自制凝血質(zhì)控品的研究與評價

蔣國英 周麗杰 余苗苗

常規(guī)的凝血四項(xiàng)檢查包括凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血酶時間(TT)。其是術(shù)前出血傾向篩查和抗凝治療監(jiān)測的常用指標(biāo)。凝血檢查受多方面因素影響，如試劑的來源及批號、儀器的性能、檢測的環(huán)境等均可影響檢驗(yàn)結(jié)果。室內(nèi)質(zhì)量控制是保證結(jié)果準(zhǔn)確的重要手段。做好室內(nèi)質(zhì)量控制的關(guān)鍵就是要擁有良好的質(zhì)控品。針對目前凝血質(zhì)控品多為進(jìn)口，價格昂貴，且供應(yīng)周期長等不足，我們研究用自制的凝血質(zhì)控品代替進(jìn)口的正常范圍的質(zhì)控品，用于實(shí)驗(yàn)室的日常室內(nèi)質(zhì)控工作中，取得了良好的效果。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 STAGO全自動血凝分析儀及其配套的試劑盒，質(zhì)控物。

1.2 質(zhì)控血漿的制備 選當(dāng)日凝血檢驗(yàn)結(jié)果正常的血漿標(biāo)本(除去溶血、黃疸、脂血、渾濁者)，充分混勻，留3 ml用于定值，其余按0.5 ml/支，分裝到無菌帶蓋的小塑料子彈頭試管里，標(biāo)明批號，-20℃冰箱保存。必須在抽血后4 h內(nèi)完成。

1.3 方法

1.3.1 自制凝血質(zhì)控品批內(nèi)精密度的測試 取自制質(zhì)控品3 ml于STAGO全自動血凝儀上對PT、APTT，F(xiàn)IB、TT各項(xiàng)目連續(xù)測定20次，計(jì)算均值()，標(biāo)準(zhǔn)差(s)、變異系數(shù)CV%

1.3.2 自制質(zhì)控品日間精密度及穩(wěn)定性測試 每天從冰箱內(nèi)取同批次的自制凝血質(zhì)控品37℃水浴速溶，穩(wěn)定30 min后同凝血標(biāo)本、進(jìn)口質(zhì)控品一同測試，連續(xù)測定30 d，計(jì)算自制凝血質(zhì)控品和進(jìn)口質(zhì)控品的均值()、標(biāo)準(zhǔn)差(s)、變異系數(shù)CV%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用Excel軟件作質(zhì)控圖和SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件作相關(guān)統(tǒng)計(jì)，數(shù)據(jù)以均數(shù)()，標(biāo)準(zhǔn)差(s)，變異系數(shù)(CV%)表示。

2 結(jié)果

2.1 批內(nèi)精密度測試結(jié)果 CV%分別是:PT為2.18%，F(xiàn)IB為2.32%，APTT為3.04%，TT為2.65%。說明自配質(zhì)控品性質(zhì)穩(wěn)定可靠，表明儀器測定結(jié)果的精密度良好。見表1。

2.2 日間精密度測定及穩(wěn)定性測試結(jié)果 進(jìn)口質(zhì)控品各項(xiàng)凝血指標(biāo)的CV%范圍為2.76%%～3.84%，自制質(zhì)控品各凝血指標(biāo)的CV%范圍為3.91%～4.14%，對比可見，自制凝血質(zhì)控品日間精密度及穩(wěn)定性良好，符合室內(nèi)質(zhì)控要求。見表2。

表1 批內(nèi)精密度測試結(jié)果

表2 日間精密度測定及穩(wěn)定性測試結(jié)果

3 討論

室內(nèi)質(zhì)量控制是保證凝血實(shí)驗(yàn)檢測準(zhǔn)確的重要手段。凝血功能檢測時須做室內(nèi)質(zhì)控，只有質(zhì)控結(jié)果在允許范圍內(nèi)，方可測定標(biāo)本和發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告［1］。目前國內(nèi)質(zhì)控血漿多為進(jìn)口凍干血漿，且價格較昂貴，因此研究自制凝血質(zhì)控物非常有必要。

