曾蔚欣，劉禮斌，唐菀晨，孫路路

跌打紫金丸是由土鱉蟲、乳香、沒藥、紅花、川芎、當歸等15 味中藥材制備而成的大蜜丸，為傳統(tǒng)自擬處方制劑，臨床應(yīng)用多年，功能活血化瘀，通絡(luò)消腫。用于跌打損傷、閃腰岔氣、傷筋折骨等療效顯著。筆者對制劑中的8 味藥材進行了鑒別，建立了該制劑的質(zhì)量標準。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 GB303 型電子分析天平(瑞士梅特勒公司)，XSP－18S 型顯微鏡(南京江南光學(xué)儀器廠)，ZF－I 型三用紫外分析儀(上海顧村電光儀器廠)，CQ50 超聲波清洗器(上海超聲儀器廠)，高效硅膠G 薄層板(20 cm×5 cm，安徽良臣硅源材料有限公司)。

1.2 試劑 跌打紫金丸(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀壇醫(yī)院中藥制劑室生產(chǎn)，批號:20110403)，水合氯醛、醋酸乙酯、環(huán)己烷、乙醚、苯、香草醛、硫酸均為分析純。

2 方法

2.1 顯微鑒別 (1)取跌打紫金丸1 丸，從中間切開，挑取適量樣品，置載玻片中央，滴加水合氯醛試液2 滴，透化后裝片。置顯微鏡下觀察。

2.2 薄層色譜鑒別

2.2.1 樣品的制備 按制劑處方、制法和配制規(guī)程，制備跌打紫金丸樣品。

2.2.2 陰性對照品的制備 按制劑處方、制法和配制規(guī)程，制備跌打紫金丸陰性對照品3 份。其中第1 份不含當歸、第2 份不含乳香、第3 份不含沒藥。

2.2.3 當歸薄層色譜鑒別

2.2.3.1 供試品溶液的制備 取2.2.1 項下制備的樣品9 g，剪碎，加硅藻土6 g，研勻，加醋酸乙酯30 ml，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1 ml 溶解為供試品溶液。

2.2.3.2 陰性對照品溶液的制備 取2.2.2 項下制備的第1 份陰性對照樣品9 g，照供試品溶液的制備方法制成陰性對照品溶液。

2.2.3.3 對照藥材溶液的制備 取當歸對照藥材1 g，照供試品溶液的制備方法制成對照藥材溶液。

2.2.3.4 薄層色譜法試驗 參照中國藥典2010 年版一部附錄ⅥB，吸取上述3 種溶液各5 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷－醋酸乙酯(8∶2)為展開劑，展開距離15 cm，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。

2.2.4 乳香薄層色譜鑒別

2.2.4.1 供試品溶液的制備 取2.2.1 項下制備的樣品9 g，剪碎，加硅藻土6 g，研勻，置具塞錐形瓶中，加乙醚30 ml，放置60 min，間歇振搖3 次，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醚1 ml 使溶解，作為供試品溶液。

2.2.4.2 陰性對照品溶液的制備 取2.2.2 項下制備的第2 份陰性對照品9 g，照供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。

2.2.4.3 對照藥材溶液制備 取乳香對照藥材1 g，照供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。

2.2.4.4 照薄層色譜法試驗 參照中國藥典2010 年版一部附錄ⅥB，吸取上述三種溶液各5 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯－醋酸乙酯(19∶1)為展開劑，展開距離15 cm，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105 °C 加熱至斑點顯色清晰。

2.2.5 沒藥薄層色譜鑒別

2.2.5.1 供試品溶液的制備 取2.2.1 項下制備的樣品9 g，剪碎，加硅藻土6 g，研勻，置具塞錐形瓶中，加乙醚30 ml，放置60 min，間歇振搖3 次，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醚1 ml 使溶解，作為供試品溶液。

2.2.5.2 陰性對照品溶液的制備 取2.2.2 項下制備的第3 份陰性對照品9 g，照供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。

2.2.5.3 對照藥材溶液制備 取沒藥對照藥材1 g，照供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。

2.2.5.4 薄層色譜法試驗 參照中國藥典2010 年版一部附錄ⅥB，吸取上述3 種溶液各5 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷－醋酸乙酯(8∶2)為展開劑，展開距離15 cm，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105 °C 加熱至斑點顯色清晰。

