早期顯性梅毒患者血清IL-2、IL-10和TNF-α檢測及其臨床意義

胡曉燕， 聶 芳

(白銀市第一人民醫(yī)院檢驗科，甘肅白銀730900)

梅毒是由梅毒螺旋體(treponema pallidum，TP)感染致病，全身臟器和組織均可侵犯，導致機體功能失常、組織破壞乃至死亡［1］。目前對于梅毒發(fā)病的免疫機制尚不完全了解，有研究表明T淋巴細胞介導的細胞免疫對TP十分重要，而細胞因子也在其中起重要作用［2］。因此，我們檢測了早期顯性梅毒患者血清白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-10(IL-10)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平，以探討早期顯性梅毒患者病程中免疫應答的變化。

材料和方法

一、研究對象

2009年11月至2010年9月白銀市第一人民醫(yī)院門診及住院早期顯性梅毒患者53例，包括一期梅毒25例、二期梅毒28例，其中男27例，女26例，年齡19～57歲，診斷標準:(1)均曾有冶游史;(2)具備梅毒典型臨床癥狀及體征;(3)經快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗、螺旋體明膠凝結試驗檢測均為陽性，無獲得性免疫缺陷綜合征及其他感染性疾病;(4)無其他免疫性疾病;(5)就診前均未有任何治療。正常對照組為健康人群65名，其中男35名，女30名，年齡20～54歲，經梅毒初篩的快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗、螺旋體明膠凝結試驗檢測均為陰性，且無其他感染性、免疫性等重大疾病，正常對照組與梅毒組在年齡及性別構成比上差異無統(tǒng)計學意義。

二、方法

采集靜脈血2 mL，收集于無菌干燥試管中，離心并得血清后，置－20℃冰箱保存待測。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗(DAbS-ELISA)測定血清IL-2、IL-10和TNF-α水平。試劑盒均購自上?；顦飞锟萍加邢薰?，操作參照使用說明，在450 nm波長下用酶標儀測吸光度(A)值，通過標準曲線計算含量。

三、統(tǒng)計學方法

結 果

一、梅毒組IL-2、IL-10和TNF-α水平均高于正常對照組(P＜0.01)，一期梅毒組IL-2、TNF-α水平高于二期梅毒組(P＜0.01)，IL-10水平則低于二期梅毒組(P＜0.01)，見表1。

表1 早期顯性梅毒患者血清IL-2、IL-10和TNF-α水平比較(±s，ng/L)

表1 早期顯性梅毒患者血清IL-2、IL-10和TNF-α水平比較(±s，ng/L)

注:與正常對照組比較，*P＜0.01;與一期梅毒組比較，#P＜0.01。

正常對照組65 26.96±12.26 88.02±23.59 89.69±42.13

二、早期顯性梅毒患者血清IL-2與IL-10呈負相關(r= －0.760，P=0.000)，與TNF-α 呈正相關(r=0.633，P=0.000)，而 IL-10 與TNF-α 無明顯相關性(r= －0.063，P=0.575)

討 論

目前研究認為，梅毒的發(fā)病與輔助性T(Th)細胞密切相關。Th細胞分為Th1細胞和Th2細胞。Th1細胞主要分泌IL-2、白細胞介素-15(IL-15)等細胞因子，促進機體的細胞免疫;Th2細胞主要分泌白細胞介素-4(IL-4)、IL-10等細胞因子，抑制機體的細胞免疫。其中IL-2具有刺激T細胞增生、誘導細胞毒性T淋巴細胞產生和增殖、刺激自然殺傷(NK)細胞的增殖和活化、誘導淋巴因子產生、增強單核-吞噬細胞活性、提高細胞免疫等功能，是參與免疫應答的重要細胞因子，具有抗感染、抗腫瘤和抗移植排斥反應等多種功能。IL-10基本功能為抑制Th1細胞產生細胞因子及其活性［3-4］，此外還具有抑制單核細胞表面主要組織相容性抗原Ⅱ類抗原分子表達、抑制NK細胞的活性、抑制反應性氮氧化物的產生等作用。能夠促進Th2型細胞因子模式產生及抗炎，是維持抗病原體免疫和有害炎癥間平衡的關鍵因子。TNF-α主要由單核巨噬細胞產生［5］，是一種重要的炎癥因子，能夠直接抑制增殖的腫瘤細胞并使其凋亡，影響其他細胞的生長分化，激活T細胞，促進IL-1、IL-2等產生及IL-2受體、主要組織相容性抗原Ⅱ類抗原等表達，促進組織修復及調節(jié)炎癥反應，增強NK細胞活性，參與抵抗細菌、病毒等病原微生物感染。