在研究中，我們用每天都用進(jìn)口質(zhì)控品監(jiān)測每天實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，確保自制凝血質(zhì)控品的準(zhǔn)確性。本文研究表明我科的自制正常范圍凝血質(zhì)控品有良好的準(zhǔn)確性及穩(wěn)定性。各項(xiàng)凝血指標(biāo)的批內(nèi)精密度CV%，PT為2.18%，F(xiàn)IB為2.32%，APTT為3.04%，TT為2.65%，批內(nèi)日間精密度CV%，PT為3.91%，APTT為4.12%，F(xiàn)IB為3.04%，TT4.14%，均符合凝血質(zhì)控要求［2］。有文獻(xiàn)報(bào)道［3］，用浮動均值法對凝血3項(xiàng)作質(zhì)量控制探討，表明正?；颊叩幕旌涎獫{凝血3項(xiàng)指標(biāo)均值變化較小，與參比血漿質(zhì)控圖變化趨勢完全一致。

血漿中的大部分凝血因子在保存過程中，會逐漸失活，使PT、APTT、FIB及TT檢測結(jié)果隨標(biāo)本保存時間而延長。有報(bào)道認(rèn)為由于凝血因子Ⅷ極不穩(wěn)定，即使是-20℃保存，其凝血活性也將減少50%［4］。自制凝血質(zhì)控品在-20℃保存條件下，PT、APTT、FIB及TT檢測結(jié)果隨標(biāo)本保存時間而延長，但在一個月內(nèi)可相對穩(wěn)定。所以我們建議將自制凝血質(zhì)控品放于-20℃冰箱中時，保存期限定為一個月。

我們在自制凝血質(zhì)控品時要注意采集人數(shù)盡可能多(至少20人)，采集的血漿應(yīng)擯棄溶血、黃疸、脂血、渾濁者，不能用孕婦和口服避孕藥的正常女性血漿，因?yàn)檫@些情況下可使檢測受影響或使凝血因子的活性升高。自制凝血質(zhì)控品在使用時要注意不要反復(fù)凍融，每支只能使用一次。在融化時不能在室溫中自然融化，這樣會使纖維蛋白原析出和凝血因子消耗。應(yīng)迅速置37℃水浴中5 min，輕輕搖動，使其迅速融化，于室溫穩(wěn)定30 min再進(jìn)行檢測［5］。

用混合血漿作為凝血質(zhì)控品代替進(jìn)口正常值質(zhì)控品，有效克服了凍干質(zhì)控物每次復(fù)溶所帶來的瓶間差，減少了室內(nèi)質(zhì)控的不精密度，提高了檢測的準(zhǔn)確性，真正做到室內(nèi)質(zhì)控工作監(jiān)測實(shí)驗(yàn)條件改變的目的［6］。自制的凝血質(zhì)控品具有不同于進(jìn)口質(zhì)控品的性質(zhì)、成本低、制作簡單，應(yīng)用方便，并具有與患者標(biāo)本相似的介質(zhì)效應(yīng)，減少了誤差，適宜推廣應(yīng)用，尤其適合中小醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室。我們將自制質(zhì)控品應(yīng)用于凝血常規(guī)的室內(nèi)質(zhì)量控制監(jiān)測中，能夠及時發(fā)現(xiàn)引起結(jié)果誤差的原因(如試劑、儀器、標(biāo)本等)，并及時改正，確保凝血的結(jié)果準(zhǔn)確可靠，為臨床診斷和治療提供可靠的依據(jù)。自制凝血質(zhì)控品是良好的室內(nèi)質(zhì)控品，值得推廣應(yīng)用。

［1］彭明婷，谷小林.Sysmex CA-50型血凝儀的性能評價.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2000，23(5):315-317.

［2］蒼金榮，王華，任建康.凝血/止血檢測的質(zhì)量保證.現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2003，35(6):208.

［3］叢玉隆，王俊艷，殷宗建.患者血漿浮動均值法用于PT、APTT、FIB質(zhì)量控制探討.臨床檢驗(yàn)雜志，2002，20(6):354-355.

［4］叢玉隆.血栓與止血試驗(yàn)診斷的現(xiàn)狀及發(fā)展.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2000，24(1):5-7.

［5］孔立新.凝血檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控血漿的制作與評價.臨床檢驗(yàn)雜志，2006，24(2):146.

［6］Westgard JO，Burnett RW.Precision requirements for cost effective operation of analytical processes.Clin chem，1990，36(9):1629-1632.