3 結(jié)果

3.1 顯微鑒別結(jié)果 (1)土鱉蟲:體壁碎片黃色或棕紅色，有圓形毛窩，直徑8 ～24 μm，有的具長短不一的剛毛;(2)熟大黃:草酸鈣簇晶大，直徑60 ～140 μm;(3)續(xù)斷:草酸鈣簇晶，直徑約45 μm，存在于淡棕色皺縮的薄壁細胞中，常數(shù)個排列成行;(4)紅花:花粉粒類圓形或橢圓形，直徑43 ～46 μm，外壁具短刺和點狀雕紋，有3 個萌發(fā)孔;(5)川芎:木栓細胞深黃棕色，表面觀呈多角形，微波狀彎曲。

3.2 薄層色譜鑒別結(jié)果

3.2.1 當歸 供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點(Rf 值為0.58 和0.66)，陰性對照品相應(yīng)位置上無熒光斑點(圖1)。

3.2.2 乳香 供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(Rf 值為0.25、0.42、0.57 和0.75)。陰性對照品相應(yīng)位置上無斑點(圖2)。

3.2.3 沒藥 供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(Rf 值為0.33)。陰性對照品相應(yīng)位置上無斑點(圖3)。

4 討論

4.1 顯微鑒別 土鱉蟲的體壁、熟大黃、續(xù)斷的草酸鈣簇晶、紅花的花粉粒、川芎的木栓細胞各具顯著的顯微特征，在顯微鏡下易于識別。顯微鑒別法可作為上述五味藥材在本方中的定性鑒別方法。

4.2 薄層色譜鑒別

4.2.1 提取條件的選擇 文獻［1］報道的當歸供試品溶液的制備較為復(fù)雜，耗時較長。筆者簡化了當歸供試品溶液的制備，鑒別結(jié)果良好。乳香中含有約15 種萜類等揮發(fā)性成分及乳香酸等不揮發(fā)性成分［2－4］，沒藥亦含有約45 種揮發(fā)性成分［4］，二者均選用乙醚作為溶劑萃取。因乙醚極易揮發(fā)，無論采用回流提取，還是超聲提取的方法均對環(huán)境及操作者有很大的危害，故筆者采用“供試品中加入乙醚放置60 min，間歇振搖3 次，濾過”的提取方法。

4.2.2 展開劑的選擇 在沒藥的薄層色譜研究中，曾以苯－醋酸乙酯(19∶1)為展開劑［5］，薄層色譜顯示斑點重疊，展開效果不理想。換用環(huán)己烷－醋酸乙酯(8∶2)后，薄層色譜主斑點分離較好。故采用環(huán)己烷－醋酸乙酯(8∶2)作為沒藥薄層色譜鑒別的展開劑。

4.2.3 乳香、沒藥、當歸3 味藥材的薄層色譜試驗結(jié)果 斑點集中、層次清晰、重復(fù)性好，空白無干擾，具有可操作性，可作為上述3 味藥材在本方中的定性鑒別方法。

［1］ 楊曄瓊，趙俊蘋. 開郁舒肝丸中當歸薄層色譜鑒別的研究［J］. 北方藥學(xué)，2010，10(3):11

［2］ Ahmed Al－Harrasi，Salim Al－Saidi. Phytochemical Analysis of the Essential Oil from Botanically Certified Oleogum Resin of Boswellia sacra(Omani Luban)［J］. Molecules，2008，13(9):2181－2189.

［3］ Mathe C，Culioli G，Archier P，et al. High－Performance Liquid Chromatographic Analysis of Triterpenoids in Commercial Frankincense［J］. Chromatographia，2004，60(9/10):493－499.

［4］ 王艷艷，王團結(jié). 乳香、沒藥藥對配伍揮發(fā)油成分的GC－MS分析［J］. 現(xiàn)代中藥研究與實踐，2011，25(2):31－34.

［5］ 王蘇會，王 瑞. 消骨增貼中乳香、沒藥的薄層鑒別［J］. 中國醫(yī)藥導(dǎo)刊，2009，11(1):151－152.