楊 瑾

1.College of Life Science，Shaanxi Normal University，Xi’an 710062，China；2.Physical Education Department of Xi＇an University of Post and Telecommunications，Xi＇an 710061，China.

由于傳統(tǒng)觀念和測量方法的限制，對運動性疲勞的研究多集中于外周疲勞方面，而中樞神經(jīng)系統(tǒng)在運動性疲勞中的作用卻少受重視。隨著新技術(shù)的應(yīng)用和神經(jīng)生物學研究的發(fā)展，運動性中樞疲勞愈來愈受到廣泛關(guān)注和研究。中樞疲勞發(fā)生部位起于大腦，止于脊髓運動神經(jīng)元。大腦皮層及皮層下中樞腦細胞工作強度下降可能是疲勞產(chǎn)生部位之一。腦細胞工作強度下降是大腦皮層保護性抑制發(fā)展的結(jié)果。運動時，大量沖動傳至皮層相應(yīng)神經(jīng)細胞，使之長期興奮，導致了消耗的增多，為避免過度消耗，當達到一定程度時就產(chǎn)生了保護性抑制。中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)遞質(zhì)參與了這種疲勞的產(chǎn)生，也可以說是中樞疲勞產(chǎn)生的物質(zhì)基礎(chǔ)。5-HT作為一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，參與多種腦功能如情緒、疼痛、睡眠、體溫、內(nèi) 分 泌 等 的 調(diào) 節(jié)［19，21，25，31］。 近 年 來 ，5-HT 成 為 研 究 運 動性疲勞領(lǐng)域的熱點之一。諸多研究表明，長時間運動可使機體腦中5-HT水平增加，從而損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能，降低中樞向外周發(fā)放神經(jīng)沖動，引起運動能力降低。運動性中樞疲勞對運動員正常訓練、比賽產(chǎn)生一定影響，如何推遲或消除疲勞顯得尤為重要。

運動性疲勞屬中醫(yī)“勞倦”范疇，中醫(yī)經(jīng)典著作中有許多對“疲勞”與“虛勞癥”的論述?！端貑柵e痛論》曰：“勞則氣耗”，《雜病廣要勞篇》曰：“勞動不息則形虛”，《景岳全書》曰：“凡虛損之由，無非勞倦七情飲食所致，或先傷其氣，氣傷必其精”，《金匱玉函要略輯文》曰：“勞則必勞其精血也”。中醫(yī)理論認為精（津）血為側(cè)力產(chǎn)生的物質(zhì)基礎(chǔ)，它的化生與運行與中醫(yī)脾、腎、肝、心有密切聯(lián)系，人的耐力亦由此而生。目前，應(yīng)用中藥運動補劑增強運動能力和消除疲勞的研究十分活躍，許多學者研究表明，中藥運動補劑對運動能力的提高和疲勞的消除有一定的作用。沙苑子（semen astragali complanati），為豆科植物扁莖黃芪（Astragalus complanatus R Br）干燥成熟的種子，在歷代本草中曾以白蒺藜、蒺藜子、潼蒺藜、沙苑蒺藜、大沙苑、沙蒺藜等名稱入藥，它是陜西特產(chǎn)中藥材之一［2，17］。醫(yī)學研究發(fā)現(xiàn)，沙苑子富含多種氨基酸、多肽、黃酮類、蛋白質(zhì)，微量元素等成分，能夠溫補肝腎、固精、縮尿、益肝明目，具有一定的抗疲勞作用。本實驗試圖通過研究沙苑子對運動性疲勞大鼠海馬、間腦5-HT及其相關(guān)代謝物的影響，為沙苑子作為運動保健品的開發(fā)利用提供實驗依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

Sprague-Dawley（SD）雄性健康大鼠24只，3月齡，體重190～230g，由陜西中醫(yī)研究所實驗動物飼養(yǎng)中心提供，大鼠置于室溫22℃±5℃，相對濕度40%～65%清潔動物室中，分籠飼養(yǎng)，自由攝食飲水。

1.2 實驗模型的建立

1.2.1 動物分組及造模方法［10］

采用遞增強度的方式在國產(chǎn)電動鼠類跑臺（購自杭州）上跑臺運動，坡度為0。從訓練第1周起，每周遞增速度，分別為：15m／min，22m／min，27m／min，30m／min，35 m／min，每天訓練20min。第5周后按以下方案進行訓練：

