結(jié)核分枝桿菌抗體檢測試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制與臨床研究概述

陳保文 都偉欣 楊蕾 王國治

Mtb抗體檢測試劑主要用于檢測人血清或血漿中是否含有Mtb抗體，是結(jié)核病的一種臨床輔助診斷方法。目前，我國Mtb抗體檢測試劑的檢測技術(shù)多數(shù)采用膠體金法和酶聯(lián)免疫法，筆者主要針對這兩種檢測技術(shù)就Mtb抗體檢測試劑的主要原材料、生產(chǎn)工藝、產(chǎn)品質(zhì)量控制，以及臨床研究的技術(shù)要求進(jìn)行概述，為Mtb抗體檢測試劑的生產(chǎn)、研制單位及臨床評價(jià)單位提供參考。其他檢測技術(shù)（如發(fā)光免疫法、蛋白芯片法等）的Mtb抗體檢測試劑可加以借鑒。

原材料

一、主要生物原料

主要生物原料包括各種Mtb天然抗原、Mtb重組抗原、單克隆抗體、多克隆抗體等。這類原料主要用于標(biāo)記膠體金、包被硝酸纖維膜、制備質(zhì)控線等或用于包被酶標(biāo)反應(yīng)板、標(biāo)記相關(guān)酶（如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等）、中和反應(yīng)用抗原或抗體、制備校準(zhǔn)品（標(biāo)準(zhǔn)品）等。

主要生物原料若為企業(yè)自己生產(chǎn)，應(yīng)簡述其制備程序，其中Mtb重組抗原應(yīng)提供工程菌的構(gòu)建、工作種子批的制備，生產(chǎn)工藝條件優(yōu)化參數(shù)的建立等各項(xiàng)資料，以確保工藝相對穩(wěn)定；若購買，其供應(yīng)商要求相對固定，不能隨意變更供應(yīng)商。如生產(chǎn)工藝或供應(yīng)商等有變更，應(yīng)依據(jù)國家相關(guān)法規(guī)的要求進(jìn)行變更申請。

主要生物原料的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目一般包括：外觀、純度和相對分子質(zhì)量（十二烷基硫酸鈉－聚丙烯酰胺凝膠電泳法和高效液相法等）、蛋白質(zhì)濃度（Lowry法、280nm光吸收法和雙縮脲法等）、效價(jià)（一般根據(jù)蛋白質(zhì)濃度通過倍比稀釋法進(jìn)行）和功能性實(shí)驗(yàn)（至少應(yīng)有陽性參考品符合率、陰性參考品符合率和最低檢出限），應(yīng)符合企業(yè)生產(chǎn)規(guī)定的要求。

二、生物輔料

生物輔料一般指在生產(chǎn)過程中作為蛋白保護(hù)劑用途的一類生物原料，主要包括小牛血清、山羊血清、牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）和酪蛋白等。其中牛血清或羊血清的檢定項(xiàng)目至少應(yīng)包括：外觀、無菌試驗(yàn)、總蛋白含量和球蛋白含量等，BSA的檢定項(xiàng)目至少應(yīng)包括：外觀、溶解性、總蛋白含量、總蛋白中的BSA含量、BSA的凈含量等，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合2000年版的《中國生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》［1］規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)要求。此外，這些生物輔料還應(yīng)進(jìn)行功能性實(shí)驗(yàn)，即以其為原料配制一定濃度的稀釋液作為樣品進(jìn)行測定，均不能出現(xiàn)非特異性反應(yīng)。

標(biāo)記用酶若為辣根過氧化物酶，酶的純度RZ值（德文Reinheit Zahl）應(yīng)不低于3．0［2］。

三、化學(xué)原材料

化學(xué)原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)［1］分析純級別進(jìn)行檢驗(yàn)，主要的檢測指標(biāo)包括：外觀、一般鹽類檢測、溶液pH值、溶解情況、干燥失重、熾灼殘?jiān)?。在購入時，生產(chǎn)商必須提供該批次化學(xué)原材料的質(zhì)量保證材料和質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告。

