欒新紅，郭英振，姜懷志，張世偉，郭 丹，于立輝，趙 鵬

（1．沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧 沈陽110866；2．吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，吉林 長春130118；3．遼寧省畜牧科學(xué)研究院，遼寧 遼陽111000；4．甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，甘肅 蘭州730070）

遼寧絨山羊具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值，尤其是山羊絨，因其纖維細(xì)而柔軟、輕而保暖，廣受人們歡迎。但山羊絨的生長呈季節(jié)性，產(chǎn)量較低，遠(yuǎn)不能滿足市場需要，而且人工剪羊毛也消耗了大量的勞動力。為提高山羊絨的產(chǎn)量和品質(zhì)、解決人工剪羊毛所帶來的勞動量繁重等缺點(diǎn)，國內(nèi)外學(xué)者研究用生物或化學(xué)脫毛劑來進(jìn)行脫毛，目前這方面的藥物有小鼠表皮生長因子（mEGF）、含羞草氨酸（Mimosine）、乙硫氨酸（Ethionine）、環(huán)磷酰胺（Cyclophosphamide）等［1］。環(huán)磷酰胺作為一種比較理想的脫毛用藥，從20世紀(jì)70年代開始，國、內(nèi)外就有專家對其進(jìn)行了研究，并已獲得成效［2－3］。但是，藥物脫毛后羊絨的再生長是這類藥物脫毛劑在生產(chǎn)應(yīng)用過程中面臨的一個(gè)實(shí)際問題。有研究［4－5］表明，梳絨后于動物頸部皮下埋植褪黑素可以誘導(dǎo)當(dāng)年絨毛再生長，從而增加羊絨產(chǎn)量。但目前尚未見環(huán)磷酰胺和裉黑志聯(lián)合使用以實(shí)現(xiàn)有效脫毛及增產(chǎn)效果的報(bào)道，為此，本研究著重探討這兩種藥物組合應(yīng)用對遼寧絨山羊血清激素及酶水平的影響，旨為實(shí)踐應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 試驗(yàn)動物及分組 4歲雌性健康遼寧絨山羊12只 （吉林省絨山羊種羊繁育中心提供），隨機(jī)分為4組，即對照組和試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組，每組3只。其中試驗(yàn)Ⅰ和Ⅱ組埋植褪黑素（每只60mg）；試驗(yàn)Ⅱ和Ⅲ組于試驗(yàn)開始后第30天肌肉注射環(huán)磷酰胺（26mg·kg－1［2］）。所有試驗(yàn)羊均維持自然光照，采取舍飼和放牧相結(jié)合，以放牧為主的飼養(yǎng)模式。

1．2 指標(biāo)測定及數(shù)據(jù)處理 分別于試驗(yàn)開始后0、30和50d采集血樣，制備血清，采用全自動生化分析儀及酶標(biāo)儀檢測血清中酶和激素水平。其中血清酶測定試劑盒選自中生北控生物科技股份有限公司，酶免法試劑盒選自上海勁馬生物科技有限公司。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS 13．0軟件進(jìn)行方差分析，運(yùn)用LSD法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2．1 遼寧絨山羊血清酶水平的檢測 肌酸磷酸激酶（CPK）含量，對照組加入或注射藥后不同采樣時(shí)間之間差異顯著（P＜0．05）（表1）；試驗(yàn)Ⅱ組50d時(shí)與0和30d比較均差異顯著（P＜0．05）；試驗(yàn)Ⅲ組30d與0和50d比較均差異顯著（P＜0．05）。α－淀粉酶（A－AMY）含量，對照組、試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組組內(nèi)3次采樣所得值之間均差異顯著（P＜0．05）；試驗(yàn)Ⅲ組50d與0和30d間均差異顯著（P＜0．05）；試驗(yàn)全期各組均值呈隨時(shí)間增加而上升的趨勢。堿性磷酸酶（ALP）含量，對照組3次采樣所得值之間均差異顯著（P＜0．05）；30d時(shí)對照組與試驗(yàn)Ⅲ組差異顯著（P＜0．05）；其余各組內(nèi)及組間差異不顯著（P＞0．05）；對照組、試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組呈隨時(shí)間而升高的趨勢，試驗(yàn)Ⅲ組呈先升高后降低趨勢。