一般訓練：于第6、7周每只大鼠每日按35m／min的速度，在跑臺上跑20min。

強化訓練：于第6、7周每只大鼠每日按35m／min的速度，在跑臺上跑30min。

造模期間于每周星期日測大鼠體重，造模周期共計7周，于第8周始取材，末次運動速度仍為35m／min，時間為30min。

實驗分組：

安靜對照組（6只）：自實驗開始第1～7周直至第8周取材日不進行任何運動訓練。

訓練對照組（6只）：進行5周的適應(yīng)訓練后，再進行2周的一般訓練，于第8周取材日運動后即刻取材。

強化訓練組（6只）：進行5周的適應(yīng)訓練后，再進行2周的強化訓練，于第8周取材日運動后即刻取材。

強化加藥組（6只）：進行5周的適應(yīng)訓練后，再進行2周的強化訓練，于第8周取材日運動后即刻取材。

1.2.2 給藥方法

強化訓練組大鼠每日于訓練后1h灌胃中藥（將沙苑子沖劑按比例溶解，按1.8g／kg的給藥劑量），沙苑子沖劑由陜西省恒心堂制藥有限公司生產(chǎn)，其余各組大鼠等體積的生理鹽水灌胃。

1.2.3 取樣

于取材日將大鼠乙醚麻醉，立即斷頭處死，切除延髓以下的脊髓部分，去除小腦和大腦皮層。前方以僵三角的前緣和視交叉為界，后方以四疊體前緣和乳頭體后緣為界離斷，分離出間腦和海馬。

1.2.4 樣品的制備

分別將稱重后的海馬、間腦組織于研缽中，加少許石英砂及80%乙醇3ml，研磨成漿，再加80%乙醇提取1h，過濾于蒸發(fā)皿中，將研缽和濾紙用80%乙醇（約5ml）洗2次。之后將濾液于75℃水浴上蒸干，并用pH2.20的檸檬酸緩沖液和10%偏磷酸按1∶1的比例溶解，高速離心，取上清液，低溫保存待用，測試Trp。

分別將稱重后的海馬、間腦組織于研缽中充分研磨，加0.4mmol／L高氯酸溶液1ml，之后將組織勻漿液轉(zhuǎn)入離心管，置冷凍離心機，4℃以10 000rpm離心15min；取上清，再轉(zhuǎn)入離心管，置冷凍離心機，4℃以10 000rpm離心10min；取上清并用0.4mmol／L高氯酸溶液定容至1 ml，混勻，低溫保存待用測試5-HTP、5-HT、5-HIAA含量。

1.3 主要試劑及儀器

5-HTP購自上?；瘜W試劑采購供應(yīng)站；5-HT、5-HIAA購自 Sigma公司；Trp、甲醇、HCl、Hac、NaAc、高氯酸均為色譜純，以及偏磷酸、檸檬酸緩沖液、石英砂、乙醇、茚三酮均購自西安化學試劑廠及上?；瘜W試劑廠。

Beckman 121MB氨基酸自動分析儀（美國）；HH系列恒溫浴鍋（深圳市沙頭角國華儀器廠）；TN-100托盤扭力天平（武漢自動化儀表廠）；Agilent 1100高效液相色譜（四元梯度泵，熒光檢測器，化學工作站）、電子天平（德國Sartorius）；冷凍離心機（美國Bechman）

1.4 測定分析條件

Trp測定：

樹脂：離子交換樹脂；緩沖液流速：10ml／h；茚三酮流速：5ml／h；進樣量：50μl；柱溫：54℃；層析柱：2.8mm×300mm；分析時間：65min；反應(yīng)水浴溫度：100℃；層析柱溫度：53℃；緩沖液壓力：4826～5515kPa；緩沖液pH：pH3.28；pH3.90；pH5.20。

5-HTP、5-HT、5-HIAA測定：

色譜條件：

色譜柱：Lichorsorb RP-C18（4.6×200mm，5μm）；流動相：0.1mmol／L NaAc（用 HAc調(diào)整pH 為5.10，內(nèi)含0.1 mmol／L EDTA –2Na）∶甲醇＝90∶10（V／V），流量為1.0 ml／min；柱溫：25℃；檢測波長：λex／λem＝290nm／330nm。

標準曲線：精密稱取5-HTP 2.30mg，5-HIAA 2.20mg，5-HT 1.93mg，分別置于10ml容量瓶，以0.1 mmol／L HCl溶解并調(diào)整至刻度，充分混勻。取此溶液1.25，2.50，5.00，7.50，10.0ml分別進樣測定，以含量（ng）對峰積作線性回歸。