四、其他物料

（一）針對酶聯(lián)免疫法Mtb抗體檢測試劑

應(yīng)對酶標(biāo)板進(jìn)行外觀、吸附能力和精密性等的檢測。吸附能力和精密性應(yīng)采用合適的方法進(jìn)行檢驗(yàn)，一般用一定濃度的正常人IgG包被板條，再用一定濃度的抗人IgG酶結(jié)合物吸附，通過顯色反應(yīng)，使用酶標(biāo)儀讀數(shù)，計(jì)算變異系數(shù)（coefficient of variation，CV），一般規(guī)定CV應(yīng) 不 高 于10%。

各液體試劑應(yīng)有相應(yīng)的裝量瓶，并建立相應(yīng)的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，如裝量瓶的規(guī)格、裝量瓶的顏色、瓶蓋的顏色等。一般規(guī)定裝量應(yīng)不低于標(biāo)示量。

（二）針對膠體金法Mtb抗體檢測試劑

硝酸纖維素膜應(yīng)具有外觀、尺寸、厚度、孔徑大小、毛細(xì)遷移速度等要求；玻璃纖維或聚酯纖維膜應(yīng)具有外觀、厚度、毛細(xì)遷移速度、重量等要求；濾紙應(yīng)具有外觀、厚度、吸水速度、重量、尺寸等要求；塑料墊片應(yīng)具有厚度、硬度、尺寸、黏性等要求。其偏差范圍應(yīng)達(dá)到企業(yè)生產(chǎn)規(guī)定的要求。

（三）其他材料

包括試劑瓶標(biāo)簽、粘膠紙、鋁箔袋、襯墊、可密封塑料袋、說明書、干燥劑和包裝外盒等，應(yīng)參照國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》［3］和《醫(yī)療器械說明書、標(biāo)簽和包裝標(biāo)識管理規(guī)定》［4］建立相應(yīng)質(zhì)量控制。

生產(chǎn)工藝

一、酶聯(lián)免疫法Mtb抗體檢測試劑半成品的制備程序

主要包括酶標(biāo)記抗體的制備（采用常規(guī)過碘酸鈉－乙二醇法或其他適宜方法進(jìn)行酶標(biāo)記）；包被抗原濃度和酶標(biāo)記抗體工作濃度的選定（通常采用方陣滴定法）；包被抗原板的制備（采用最佳包被濃度包被微孔板孔，經(jīng)封閉、干燥和密封等處理后，于2～8℃保存）；陰性陽性對照（若選用人或動物的血清或血漿，一般經(jīng)60℃、1h進(jìn)行處理后，除菌過濾，于2～8℃保存）、樣品稀釋液、洗滌液、酶結(jié)合物或酶稀釋液、底物或底物緩沖液、終止液等各種工作液的配制。特別應(yīng)注意的是，若陰性、陽性對照或其他液體組分涉及生物安全性問題，制備時應(yīng)在相應(yīng)的生物安全實(shí)驗(yàn)室完成。

應(yīng)對包被抗原板按半成品質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行抽樣檢定，并應(yīng)符合相應(yīng)項(xiàng)的規(guī)定要求。各種工作液應(yīng)有明確的配方及嚴(yán)格的配制程序，其質(zhì)量控制主要包括酶結(jié)合物的功能性實(shí)驗(yàn)及穩(wěn)定性；各種溶液的外觀、pH值等；酶作用底物應(yīng)測定在無相應(yīng)酶的情況下自身顯色的情況，并制定合理的限定指標(biāo)；終止液應(yīng)對其終止酶促反應(yīng)的能力進(jìn)行測定；檢測過程中加入樣本后的反應(yīng)時間、加入酶結(jié)合物后的反應(yīng)時間，以及加入顯色液后的顯色時間應(yīng)進(jìn)行優(yōu)化，并制定合理的限定指標(biāo)。對于定量檢測試劑，其標(biāo)準(zhǔn)品（或校準(zhǔn)品）溶液應(yīng)具有量值溯源性。

