HER-2、EGFR及P16在宮頸鱗癌中的表達(dá)及臨床意義

王亞萍 鄒 娜 于 水 陳 琦 劉 微

大連市婦產(chǎn)醫(yī)院病理科，遼寧大連 116033

子宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，近年來發(fā)病趨于年輕化，5年總體生存率約在52%左右，其發(fā)生發(fā)展的過程復(fù)雜并伴有多因素的參與。本文利用免疫組化檢測技術(shù)觀察宮頸鱗癌中人表皮生長因子受體2（HER-2）、表皮生長因子受體（EGFR）及 P16基因的表達(dá)情況，以探討其與宮頸癌發(fā)生、發(fā)展、浸潤與轉(zhuǎn)移的關(guān)系及其在判斷預(yù)后和臨床治療方面的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2010年4月～2012年10月期間宮頸鱗癌住院手術(shù)患者30例，年齡40～69歲，平均48.5歲。按照國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）2000年的分期標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ期10例，Ⅱ期8例，Ⅲ期12例；組織學(xué)分級：Ⅰ級及Ⅱ級共8例，Ⅲ級22例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移18例；有脈管浸潤者16例，無脈管浸潤14例；浸潤深度≤1/2者10例，＞1/2者20例；另選取正常人15例（年齡31～55歲，平均42.8歲）宮頸組織為對照?；颊咝g(shù)前均未進(jìn)行化療、放療、免疫治療及激素等治療。

1.2 主要試劑

即用型鼠抗人HER-2、EGFR和P16單克隆抗體及SP試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。

1.3 方法

上述標(biāo)本均經(jīng)中性福爾馬林固定、常規(guī)石蠟包埋，制成4 μm切片。采用免疫組化S-P法進(jìn)行染色，按試劑盒說明方法操作。用已知陽性的切片做陽性對照，用磷酸鹽緩沖液（PBS）分別代替一抗做陰性對照。

1.4 結(jié)果判定

HER-2、EGFR及P16陽性均為淺黃色或棕黃褐色顆粒，其中HER-2定位于細(xì)胞膜；EGFR定位于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)；P16定位于細(xì)胞核。（1）EGFR和HEr-2陽性判斷為腫瘤細(xì)胞無棕黃色染色或僅少于10%腫瘤細(xì)胞呈較弱棕級，>10%腫瘤細(xì)胞呈較弱～中等棕黃色染色為2級，>10%腫瘤細(xì)胞呈高棕黃色染色為 3級[1]；（2）P16，陽性細(xì)胞數(shù)<10%為0級，10%～25%為1級，26%～50%為2級，>50%為3級。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行χ2檢驗和相關(guān)性分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HER-2、EGFR和P16蛋白的表達(dá)

本研究中宮頸鱗癌HER-2、EGFR和P16蛋白的陽性表達(dá)率分別為66.67%、60.00%和73.33%，而正常宮頸組織中這三者均無表達(dá)，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見表1。

2.2 HER-2、EGFR及P16的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

本研究中顯示宮頸鱗癌HER-2的表達(dá)與組織學(xué)分級和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，EGFR的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，P16表達(dá)與組織學(xué)分級及浸潤深度相關(guān)，這三者都與臨床分期和脈管浸潤無關(guān)。具體見表2。

2.3 HER-2、EGFR和P16蛋白之間的相關(guān)性

通過Spearman等級相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)HER-2的表達(dá)和EGFR 的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.6000，P=0.0201），而 HER-2和 P16 （r=0.4667，P=0.1709） 以及 EGFR 和 P16 （r=0.0667，P=0.7921）之間無相關(guān)性。

3 討論

宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤及轉(zhuǎn)移等是比較復(fù)雜的過程，除了目前已研究明確的人乳頭瘤病毒（HPV）感染是主要的致病因素以外，還有一些癌基因、抑癌基因以及生長因子受體等參與其中。