回歸方程：

計算方法：含量（μg／g）＝ 測得值（ng）／ 進樣量（μl）×樣品總體積（ml）÷ 組織重量（g）。

2 結(jié)果

2.1 沙苑子及跑臺訓練對大鼠海馬5-HT及其相關(guān)代謝物質(zhì)的影響

表1結(jié)果顯示，一般訓練組大鼠海馬Trp、5-HTP、5-HT、5-HIAA含量均較安靜組高，但Trp、5-HTP、5-HIAA未顯示顯著性差異（P＞0.05），而5-HT含量極顯著高于安靜組（P＜0.01）；強化訓練組 Trp、5-HTP、5-HT、5-HIAA含量均高于安靜組和一般訓練組，且Trp含量較一般訓練組有極顯著性差異（P＜0.01）；5-HTP、5-HT含量較安靜組和一般訓練組均有極顯著性差異（P＜0.01），而5-HIAA未顯現(xiàn)顯著性差異（P＞0.05）；沙苑子可抑制 Trp、5-HTP、5-HT的升高，使強化加藥組大鼠海馬Trp、5-HTP、5-HT含量顯著低于強化訓練組，但5-HIAA含量顯著高于強化訓練組，幾種物質(zhì)均顯示出顯著性差異（P＜0.05）。

表1 本研究沙苑子及跑臺訓練對大鼠海馬5-HT及其代謝物的影響一覽表Table 1 Effects of Semen Astragali Complanati on 5-HT and Relevant Substances Levels of Hippocampus in Exercise-Induced Fatigue Rats

2.2 沙苑子及跑臺訓練對大鼠間腦5-HT及其相關(guān)代謝物質(zhì)的影響

表2結(jié)果顯示，一般訓練組大鼠間腦Trp、5-HTP、5-HT、5-HIAA含量均較安靜組高，其中5-HT含量較安靜組有顯著性差異（P＜0.05），其他并無顯著性差異（P＞0.05）；強化 訓練組 Trp、5-HTP、5-HT、5-HIAA 含量均高于安靜組和一般訓練組，且其中Trp含量顯著高于安靜組和一般訓練組，差異具有顯著性（P＜0.05），5-HT含量顯著高于安靜組和一般訓練組，差異具有極顯著性（P＜0.01），5-HTP含量與安靜組和一般訓練組相比，分別具有極顯著性和顯著性差異（P＜0.01，P＜0.05）；沙苑子可抑制Trp、5-HTP、5-HT含量升高，且均具有顯著性差異（P＜0.05），而使5-HIAA含量高于強化訓練組，差異具有顯著性（P＜0.05）。

表2 本研究沙苑子及跑臺訓練對大鼠間腦5-HT及其代謝物的影響一覽表Table 2 Effects of Semen Astragali Complanati on 5-HT and Relevant Substances Levels of Diencephalon in Exercise-Induced Fatigue Rats

3 分析與討論

Newsholme于1986年首先提出，血漿中氨基酸含量的變化可影響腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)，尤其是5-HT的合成、堆積、釋放，從而在中樞疲勞中發(fā)揮作用［28］。5-HT是腦內(nèi)抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，腦內(nèi)5-HT代謝變化與運動性中樞疲勞有關(guān)［18，22］。研究顯示，急性和持續(xù)性刺激可使腦區(qū)特定區(qū)域5-HT 含 量 發(fā) 生 改 變［23，26，30］，運 動 可 刺 激 腦 內(nèi) 某 些 區(qū)域神經(jīng)細胞釋放5-HT［24，27］。

血漿中5-HT并不能通過血腦屏障，因此，中樞5-HT只能在腦內(nèi)合成。正常情況下，中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，單胺類遞質(zhì)的代謝變化總處于相對平衡狀態(tài)，運動打破了這種平衡。f-Trp／BCAA的比值又會影響Trp入腦速度，運動使f-Trp／BCAA升高，通過血腦屏障的Trp增加，故腦合成5-HT增多，筆者前期研究結(jié)果也證實了這點［13］。運動時，腦組織能量消耗導致Na＋-K＋-ATP酶活性降低，于是神經(jīng)元去極化，促使神經(jīng)遞質(zhì)釋放增加，從而引起大量的5-HT釋放至細胞間隙。因此，腦組織細胞外5-HT蓄積，運動時間持續(xù)使這種蓄積持續(xù)，并使5-HT向周圍腦實質(zhì)、血管周圍彌散，5-HT與受體結(jié)合，發(fā)揮各種生理作用。