本研究結果顯示，早期梅毒患者血清IL-2、IL-10和TNF-α水平均高于正常對照組(P＜0.01)，說明梅毒螺旋體感染機體后，機體隨即做出反應，產生細胞免疫和體液免疫，并分泌IL-2、IL-10及TNF-α等細胞因子參與機體免疫，最終使血液中三者的濃度上調。一期梅毒患者IL-2、TNF-α水平高于二期梅毒患者，IL-10水平低于二期梅毒患者(P＜0.01)，一期梅毒時CD4+T淋巴細胞分泌IL-2增多，患者血清IL-2濃度上升，從而刺激T淋巴細胞及NK細胞增殖與分化，促進細胞介導的免疫應答，有助于早期梅毒病程中TP的清除［6-7］。二期梅毒時CD4+T淋巴細胞分泌IL-10逐漸增多，而IL-2的生成逐漸減少，且這一趨勢隨著病程的發(fā)展而更加顯著，導致細胞免疫抑制逐漸加劇，最終發(fā)生Th1/Th2免疫應答失衡，從而引起TP感染的潛伏和持續(xù)，這與劉延菊等［7］的研究結果相似。

曹雙林等［8］在檢測二期梅毒患者IL-6、IL-8及TNF-α水平時發(fā)現，一期、二期和潛伏梅毒患者血清TNF-α水平明顯高于對照組，且銀屑病樣皮疹組血清TNF-α水平明顯高于其他二期梅毒患者(P＜0.05)，從而推測TNF-α參與TP感染后機體的病理反應，且具有生長因子樣作用，可促進表皮生長因子受體表達，協(xié)同表皮生長因子的促增殖功能，促進二期梅毒銀屑病樣皮疹發(fā)生。本研究不僅發(fā)現了早期梅毒患者血清TNF-α水平高于對照組(P＜0.01)，而且還發(fā)現一期梅毒患者TNF-α水平高于二期梅毒患者(P＜0.01)，這表明隨著Th1型免疫應答逐漸減弱，Th2型免疫應答占據優(yōu)勢，具有促進細胞免疫功能的TNF-α也發(fā)生了適當下調以調節(jié)炎癥反應。

本研究結果還顯示，早期梅毒患者血清IL-2和IL-10的表達之間呈負相關，IL-2和TNF-α的表達之間呈正相關，IL-10和TNF-α的表達之間則無明顯相關性，進一步表明IL-2和TNF-α能促進機體的細胞免疫，IL-10抑制了機體的細胞免疫。

綜上所述，TP感染人體后，在早期梅毒的發(fā)展階段，IL-2、IL-10和TNF-α水平發(fā)生改變，造成Th1向Th2方向漂移，Th1/Th2免疫應答出現失衡，抗體對TP的抵抗力下降，使TP發(fā)生免疫逃逸，最終導致病程慢性化。因此，檢測梅毒患者血清IL-2、IL-10和TNF-α的表達水平，一方面能夠使臨床對梅毒患者全身或局部的機體免疫狀況有正確的了解，另一方面也可以用于指導臨床免疫治療及預后觀察。

［1］袁文常，劉慧姝.梅毒致病分子免疫機制的研究進展［J］.國際流行病學傳染病學雜志，2007，34(1):49-51.

［2］Lusiak M，Podwińska J.Interleukin 10 and its role in the regulation of the cell-mediated immune response in syphilis［J］.Arch Immunol Ther Exp(Warsz)，2001，49(6):417-421.

［3］Moore KW，de Waal Malefyt R，Coffman RL，etal.Interleukin-10 and the interleukin-10 receptor［J］.Annu Rev Immunol，2001，19:683-765.

［4］朱慧蘭，曾志榮，葉興東，等.梅毒患者細胞免疫的研究［J］.中國性病艾滋病防治，2002，8(3):139-141.

［5］張秀英，陳懿德，龐玉森，等.早期梅毒患者血清白介素2和白介素10水平的檢測［J］.中華皮膚科雜志，2002，35(3):219.

［6］Marra CM，Castro CD，Kuller L，etal.Mechanisms of clearance of treponema pallidum from the CSF in a nonhuman primate model［J］.Neurology，1998，51(4):957-961.

［7］劉延菊，許巖麗，曹明耀，等.梅毒患者病程中IL-2、IL-10的檢測［J］.實用心腦肺血管病雜志，2009，17(12):1078-1079.

［8］曹雙林，傅玲玲，符 梅，等.二期梅毒患者血清白介素6、白介素8及腫瘤壞死因子α測定［J］.中華皮膚科雜志，2001，34(6):423-424.