2．2 遼寧絨山羊血清激素水平的檢測 血清中促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）水平，試驗(yàn)全期各組間及組內(nèi)差異均不顯著（P＞0．05）（表2）；各試驗(yàn)組50d時(shí)均降低，尤其是試驗(yàn)組Ⅰ和Ⅱ更為明顯。皮質(zhì)醇（Cor）及EGF水平，試驗(yàn)全期各組間及組內(nèi)差異不顯著（P＞0．05）。試驗(yàn)全期各組褪黑素（MT）含量均呈隨時(shí)間而降低的趨勢，各處理組組間差異均不顯著（P＞0．05）；對照組、試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組組內(nèi)差異也均不顯著（P＞0．05），試驗(yàn)Ⅱ組50d與0和30 d比較均差異顯著（P＜0．05）。

表1 藥物脫絨對血清酶含量的影響Table 1 Effects of depilation by drugs on serum enzyme content U·L－1

表2 藥物脫絨對血清激素含量的影響Table 2 Effects of depilation by drugs on serum hormone levels U·L－1

3 討論

3．1 藥物脫絨對遼寧絨山羊血清酶水平的影響 肌酸激酶與細(xì)胞內(nèi)能量運(yùn)轉(zhuǎn)、肌肉收縮、腺嘌呤核苷三磷酸再生有著直接的關(guān)系。結(jié)果顯示，30和50d時(shí)，試驗(yàn)Ⅰ組肌酸磷酸激酶含量水平降低，試驗(yàn)Ⅲ組肌酸磷酸激酶含量升高，說明環(huán)磷酰胺可能具有提升肌酸磷酸激酶含量的作用，而褪黑素則具有降低其含量的作用。有研究［2］表明，長期給予環(huán)磷酰胺可能導(dǎo)致出血性膀胱炎，骨髓抑制進(jìn)而發(fā)展為造血功能降低，而這兩種疾病的重要指標(biāo)之一即為肌酸磷酸激酶含量。本研究顯示，試驗(yàn)Ⅱ組50 d時(shí)肌酸磷酸激酶含量升高，但最終含量低于試驗(yàn)Ⅲ組，這說明褪黑素可能通過調(diào)節(jié)體內(nèi)各系統(tǒng)的生理功能對機(jī)體起保護(hù)作用，降低環(huán)磷酰胺的副作用。

埋植褪黑素或注射環(huán)磷酰胺都有提高血清α－淀粉酶含量的作用。30和50d時(shí)，試驗(yàn)Ⅲ組與其他各組差異顯著（P＜0．05），說明環(huán)磷酰胺對血清α－淀粉酶含量有顯著的增強(qiáng)作用。α－淀粉酶能催化水解直鏈淀粉，生成α－麥芽糖和葡萄糖［6－7］，其含量的提高有利于機(jī)體更加充分地吸收營養(yǎng)物質(zhì)。

堿性磷酸酶催化磷酸酯類化合物水解釋放磷酸，與骨骼的代謝密切相關(guān)［8－9］。本研究中除試驗(yàn)Ⅲ組堿性磷酸酶含量先升高后降低外，其余各組均呈升高趨勢，這說明褪黑素具有升高堿性磷酸酶含量的作用，而環(huán)磷酰胺具有降低堿性磷酸酶含量的作用，二者共同作用時(shí)褪黑素的升高作用強(qiáng)于環(huán)磷酰胺的降低作用。

