于亞杰
訶子為使君子科植物訶子或絨毛訶子的干燥成熟果實(shí)。藥性苦、酸、澀,平。歸肺、大腸經(jīng)。具有澀腸止瀉,斂肺止咳,利咽開音的功效。通過觀察訶子提取液對(duì)小鼠胃腸蠕動(dòng)的影響,可以為訶子在臨床上的合理應(yīng)用及功效研究提供理論依據(jù)。
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康種小白鼠,體質(zhì)量(20±2) g,雌雄各半,由內(nèi)蒙古興安盟職業(yè)技術(shù)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
1.2 實(shí)驗(yàn)藥物 訶子(購自興安盟人民醫(yī)院中藥房)。
1.3 實(shí)驗(yàn)試劑 活性炭(上海焦化總廠活性炭廠 批號(hào)2010-55949-6);氯化乙酰膽堿(北京化學(xué)試劑公司,批號(hào)20011015);嗎丁啉(西安楊森制藥有限公司,批號(hào):100914848,規(guī)格:10 mg/ 片 );NaCl、KCl、MgSO4·7H2O、NaH2PO4·2H2O、NaHCO3、CaCL2、葡萄糖均為市售分析純。
1.4 實(shí)驗(yàn)儀器 BL—420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)和HW-400恒溫平滑肌浴槽(成都泰盟電子有限公司);微量移液器50-500 ul(上海求精生化試劑儀器有限公司),FA1004上皿電子天平(上海精科天平)。
2.1 溶液的制備 ①訶子水提取液:取訶子50 g粉碎,用水2次回流提取過濾,減壓濃縮至0.5 g/ml(生藥量)。②訶子醇提取液:取訶子50 g粉碎,用70%乙醇2次回流提取過濾,減壓濃縮至0.5 g/ml(生藥量)。③臺(tái)氏液配制:稱取NaCl 8.0 g、KCl 0.2 g、MgSO4·7H2O 0.26 g、NaH2PO4·2H2O 0.065 g、NaHCO31.0 g、CaCl20.2 g、葡萄糖 1.0 g。用蒸餾水將氯化鈣完全溶解后再溶解其他物質(zhì),在容量瓶中定容至1000ml。
2.2 營養(yǎng)性半固體糊的制備[1]取羧甲基纖維素鈉10 g,用蒸餾水250 ml溶解后,加入16 g奶粉、8g糖、8 g淀粉和2 g活性炭粉末,攪拌均勻。配制成300 ml的黑色半固體糊狀物約300 g。置冰箱冷藏待用。
2.3 訶子提取物對(duì)正常小鼠胃排空和小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的影響[2]取小鼠88只,雌雄各半,隨機(jī)分成8組:對(duì)照組,嗎丁啉組,訶子水提物大、中、小劑量組,訶子醇提物大、中、小劑量組。每組11只。禁食18 h后,對(duì)照組灌胃生理鹽水;嗎丁啉組灌胃嗎丁啉0.005 g/kg;訶子水提物大、中、小劑量組和訶子醇提取物大、中、小劑量組灌胃劑量分別為3.5 g/kg、1.75 g/kg、0.875 g/kg。灌胃量均為0.1 ml/10g。1 h后,再分別灌胃營養(yǎng)半固體糊0.8 ml,20 min后,使小鼠頸椎脫臼致死,打開腹腔結(jié)扎胃賁門和幽門后取胃,濾紙擦干后稱重記數(shù)(胃全重)。沿胃大彎剪開胃體,洗凈擦干后稱重記數(shù)(胃凈重)。兩者之差為胃內(nèi)殘留物重量,計(jì)算胃內(nèi)殘留率(胃內(nèi)殘留物占所灌半固體糊重量的百分比)。分離腸系膜,剪取幽門至回盲部的腸管,置于托盤。將小腸輕拉成直線,測(cè)量腸管長度作為小腸總長度(I),幽門至黑色前沿的距離作為活性炭在腸內(nèi)的推進(jìn)距離(d)。計(jì)算小腸推進(jìn)率(%)=d/I×100%。
2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。組間對(duì)比采用χ2檢驗(yàn)。(P<0.01)或(P<0.05)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3.1 訶子提取物對(duì)小鼠胃殘留率的影響 與生理鹽水對(duì)照組相比,訶子水提取物和醇提取物大、中劑量組均能顯著提高胃內(nèi)殘留率(P<0.01)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明訶子提取物有抑制胃排空的作用。
3.2 訶子提取物對(duì)小鼠腸推進(jìn)率的影響 與生理鹽水對(duì)照組相比,訶子水提取物和醇提取物大、中劑量組均能顯著降低小腸內(nèi)炭末推進(jìn)率(P<0.05或P<0.01)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明訶子提取物有抑制正常小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的作用。
小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,訶子水提取物和醇提取物均能顯著提高胃內(nèi)殘留率(P<0.05或P<0.01)且具有劑量依賴性,表明訶子提取物有抑制正常小鼠胃排空的作用;同時(shí)訶子水提取物和醇提取物均能顯著降低小腸內(nèi)炭末推進(jìn)率,且具有劑量依賴性(P<0.05或P<0.01),表明訶子提取物有抑制正常小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的作用。
[1] 邢建峰,封衛(wèi)毅,侯家玉.小鼠胃排空及小腸推進(jìn)試驗(yàn)方法的探討.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2003,7(26):4.
[2] 李春梅,李桂生,李敏.蓽茇水 提取物對(duì)小鼠胃排空和腸推進(jìn)的影響.中藥藥理與臨床,2007,23(3):58-60.