二、膠體金法Mtb抗體檢測試劑半成品的制備程序

主要包括膠體金及膠體金標(biāo)志物的制備（采用枸櫞酸三鈉還原法或其他方法制備膠體金和膠體金標(biāo)志物）；膠體金標(biāo)志物、包被抗原或抗體工作濃度的選定（通常采用方陣滴定法）；膠體金標(biāo)志物的包被；在硝酸纖維素膜上制備檢測線和質(zhì)控線；貼膜、切割及組裝；陰性、陽性對照（若選用人或動物的血清或血漿，一般經(jīng)60℃、1h進(jìn)行處理后，除菌過濾，于2～8℃保存）及樣品稀釋液、洗滌液、封閉液等各種工作液的配制。特別應(yīng)注意的是，若陰性、陽性對照或其他液體組分涉及生物安全性問題，制備時應(yīng)在相應(yīng)的生物安全實(shí)驗(yàn)室完成。

應(yīng)對膠體金及膠體金標(biāo)志物進(jìn)行外觀、pH值、膠體金顆粒大小、粒徑的均一性，以及最大吸收波長等的檢測；檢測線和質(zhì)控線應(yīng)具有間隔距離要求；切割的膜條應(yīng)有寬度要求。

三、成品的分批、分裝和包裝

按照文獻(xiàn)［2］中“生物制品分批規(guī)程”“生物制品分裝和凍干規(guī)程”及“生物制品包裝規(guī)程”進(jìn)行分批、分裝與凍干和包裝。

質(zhì)量控制

一、半成品質(zhì)量控制

以國家參考品或企業(yè)參考品進(jìn)行半成品質(zhì)量控制。檢定項(xiàng)目至少應(yīng)包括陰性參考品符合率、陽性參考品符合率、精密性（或重復(fù)性）和最低檢出限。

（一）陰性參考品

至少采用5份來自非結(jié)核病志愿者（包括健康人和至少1份非結(jié)核病的其他肺部疾病患者）的血清或血漿。規(guī)定：檢測結(jié)果應(yīng)全部呈陰性或允許1份呈假陽性。

（二）陽性參考品

至少采用5份來自結(jié)核病患者的血清或血漿，應(yīng)選擇抗體效價(jià)分別呈強(qiáng)陽性、中陽性、弱陽性和臨界的樣本。規(guī)定：檢測結(jié)果應(yīng)全部呈陽性或允許1份呈假陰性。

（三）精密性（或重復(fù)性）參考品

至少采用1份來自結(jié)核病患者的血清或血漿，盡可能選擇抗體效價(jià)呈弱陽性的樣本。對于酶聯(lián)免疫檢測試劑，規(guī)定CV（%）應(yīng)不高于15%（n＝10）；對于膠體金檢測試劑，規(guī)定檢測結(jié)果應(yīng)全部呈陽性，且顯色一致（n≥5）。

（四）最低檢出限參考品

采用1份來自結(jié)核病患者的血清或血漿，盡可能選擇檢測結(jié)果呈強(qiáng)陽性的樣本，然后用適宜的稀釋液進(jìn)行倍比系列稀釋，至少含3個稀釋度。規(guī)定：某一稀釋度的樣品應(yīng)呈陽性，某一稀釋度的樣品可陰可陽，某一稀釋度的樣品應(yīng)呈陰性。

二、成品質(zhì)量控制

每一批酶聯(lián)免疫檢測試劑報(bào)批批量至少為10 000人份，每一批膠體金檢測試劑報(bào)批批量至少為3000人份。一般使用國家參考品或經(jīng)國家參考品標(biāo)化的企業(yè)參考品進(jìn)行檢驗(yàn)。若使用企業(yè)參考品進(jìn)行質(zhì)量控制，應(yīng)提供企業(yè)參考品制備和標(biāo)化的技術(shù)資料，其中制備部分應(yīng)提供各份樣品來源的詳細(xì)材料，陽性樣品應(yīng)有涂片和培養(yǎng)的檢測結(jié)果，應(yīng)提供分裝規(guī)格和分裝數(shù)量的數(shù)據(jù)；標(biāo)化部分應(yīng)提供候選樣品的效價(jià)測定方法和測定結(jié)果等。

成品質(zhì)量控制技術(shù)指標(biāo)的要求應(yīng)包括以下幾點(diǎn)：

（一）物理檢查

1．酶聯(lián)檢測試劑：應(yīng)對試劑盒外觀、試劑盒中各液體組分（如陰陽性對照、樣品稀釋液、洗滌液、酶結(jié)合物或酶稀釋液、底物液、終止液等）及酶標(biāo)板外觀等進(jìn)行檢查，應(yīng)符合相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

