大后減小。

      圖1 甲醇體積分?jǐn)?shù)對油橄欖葉中橄欖苦苷提取率的影響Fig.1 Effect of methanol concentration on the yield of oleuropein from Olea europaea leaves

      圖2 料液比對油橄欖葉中橄欖苦苷提取率的影響Fig.2 Effect of solid-to-solvent ratio on the yield of oleuropein from Olea europaea leaves

      2.1.2 料液比對橄欖苦苷提取率的影響由圖2可知,隨著提取液使用量的增大,橄欖苦苷的提取率逐漸上升,當(dāng)提取液使用量超過1∶25時,橄欖苦苷提取率增加甚少。因此選取料液比1∶25。

      2.1.3 提取時間對橄欖苦苷提取率的影響

      圖3 提取時間對油橄欖葉中橄欖苦苷提取率的影響Fig.3 Effect of extraction time on the yield of oleuropein from Olea europaea leaves

      由圖3可知,橄欖苦苷提取率在30min出現(xiàn)最大值,隨著提取時間的增加,提取率呈先上升再下降,其原因可能是由于橄欖苦苷超聲提取時間過長,超聲波引起產(chǎn)物結(jié)構(gòu)變化降低提取率。因此選擇超聲提取時間30min。

      2.1.4 提取次數(shù)對橄欖苦苷提取率的影響

      圖4 提取次數(shù)對油橄欖葉中橄欖苦苷提取率的影響Fig.4 Effect of repeated extraction number on the yield of oleuropein from Olea europaea leaves

      由圖4可知,1次提取率為6.70%,2次提取率僅為0.94%,考慮到時間、成本和能耗損失,故選擇提取次數(shù)為1次。

      2.2 響應(yīng)面分析與橄欖苦苷提取工藝的優(yōu)化

      選取甲醇體積分?jǐn)?shù)、料液比、提取時間作為對橄欖苦苷提取率影響顯著的3個因素,在單因素試驗的基礎(chǔ)上采用3因素3水平的響應(yīng)面分析方法進(jìn)行試驗設(shè)計,試驗因素與水平見表1。

      表1 橄欖苦苷提取響應(yīng)面分析因素與水平Table 1 Variables and their coded levels tested in response surface analysis

      表2 橄欖苦苷提取響應(yīng)面分析方案及結(jié)果Table 2 Experimental design and results for response surface analysis

      響應(yīng)面試驗設(shè)計及結(jié)果見表2。其中,試驗號1~12是析因試驗,而13~15是中心試驗,用來估計試驗誤差。采用Minitab 15軟件,使用未編碼單位對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸擬合結(jié)果見表3,其甲醇體積分?jǐn)?shù)、料液比、提取時間的二次多項回歸模型為Y=7.713+0.091X1-0.024X2+0.125X3-0.39X12-0.2X22-0.628X32-0.382X1X2+0.005X1X3-0.19X2X3。

      表3 回歸方程方差分析表Table 3 Analysis of variance for the fitted regression equation

      由表3可看出,根據(jù)P值判斷(P<0.01時水平極顯著),方程二次項和交互項影響明顯,其中二次項更為顯著,一次項影響相對顯著。說明響應(yīng)值(提取率)的變化相對復(fù)雜,各具體試驗因素對響應(yīng)值的影響不是簡單的線性關(guān)系。該模型的相關(guān)系數(shù)R2=2.87724/2.92493=98.37%,說明此模型與試驗實際擬合較好,試驗失擬較小,因此可用該回歸方程代替試驗真實點對試驗結(jié)果進(jìn)行分析。回歸系數(shù)顯著性檢驗表明,在所各取的因素水平范圍內(nèi),對油橄欖葉中橄欖苦苷的提取率影響排序為提取時間>甲醇體積分?jǐn)?shù)>料液比。

      響應(yīng)面Y對于因素X1、X2、X3值構(gòu)成的三維空間在二維平面上的等高線圖,可直觀地反映各因素之間的相互作用。Minitab 15軟件處理得到響應(yīng)面分析結(jié)果見圖5。

      圖5 各兩因素交互作用對橄欖苦苷提取率影響的響應(yīng)面與等高線圖Fig.5 Response surface and contour plots for the effects of pairwise interactions of three variables on the yield of oleuropein from Olea europaea leaves