HER-2基因定位于人染色體17q21，編碼具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，能促進(jìn)腫瘤形成新生血管，抑制細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲破壞作用。HER-2基因在正常組織中表達(dá)較低，而在惡性腫瘤中有著程度不同的高表達(dá)。在其陽性表達(dá)中，盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高于陰性，故與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)[2]。本研究中HER-2在正常宮頸組織中沒有表達(dá)，而在宮頸鱗癌中的表達(dá)率為66.67%，與魏芳等[3]報道的表達(dá)率為69%比較接近，本次實驗中顯示宮頸鱗癌HER-2的表達(dá)與組織學(xué)分級和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，故HER-2陽性表達(dá)的腫瘤可能具有更強(qiáng)的增殖活性及侵襲性，可以以此作為預(yù)測患者預(yù)后的一個指標(biāo)，過度表達(dá)提示預(yù)后不良。

表皮生長因子受體（EGFR）廣泛存在于上皮細(xì)胞的細(xì)胞膜及細(xì)胞質(zhì)，是一種跨膜糖蛋白受體。EGFR具有蛋白激酶活性及受體自身磷酸化功能，參與細(xì)胞信號的傳遞，該受體的持續(xù)激活可導(dǎo)致細(xì)胞不斷生長、分裂，可能是導(dǎo)致細(xì)胞惡變的因素之一[4]。EGFR在許多腫瘤中呈現(xiàn)高表達(dá)，例如食管癌、內(nèi)膜癌[5-6]，EGFR高表達(dá)具有抑制凋亡和促進(jìn)腫瘤內(nèi)血管增生的作用，因此能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移和侵襲[7]。本實驗中正常宮頸組織中無EGFR的表達(dá)，而在鱗癌中表達(dá)為60%，略低于于曉紅等[8]報道的69.53%，且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，但與臨床分期及組織學(xué)分級無關(guān)。此結(jié)果提示EGFR在宮頸鱗癌的發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移浸潤中發(fā)揮一定的作用，測定腫瘤組織中EGFR的表達(dá)可以作為判斷預(yù)后的一個指標(biāo)。

抑癌基因P16通過控制腫瘤抑制蛋白pRb的活性在細(xì)胞周期起到抑制細(xì)胞分化的關(guān)鍵作用，使細(xì)胞停止于G1期。當(dāng)P16基因發(fā)生突變時，致使細(xì)胞異常增生。本次實驗結(jié)果提示P16在正常宮頸組織中沒有表達(dá)，而在鱗癌組織中的表達(dá)與組織學(xué)分級及浸潤深度相關(guān)，腫瘤組織分化越低，浸潤越深，則表達(dá)越強(qiáng)。這與有些作者報道P16陽性表達(dá)與宮頸腫瘤的細(xì)胞分化程度有關(guān)，細(xì)胞分化好的表達(dá)明顯低于分化差的結(jié)果基本一致[9]。因此推測抑癌基因P16突變在腫瘤的發(fā)生發(fā)展及浸潤過程中具有一定的作用。

HER-2可與EGFR受體形成異源二聚體，從而使得EGFR過度表達(dá)[10]，預(yù)示HER-2與EGFR之間存在著某些聯(lián)系。近年來，也有研究顯示，在宮頸鱗癌中HER-2與EGFR的聯(lián)合表達(dá)預(yù)示患者的預(yù)后較差，無瘤生存期及無盆腔擴(kuò)散生存期將縮短，即便同時輔以放化療效果也不佳[11]。本研究中HER-2與EGFR的表達(dá)呈正相關(guān)，與夏紅強(qiáng)等[12]報道在乳腺癌中兩者表達(dá)呈負(fù)相關(guān)不同，這表明HER-2與EGFR之間具有復(fù)雜密切的關(guān)系，兩者的聯(lián)合過度表達(dá)對宮頸鱗癌的進(jìn)展可能起到協(xié)同作用。

惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是一個多因素、多基因共同參與的過程，探討HER-2、EGFR及P16在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及浸潤等方面的作用及相互關(guān)系對于腫瘤的診斷、治療和預(yù)后判斷具有重要的臨床意義，并將為分子靶向藥物治療及放化療相結(jié)合的綜合療法提供參考和幫助。

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