2．膠體金檢測試劑：應(yīng)對試劑盒外觀、檢測板、試劑盒中各液體組分（如陰陽性對照、樣品稀釋液、洗滌液、封閉液等）、液體移行速度及膜條寬度等進(jìn)行檢查，應(yīng)符合相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

（二）功能性檢測

1．陰性參考品：采用10～20份來自非結(jié)核病志愿者（包括健康人和至少1份非結(jié)核病的其他肺部疾病患者）的血清或血漿。規(guī)定：檢測結(jié)果應(yīng)全部呈陰性或允許1份呈假陽性。

2．陽性參考品：采用10～20份來自結(jié)核病患者的血清或血漿，應(yīng)選擇抗體效價(jià)分別呈強(qiáng)陽性、中陽性、弱陽性和臨界的樣本，還需考慮選擇來自菌陰和菌陽、不同病程、肺內(nèi)和肺外結(jié)核等患者的樣本。規(guī)定：檢測結(jié)果應(yīng)全部呈陽性或允許1份呈假陰性。

3．精密性（或重復(fù)性）參考品：至少采用1份來自結(jié)核病患者的血清或血漿，盡可能選擇抗體效價(jià)呈弱陽性的樣本。對于酶聯(lián)免疫檢測試劑，規(guī)定CV（%）應(yīng)不高于15%（n＝10）；對于膠體金檢測試劑，規(guī)定檢測結(jié)果應(yīng)全部呈陽性，且顯色一致（n≥5）。

4．最低檢出限參考品：采用1份來自結(jié)核病患者的血清或血漿，盡可能選擇檢測結(jié)果呈強(qiáng)陽性的樣本，然后用適宜的稀釋液進(jìn)行倍比系列稀釋，至少含3個稀釋度。規(guī)定：某一稀釋度的樣品應(yīng)呈陽性，某一稀釋度的樣品可陰可陽，某一稀釋度的樣品應(yīng)呈陰性。

（三）穩(wěn)定性試驗(yàn)

可以用熱穩(wěn)定性試驗(yàn)來替代，溫度一般選 （37±1）℃，放置時間可根據(jù)試劑盒的有效期而定，一般有效期6個月的產(chǎn)品37℃加熱至少3d。有效期更長的產(chǎn)品應(yīng)根據(jù)企業(yè)加速試驗(yàn)研究結(jié)果視情況而定。

臨床研究

一、基本原則

（一）基本要求

Mtb抗體檢測試劑一般采用血清、血漿、腦脊液、胸腔、腹腔積液等為研究樣本，需征求受試者的同意，并簽署知情同意書。

（二）臨床研究單位及人員的要求

應(yīng)為從事人類健康或疾病預(yù)防、診斷、治療以及流行病學(xué)調(diào)查等活動的法人單位，而且進(jìn)行研究的產(chǎn)品應(yīng)該在其所從事的專業(yè)范圍以內(nèi)。必須具有相應(yīng)專業(yè)的技術(shù)人員以及與研究試劑相適應(yīng)的儀器設(shè)備。臨床研究一般應(yīng)在至少2家以上（含2家）省級醫(yī)療衛(wèi)生單位完成。注冊申請人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)及其臨床使用目的，綜合不同地區(qū)人種、流行病學(xué)背景、病原微生物的特性等因素選擇研究單位。在臨床研究全過程中，注冊申請人應(yīng)考慮吸收流行病學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等方面專業(yè)人員（或知識），以保證研究方法科學(xué)、合理［5］。

二、臨床研究設(shè)計(jì)原則

（一）結(jié)核病診斷標(biāo)準(zhǔn)

依據(jù) WS288－2008《肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)》［6］進(jìn)行肺結(jié)核的診斷及鑒別。

（二）研究對象的選擇

研究對象包括2組：（1）隨機(jī)選用就診懷疑結(jié)核病的患者，按文獻(xiàn)［6］進(jìn)行診斷；（2）正常人群。臨床評價(jià)結(jié)束后，將（1）中入組人員分為以下兩類人群進(jìn)行數(shù)據(jù)處理：①結(jié)核病患者，包括菌陰和菌陽、不同病程、肺外結(jié)核等患者；② 非結(jié)核病患者，包括易與結(jié)核病相混淆的患者（如肺癌、細(xì)菌性肺炎、肺真菌病等）以及其他患者（如哮喘、氣管炎等）。最終數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析時，將 ②和（2）中人群合并作為非結(jié)核病的對照組，而①則作為結(jié)核病患者組。