3．2 藥物脫絨對遼寧絨山羊血清激素水平的影響 促腎上腺皮質(zhì)激素和皮質(zhì)醇均屬應(yīng)激激素，其水平高低反映機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)強(qiáng)度，過強(qiáng)的應(yīng)激反應(yīng)會對機(jī)體造成一定程度的損傷。50d時(shí)（脫毛時(shí)）的結(jié)果可以看出，埋植褪黑素試驗(yàn)組Ⅰ和Ⅱ的促腎上腺皮質(zhì)激素含量明顯降低，均低于對照組，尤其是試驗(yàn)I組。表2中對照組皮質(zhì)醇含量在3個(gè)時(shí)間點(diǎn)表現(xiàn)為先降低后升高的趨勢，而試驗(yàn)Ⅰ和Ⅱ組均表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢，試驗(yàn)Ⅲ組則始終表現(xiàn)為升高的趨勢。綜上分析，埋植褪黑素可以在一定程度上緩解應(yīng)激反應(yīng)，包括采樣和脫毛過程的刺激所引起的應(yīng)激。試驗(yàn)Ⅲ組第3次采樣時(shí)，皮質(zhì)醇濃度均較其他試驗(yàn)組偏高，說明單純注射環(huán)磷酰胺可能會導(dǎo)致動物應(yīng)激、刺激動物皮質(zhì)醇的分泌，從而使其血清皮質(zhì)醇濃度升高。因此，利用環(huán)磷酰胺作為脫毛劑，埋植褪黑素可以在一定程度上保護(hù)機(jī)體，降低應(yīng)激反應(yīng)帶來的損害。

表皮生長因子對皮膚的發(fā)生，結(jié)構(gòu)功能的維持以及皮膚衍生物的發(fā)育與功能具有重要作用［10－11］。其對羊毛生長具有抑制作用，表現(xiàn)為低劑量時(shí)毛球稍微變小，纖維表皮層形成暫時(shí)性障礙；大劑量時(shí)毛囊退化，羊毛纖維根端扭曲變形，最后呈錐形脫落［12－13］。本研究中，試驗(yàn)全期各組組間及組內(nèi)差異不顯著，試驗(yàn)Ⅰ和Ⅱ組（埋植褪黑素）呈降低趨勢，說明褪黑素具有降低表皮生長因子濃度的作用。試驗(yàn)Ⅲ組略有升高，但變化不顯著，這可能是因?yàn)榄h(huán)磷酰胺具有脫毛作用，而高濃度的表皮生長因子對羊毛生長具有抑制作用，表現(xiàn)為羊毛纖維根端扭曲變形，最后呈錐形脫落［10－11］。

長日照時(shí)血液褪黑素濃度相對較低，短日照期間褪黑素升高［14－16］。本研究結(jié)果表明，遼寧絨山羊血液中褪黑素濃度受季節(jié)影響，從短日照向長日照過渡中，血液褪黑素濃度逐漸降低，埋植褪黑素可能會干擾此規(guī)律，試驗(yàn)Ⅰ和Ⅱ組血清褪黑素濃度先維持在較高水平，然后略微降低但仍高于對照組，這是由于動物機(jī)體為維持體內(nèi)激素系統(tǒng)平衡啟動了負(fù)反饋調(diào)控機(jī)制，使?jié)舛染S持在正常生理范圍之內(nèi)，這與岳春旺等［17］的試驗(yàn)結(jié)果一致。本研究中對照組與各試驗(yàn)組褪黑素濃度呈下降趨勢，且各組組間差異不顯著，兩種藥物共同處理的試驗(yàn)Ⅱ組的褪黑素含量下降程度高于褪黑素單獨(dú)處理的試驗(yàn)Ⅰ組，這說明環(huán)磷酰胺具有降低血清褪黑素量的作用。

4 結(jié)論

褪黑素、環(huán)磷酰胺單獨(dú)或者共同作用于遼寧絨山羊，可對絨山羊血清激素及酶產(chǎn)生一定的影響。埋植褪黑素可以在一定程度上降低利用環(huán)磷酰胺脫毛帶來的應(yīng)激反應(yīng)。

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