王麗娟 張鳳有 師永晶

(內(nèi)蒙古錫盟藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 錫林浩特 026000)

蒙成藥斯日道格扎特巴是由訶子、黃柏、連翹、木鱉子(制)、天竺黃、紅花、苦地丁、白糖8味藥組成的復(fù)方制劑，具治協(xié)日痞病功效。為有效控制其成品質(zhì)量，本文建立起對處方中君藥黃柏中成分鹽酸小檗堿作為定量分析的指標(biāo)成分。高效液相色譜法具有靈敏、準(zhǔn)確、分離度好等優(yōu)點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)表明該方法操作簡便，專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，可作為斯日道格扎特巴中鹽酸小檗堿的含量測定方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器:島津LC－2010A HT型高效液相色譜儀，BP121－S型電子天平(d=0.1mg)，BP211－D型電子天平(d=0.01mg)，AS20500A型超聲振蕩器，島津UV－1700型紫外分光光度計(jì)。

1.2 試劑與試藥:鹽酸小檗堿對照品(批號:110713－200609)中國藥品生物制品檢定所;乙腈、甲醇為色譜純;水為高純水;其它試劑均為分析純。

1.3 樣品:由內(nèi)蒙古錫林郭勒盟蘇尼特左旗蒙醫(yī)院提供。

2 色譜條件

色譜柱:色譜柱填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠，本實(shí)驗(yàn)研究采用 kromasil 100－C18柱(250 ×4.6mm 5μm)，柱號606191;流動相:水 －乙腈(55:45，每 100mL含KH2PO40.34g，十二烷基磺酸鈉0.17g)為流動相 ;流速:1mL·min－1;柱溫:40℃，檢測波長:345nm，進(jìn)樣量均為10μl。

3 方法和結(jié)果

3.1 對照品溶液的制備:精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇制成每1mL含40μg的溶液，即得。

3.2 供試品溶液的制備:取本品細(xì)粉約0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加入鹽酸－甲醇(1→100)溶液25mL，密塞，稱定重量，超聲處理(功率300W，頻率50KHz)30min，放冷，再稱定重量，用鹽酸－甲醇(1→100)溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，即得。

3.3 測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

3.4 專屬性考察:陰性對照試驗(yàn):按對照品、供試品制備方法制備供試品溶液和對照品溶液，另取按處方比例并以相同工藝制備的缺黃柏的陰性對照，按供試品溶液制備法制得陰性對照溶液，分別精密吸取對照品、陰性對照溶液、供試品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，測得結(jié)果為陰性對照色譜圖中，在與鹽酸小檗堿對照品以及供試品色譜相應(yīng)的保留時(shí)間處無色譜峰出現(xiàn)。表明處方中其它組份對鹽酸小檗堿測定無干擾。色譜圖見圖1、圖2、圖3。

圖1 對照品色譜圖

圖2 供試品色譜圖

圖3 陰性對照品色譜圖

3.5 線性關(guān)系考察:精密稱取鹽酸小檗堿對照品10.39mg，置25mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述對照品溶液各 0.4、0.6、0.8 、1.0、1.2、1.4 mL分別置10mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，各取10μl進(jìn)樣，按上述色譜條件測定，以峰面積對進(jìn)樣量進(jìn)行回歸分析，結(jié)果鹽酸小檗堿在0.16624～0.58184μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。回歸方程為Y=3898962x－909.93r=0.9996

3.6 精密度試驗(yàn):取同一批供試品6份，各約0.5g，精密稱定，分別按對照品、供試品的制備及測定法的方法操作，測定每份供試品含量，結(jié)果平均含量為 1.548mgμg－1，RSD=1.27%。

3.7 穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一份供試品溶液，按供試品溶液的制備項(xiàng)下方法制備，按上述色譜條件測定，分別于0h、2h、4h、8h、12h、24h 進(jìn)樣測定峰面積，結(jié)果 RSD=1.34%，表明鹽酸小檗堿在24h內(nèi)的峰面積積分值基本穩(wěn)定不變。

3.8 加樣回收試驗(yàn):取同一批供試品9份，各約0.25g，精密稱定，按對照品、供試品制備方法操作，其中3份分別精密加入鹽酸小檗堿對照品溶液(0.3912mg·mL－1)0.5mL，另3份分別精密加入上述鹽酸小檗堿對照品溶液1.0mL，其余3份分別精密加入上述鹽酸小檗堿對照品溶液1.5mL，分別按含量測定法項(xiàng)下方法操作，測定每份含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 鹽酸小檗堿加樣回收試驗(yàn)結(jié)果

3.9 樣品含量測定:取樣品 3批(批號 20090305，20090303，20090317)按對照品、供試品制備方法及測定法項(xiàng)下的方法處理并測定，3批樣品的測定結(jié)果見表2。

表2 樣品中鹽酸小檗堿含量測定結(jié)果

4 討論

4.1 本文考察了不同流動相系統(tǒng)，由于樣品成份復(fù)雜，相互干擾比較嚴(yán)重，經(jīng)反復(fù)調(diào)整試驗(yàn)，最終確定流動相為水－乙腈(55:45，每100mL含 KH2PO40.34g，十二烷基磺酸鈉0.17g)，樣品中鹽酸小檗堿峰分離度達(dá)到2.0以上，理論板數(shù)較高，結(jié)果比較理想。

4.2 在樣品制備考察時(shí)，對溶媒，提取時(shí)間等均進(jìn)行了比較實(shí)驗(yàn)，最終確定以鹽酸－甲醇(1→100)溶液為提取溶媒，超聲處理30min效果較好。

［1］國家藥典委員會，中華人民共和國藥典［S］.一部北京:化學(xué)工業(yè)出版社.2005:214－215