（三）樣本量

依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）》［7］第十二條規(guī)定，Mtb抗體檢測試劑屬第三類產(chǎn)品?！扼w外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則》［5］中規(guī)定一般情況下第三類產(chǎn)品的臨床研究的總樣本數(shù)至少為1000例，在符合指導(dǎo)原則有關(guān)最低樣本量要求的前提下，還應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。

（四）對比試劑

應(yīng)選擇已批準(zhǔn)上市且臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的產(chǎn)品，同時應(yīng)充分了解所選擇產(chǎn)品的技術(shù)信息，包括方法學(xué)，臨床使用目的和范圍，主要性能指標(biāo)、標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)品的溯源情況、推薦的參考值（參考范圍）等，以便對試驗(yàn)結(jié)果能夠進(jìn)行科學(xué)的分析。

（五）實(shí)驗(yàn)方法

1．痰涂片：參照文獻(xiàn)［6］和［8］，以臨床研究單位常規(guī)的痰涂片方法進(jìn)行操作。

2．痰培養(yǎng)：參照文獻(xiàn)［6］和［8］，將收集的痰標(biāo)本采用臨床研究單位常用的痰標(biāo)本“前處理”方法進(jìn)行液化，然后接種改良羅氏培養(yǎng)基或者也可聯(lián)合采用快速培養(yǎng)法。

3．抗體檢測：嚴(yán)格按Mtb抗體檢測試劑中所附的說明書進(jìn)行操作。

4．臨床診斷：依據(jù)文獻(xiàn)［6］進(jìn)行確診。

（六）實(shí)驗(yàn)結(jié)果確認(rèn)

1．實(shí)驗(yàn)結(jié)果分類：具體見表1。

2．實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定：（1）A類：細(xì)菌學(xué)及抗體檢查均為陽性，臨床確診為結(jié)核病，抗體檢測結(jié)果判定為真陽性。（2）B類：細(xì)菌學(xué)檢查為陽性，抗體檢查為陰性，臨床確診為結(jié)核病，抗體檢測結(jié)果判定為假陰性。（3）C類：細(xì)菌學(xué)檢查為陰性，抗體檢查為陽性，臨床確診為結(jié)核病，抗體檢測結(jié)果判定為真陽性。（4）D類：細(xì)菌學(xué)檢查為陰性，抗體檢查為陰性，臨床確診為結(jié)核病，抗體檢測結(jié)果判定為假陰性。（5）E類：細(xì)菌學(xué)檢查為陰性，抗體檢查為陽性，臨床確診為非結(jié)核病，抗體檢測結(jié)果判定為假陽性。（6）F類：細(xì)菌學(xué)檢查為陰性，抗體檢查為陰性，臨床確診為非結(jié)核病，抗體檢測結(jié)果判定為真陰性。

表1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分類

3．特異度和靈敏度的計(jì)算：被考核的 Mtb抗體檢測試劑的特異度（%）為F／（E＋F），靈敏度（%）為（A＋C）／（A＋B＋C＋D）。

三、關(guān)于臨床研究報(bào)告的撰寫

臨床研究報(bào)告的格式及內(nèi)容應(yīng)包括以下內(nèi)容。

（一）首篇

首篇是每份臨床研究報(bào)告的第一部分，所有單個的臨床研究報(bào)告均應(yīng)包含該部分內(nèi)容。主要有封面標(biāo)題、目錄、研究摘要、試驗(yàn)主要研究人員的姓名、單位和在研究中的職責(zé)及其簡歷（列于附件中）、縮略語等。