      模型的響應(yīng)曲面及其等高線直觀地反映了各因素對響應(yīng)值的影響。從響應(yīng)面的最高點可以看出,在所選的范圍內(nèi)存在極值,即是響應(yīng)面的最高點。比較幾個圖可知,因素X3(提取時間)、X1(甲醇體積分?jǐn)?shù))對響應(yīng)值的影響較大,表現(xiàn)為曲線比較陡,這與回歸分析的結(jié)果吻合。單純從橄欖苦苷提取率值的大小考慮,可以求得最適的提取條件為X1=93.5%、X2=1∶25、X3= 26min,預(yù)測橄欖苦苷的提取率為7.75%,在此條件下進(jìn)行驗證實驗,重復(fù)3次,取平均值,提取液中橄欖苦苷的提取率為7.83%,與預(yù)測值相差1.4%。因此,基于響應(yīng)曲面法所得到的優(yōu)化工藝參數(shù)準(zhǔn)確可靠。

      3 結(jié) 論

      本實驗使用超聲法從油橄欖葉中提取分離橄欖苦苷,通過單因素試驗,以及3因素3水平響應(yīng)面分析試驗,建立了提取率與各影響因素之間的數(shù)學(xué)模型,根據(jù)此二次回歸模型,確定橄欖苦苷的最佳提取工藝參數(shù):甲醇體積分?jǐn)?shù)93.5%、料液比1∶25、提取時間26min,在此工藝條件下橄欖苦苷的實際提取率可達(dá)7.83%。因此,利用響應(yīng)面分析方法對油橄欖葉中橄欖苦苷的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,可獲得最佳工藝參數(shù),降低工藝操作的盲目性。

      [1]林鵬, 王潔雪, 李曉魯, 等. 油橄欖葉中裂環(huán)烯醚萜類化合物的研究進(jìn)展[J]. 西南民族大學(xué)學(xué)報, 2008, 34(5)∶ 999-1002.

      [2]高彩霞, 王成章, 陳文英, 等. 油橄欖葉中多酚和黃酮的含量分析[J].生物質(zhì)化學(xué)工程, 2006, 40(4)∶ 4-6.

      [3]郝婷, 崔建玲, 趙桂琴, 等. 橄欖苦苷提取分離和藥理活性的研究進(jìn)展[J]. 承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報, 2010, 27(1)∶ 69-72.

      [4]陳千良, 孫文基. 裂環(huán)烯醚萜類化合物研究進(jìn)展[J]. 國外醫(yī)藥∶ 植物藥分冊, 2003, 18(2)∶ 58-62.

      [5]LEONARDIS A D, ARETINI A, ALFANO G, et al. Isolation of a hydroxytyrosol-rich extract from olive leaves (Olea europaea L.) and evaluation of its antioxidant propertiesand bioactivity[J]. Eur Food Res Technol, 2008, 226(4)∶ 653-659.

      [6]黨建章, 黃志立, 張志安, 等. 橄欖葉中橄欖苦苷不同提取方法的研究[J]. 深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報, 2006, 5(4)∶ 34-36.

      [7]RIDA F, SAMER B, SERINE E, et al. The antioxidant and antiproliferative activity of the lebanese Olea europaea extract[J]. Plant Foods Hum Nutr, 2011, 66(1)∶ 58-63.

      [8]VALENTINA R G, ROCIO P, ANGEL C. The effect of tyrosol, hydroxytyrosol and oleuropein on the non-enzymatic lipid peroxidation of rat liver microsomes[J]. Molecular and Cellular Biochemistry, 2001, 217(1/2)∶ 35-41.

      [9]王成章, 高彩霞, 葉建中, 等. 引種阿斯油橄欖葉中橄欖苦苷提取分離及結(jié)構(gòu)鑒定[J]. 林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè), 2009, 29(3)∶ 53-57.

      [10]何志勇, 夏文水. 橄欖果實中酚類化合物的分析研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2008, 36(26)∶ 406-407.

      [11]RYAN D, LAWRENCE H, PRENZLER P, et al. Recovery of phenolic compounds from Olea europaea[J]. Analytica Chimica Acta, 2001, 445 (1)∶ 67-77.

