吳 風
(無錫市第二人民醫(yī)院 檢驗科,江蘇 無錫214002)
自身免疫性疾?。╝utoimmune diseases,AID)患者的血清中存在多種特異性或相關(guān)性自身抗體[1],本試驗采用間接免疫熒光法(IIF)和免疫印跡法(IBT)對AID患者血清中的抗核抗體(ANA)和抗ENA多肽抗體譜進行檢測,結(jié)果報道如下。
1.1 對象 2009年1月-2010年6月我院門診和住院AID患者214例,年齡15-89歲。系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)108例、干燥綜合征(SS)27例、混合性結(jié)締組織?。∕CTD)15例、類風濕性關(guān)節(jié)炎(RA)45例、原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)5例、系統(tǒng)性硬化癥(PSS)7例、特發(fā)性血小板減少性紫癜(1TP)7例。診斷符合美國風濕病協(xié)會診斷標準。40例正常對照組均為體檢健康者。
1.2 試劑與方法 抗核抗體譜(IgG)檢測試劑盒采用歐蒙印跡法,由德國歐蒙公司提供,可檢測抗nRNP、Sm、SS-A、Ro-52、SS-B、SCL-70、PM-Scl、JO-1、CENP-B、PCNA、dsDNA、核小體、組蛋白、核糖核蛋白、AMA-M2等15種不同IgG類抗體,按試劑盒說明進行檢測,抗核抗體(ANA)采用間接免疫熒光法(IIF),以 Hep-2/猴肝為抗原基質(zhì),按照試劑盒操作,熒光顯微鏡觀察結(jié)果,細胞或組織內(nèi)出現(xiàn)特異性熒光判為陽性。測定4個滴度:1∶100、1∶320、1∶1 000、1∶3 200。
2.1 AID患者和正常對照組血清中ANA滴度檢測結(jié)果見表1。
2.2 AID患者和正常對照組血清中ANA和抗ENA抗體結(jié)果見表2。
ANA是真核細胞的細胞核、細胞漿、細胞膜多種組分自身抗體的總稱[2]。不同的自身免疫病有不同的抗核抗體譜。ANA的敏感性高于抗ENA抗體(見表2)但其特異性差,不能確診疾病。ANA滴度檢測可作為AID活動性的一項重要指標,在觀察SLE患者中發(fā)現(xiàn),ANA滴度與抗ENA抗體陽性條帶數(shù)呈正相關(guān),在SLE活動期抗ENA抗體陽性條帶數(shù)增加,ANA滴度也顯著增高,隨著SLE病情緩解,抗ENA抗體陽性條帶數(shù)減少,ANA滴度也隨之下降。
ANA由于其靶抗原多樣性,因此一些特異性的ANA系列抗體對診斷或鑒別AID有一定的臨床意義。在抗核抗體譜檢測的15種不同抗原IgG類抗體中,抗Sm、抗dsDNA和抗核小體抗體均是SLE的特異性抗體。其中抗dsDNA抗體對SLE具有較高的特異性,本文中檢測率達到86.1%??筍m抗體僅在SLE中出現(xiàn),其特異性高被認為是SLE的標記抗體。在108例SLE患者中有40例抗Sm抗體陽性,其他組中未出現(xiàn)陽性結(jié)果,與文獻報道一致[3]??购诵◇w抗體在本文中檢出率為84.3%,一般出現(xiàn)在SLE中早期。聯(lián)合檢測ANA和抗ENA抗體有助于早期鑒別診斷SLE,對SLE的病情判定,追蹤和預(yù)防也具重要作用
表1 214例AID患者和40例正常對照組血清中ANA滴度檢測結(jié)果
表2 214例AID患者和正常對照組血清中ANA和抗ENA抗體結(jié)果
抗SSA抗體和抗SSB抗體是診斷SS的標記性抗體,兩者聯(lián)合檢測可提高SS診斷率[4]??筊0-52抗體可用于鑒別SLE與SS患者,僅3.7%SLE患者可單獨檢測出抗R0-52抗體。
抗RNP抗體是MCTD的標志性抗體,本文中檢出率為80.0%,但特異性較差,其他AID患者中也可檢測到此抗體??筍CI-70抗體是進行性系統(tǒng)性硬化癥特異性抗體,與肺部受累、皮膚硬化及腫瘤發(fā)生相關(guān)。本文抗SCI-70抗體在ITP患者中有71.4%檢出率,在PSS患者中檢出率為57.1%??笴ENP-B抗體主要與PSS相關(guān),本文中檢出率為14.3%。抗AMA-M2抗體是PBC的特異性標志抗體,本文中檢出率為60.0%,主要為低滴度,與文獻報道基本一致[5]。抗JO-1抗體是多肌炎的標志性抗體,具有高度特異性,在其他AID患者中檢測不到此抗體。RA患者血清中可檢測出ANA,但檢出率低(55.6%),其中抗 CENP-B 抗體在 RA 患者中有4.4%的檢出率,較罕見。在以往文獻中未見詳細報道,有待進一步研究。抗ENA抗體中也沒有發(fā)現(xiàn)具有診斷價值的特異性抗體,因此ANA和抗ENA抗體檢測對RA診斷價值不大。
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