（二）正文內(nèi)容和報(bào)告格式

1．基本內(nèi)容：應(yīng)包括引言、研究目的、試驗(yàn)管理、試驗(yàn)設(shè)計(jì)、臨床研究結(jié)果及分析、討論和結(jié)論等。其中試驗(yàn)設(shè)計(jì)中應(yīng)包括：樣本量及樣本量確定的依據(jù)；樣本選擇依據(jù)、入選標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn)和剔除標(biāo)準(zhǔn)；樣本采集、保存、運(yùn)輸方法等；金標(biāo)準(zhǔn)或?qū)Ρ仍囼?yàn)產(chǎn)品的確立；臨床研究用所有產(chǎn)品的名稱、規(guī)格、來源、批號、有效期及保存條件，對比試驗(yàn)產(chǎn)品的注冊情況；質(zhì)量控制方法；臨床研究數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析方法；研究過程中方案的修改。

2．有關(guān)臨床研究中特別情況的說明。

3．附件：應(yīng)包括臨床研究中所采用的所有診斷試劑產(chǎn)品的使用說明書、臨床研究中的所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)，以及主要參考文獻(xiàn)等。

討 論

WHO于2011年7月20日公布的一項(xiàng)政策建議中指出，使用目前市面上商業(yè)性血液（血清學(xué)）檢測手段診斷活動性結(jié)核病，常常導(dǎo)致誤診和不當(dāng)治療，進(jìn)而損害公眾健康。WHO敦促各國采用其推薦的準(zhǔn)確的微生物或分子檢測方法，禁止使用不準(zhǔn)確的和未經(jīng)批準(zhǔn)的血液檢測方法［9］。

針對WHO提出的這項(xiàng)建議，國家食品藥品監(jiān)督管理局于2012年4月16日發(fā)布了進(jìn)一步加強(qiáng)結(jié)核病血液檢測試劑有關(guān)事宜通知：（1）結(jié)核病血液檢測試劑僅用于結(jié)核病臨床輔助診斷。（2）按照《體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）》（國食藥監(jiān)械［2007］229號）的規(guī)定，與Mtb檢測相關(guān)的試劑屬于第三類體外診斷試劑。參見文獻(xiàn)［10］。

我國是結(jié)核病發(fā)病大國，位居世界第二。Mtb抗體檢測試劑盡管特異度和靈敏度均存在一定局限，但因其具有簡便、快速的特點(diǎn)而倍受青睞，尤其適用于我國條件較差的基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)。鑒于WHO提出的這項(xiàng)建議，已批準(zhǔn)的和正在進(jìn)行注冊或研制結(jié)核病血液（血清學(xué)）檢測試劑的單位均應(yīng)嚴(yán)格把好質(zhì)量關(guān)，臨床研究單位應(yīng)嚴(yán)謹(jǐn)、規(guī)范和科學(xué)地制定臨床考核方案，以確保我國的結(jié)核病血液學(xué)檢測試劑在結(jié)核病診斷上起到輔助診斷的良好作用。

［1］中國生物制品標(biāo)準(zhǔn)化委員會．中國生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)．北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2000．

［2］國家藥典委員會．中華人民共和國藥典（三部）．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：6－8，333．

［3］國家食品藥品監(jiān)督管理局．體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則．北京：國家食品藥品監(jiān)督管理局，2007．

［4］國家食品藥品監(jiān)督管理局．醫(yī)療器械說明書、標(biāo)簽和包裝標(biāo)識管理規(guī)定．2004－07－08．

［5］國家食品藥品監(jiān)督管理局．體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則．北京：國家食品藥品監(jiān)督管理局，2007．

［6］中華人民共和國衛(wèi)生部．WS288－2008肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)．北京：人民衛(wèi)生出版社，2008．

［7］國家食品藥品監(jiān)督管理局．體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）．2007－04－19．

［8］中國防癆協(xié)會基礎(chǔ)專業(yè)委員會．結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程．北京：中國教育文化出版社，2006：13－45．

［9］World Health Organization．WHO warns against the use of inaccurate blood tests for active tuberculosis［EB／OL］．WHO，Geneva，2011［2011－07－20］．http：／／www．who．int／mediacentre／news／releases／2011／tb＿20110720／en／．

［10］國家食品藥品監(jiān)督管理局辦公室．關(guān)于進(jìn)一步加強(qiáng)結(jié)核病血液檢測試劑監(jiān)管有關(guān)事宜的通知．北京：國家食品藥品監(jiān)督管理局，2012．