      [12]KIRITSAKIS K, KONTOMINAS M G, KONTOGIORIS C, et al. Composition and antioxidant activity of olive leaf extracts from greek olive cultivars[J]. J Am Oil Chem Soc, 2010, 87(4)∶ 369-376.

      [13]林健, 陳鋒, 李春來. 橄欖總黃酮的超聲提取工藝研究[J]. 海峽藥學(xué), 2007, 19(11)∶ 60-62.

      [14]李張偉, 劉宇輝, 張珠珠. 橄欖黃酮的提取及其抗氧化作用的研究[J]. 廣東化工, 2007, 34(12)∶ 37-40; 89.

      [15]任丹丹, 陳谷. 響應(yīng)面法優(yōu)化黃秋葵多糖超聲提取工藝[J]. 食品科學(xué), 2011, 32(8)∶ 143-146.

      [16]黨建章, 許柏球, 徐華順, 等. 高效液相色譜法測定橄欖葉提取物中橄欖苦苷的含量[J]. 中國藥學(xué)雜志, 2006, 41(9)∶ 711-712.

      Optimization of Ultrasound-Assisted Extraction Process for Oleuropein from Olea europaea Leaves by Response Surface Analysis

      YAN Shu-jun,WANG Yuan,SU Yan-hong,RAO Zai-sheng,LI Hui*
      (College of Chemical Engineering, Sichuan University, Chengdu 610065, China)

      Objective∶ To find optimal process conditions for the ultrasound-assisted extraction of oleuropein from Olea europaea leaves. Methods∶ The effects of methanol concentration, solid-to-solvent ratio and extraction time on oleuropein yield were investigated by one-factor-at-a-time design. A three-factor, three-level Box-Behnken experimental design was employed to build a second-order polynomial regression equation. The obtained regression equation was analyzed by response surface analysis to optimize the three process conditions. Results∶ The optimal process conditions were as follows∶ methanol concentration of 93.5%, solid-to-solvent ratio of 1∶25 (g/mL) and an extraction time of 26 min. Conclusion∶ Under these conditions, the oleuropein yield from Olea europaea leaves was up to 7.83%.

      Olea europaea leaves;oleuropein;ultrasound-assisted extraction;response surface methodology

      TS201.1

      A

      1002-6630(2012)18-0073-04

      2011-07-08

      閆樹軍(1988—),男,碩士研究生,研究方向為天然藥物提取與分離。E-mail:ysj512780817@163.com

      *通信作者:李暉(1954—),男,教授,博士,研究方向為藥學(xué)工藝學(xué)。E-mail:Lihuilab@sina.com

      猜你喜歡
      葉中油橄欖橄欖
      橄欖林中的鄉(xiāng)村酒店
      高速逆流色譜分離制備油橄欖葉中橄欖苦苷
      中成藥(2018年4期)2018-04-26 07:13:09
      冬清肺火用橄欖
      橄欖情
      金堂縣開展油橄欖栽植管理技術(shù)培訓(xùn)
      綠色天府(2017年3期)2017-03-06 19:13:17
      木菠蘿葉中水溶性黃酮苷的分離、鑒定和測定
      中成藥(2016年4期)2016-05-17 06:07:52
      正交法優(yōu)選杜仲葉中綠原酸提取工藝
      超聲強(qiáng)化提取橄欖葉中藥用有效成分的研究
      食品工程(2015年3期)2015-12-07 10:20:51
      當(dāng)歸葉中維生素C的提取研究
      西藏科技(2015年10期)2015-09-26 12:10:27
      油橄欖的速生早實豐產(chǎn)栽培技術(shù)
      綠色科技(2015年5期)2015-07-05 18:08:45
      灵武市| 莱阳市| 柯坪县| 三门县| 海伦市| 上杭县| 宁蒗| 潼关县| 班戈县| 金山区| 大宁县| 本溪市| 龙里县| 盐山县| 遂川县| 松桃| 锡林郭勒盟| 建昌县| 巴中市| 汉源县| 黄浦区| 沂南县| 利辛县| 永川市| 西充县| 旅游| 安西县| 民乐县| 洞头县| 开鲁县| 酉阳| 衡南县| 调兵山市| 贡觉县| 天气| 乐昌市| 长治市| 融水| 黔西县| 德阳市| 柯坪县|