腦中Trp含量的多少直接關(guān)系著腦內(nèi)5-HT的生成。本實驗中長時間耐力訓練導致機體腦組織Trp水平的改變，隨著強度增大和時間的延長，Trp升高的幅度明顯加大。大量研究發(fā)現(xiàn)，血中游離Trp水平與腦內(nèi)Trp水平有高度一致性，本實驗結(jié)果支持這一觀點。進入腦組織中的Trp在TPH的作用下生成5-HTP后，很快便被5-羥色氨酸脫羧酶作用生成5-HT，對機體產(chǎn)生一定生理作用。實驗中Trp、5-HTP含量變化顯示，運動可使機體處于應(yīng)激狀態(tài)，Trp代謝顯著加強，尤其是在長時間大強度運動刺激后。腦組織中Trp的增多是由于運動使血中游離色氨酸增多的原因，5-HTP的增多可能是由于運動造成Trp生成5-HTP相關(guān)酶活性增加的緣故。

運動對腦組織單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響已有不少報道。Fujino等［20］用微透析技術(shù)在體檢測到游泳后大鼠前腦、海馬神經(jīng)細胞外5-HT水平提高。Pitsiladis等［29］檢測了人騎自行車疲勞后5-HT代謝加快，認為5-HT參與了運動性中樞疲勞的發(fā)生。實驗中慢性運動應(yīng)激可使海馬、間腦組織5-HT含量增加，導致運動疲勞的發(fā)生；大強度長時間運動使5-HT含量增加更為明顯，進而加重疲勞程度，支持以往觀點，5-HT活性增強可能通過多巴胺系統(tǒng)使覺醒和激動受抑，從而引起疲勞。學者研究表明，腦內(nèi)5-HT通過作用于各自的受體而發(fā)揮作用［11］。筆者發(fā)現(xiàn)，比較長時間較大強度運動應(yīng)激對大鼠腦組織5-HT生成作用更為明顯，可能通過以上途徑使疲勞程度更為加劇。5-HIAA作為5-HT的代謝產(chǎn)物，其腦內(nèi)水平的變化反映5-HT分解代謝的狀況。實驗大鼠海馬和間腦一般訓練組5-HIAA含量較安靜組高，但無顯著性差異；強化訓練組其含量高于安靜組和一般訓練組，未顯現(xiàn)顯著性差異，推測是由于多次重復運動刺激使大鼠對疲勞有了適應(yīng)性，同時運動作為一種應(yīng)激加速了5-HT的合成與降解。

依據(jù)中醫(yī)理論，應(yīng)用中藥對機體進行整體調(diào)節(jié)均能提高實驗動物的運動能力，對推遲和消除運動性疲勞起到積極作用［1，6，16］。醫(yī)學研究表明，依據(jù)不同癥候，運用中 藥 可使模型動物腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及其代謝產(chǎn)物發(fā)生變化。中醫(yī)理論認為，“腦為髓海”，腦的正常結(jié)構(gòu)依賴于心主神明，氣血流通，依賴于腎藏精生髓濡腦。研究表明，復方中藥“健憶液”［8］，“開 心 散”［3］可 使 模 型 大 鼠 腦 內(nèi) 5-HT 水平降低、5-HIAA水平增高。復方中藥“強身丹”［12］、“解百憂口服液”［14］，及溫腎陽中藥［4］均可對模型鼠腦內(nèi)5-HT、5-HIAA含量產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用。

中醫(yī)認為，肝與運動性疲勞的發(fā)生有密切的關(guān)系。運動可以不同程度地影響肝臟組織細胞的結(jié)構(gòu)、功能及抗氧化能力。研究表明，力竭性運動訓練可導致血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著升高，對肝臟產(chǎn)生不良影響［15］。肝臟的功能主要為疏泄與藏血，尤以其疏泄功能為重要。運動性疲勞發(fā)生時，肝細胞結(jié)構(gòu)和功能會隨之發(fā)生改變。肝在運動中調(diào)節(jié)血糖水平，若肝失疏泄，運動時血糖的調(diào)節(jié)和丙酮酸循環(huán)代謝不足，容易導致疲勞過早出現(xiàn)?，F(xiàn)代醫(yī)學表明，肝臟功能與大腦皮層的興奮和抑制、植物神經(jīng)功能等多種因素關(guān)系密切。

本實驗中，強化加藥組大鼠海馬和間腦組織中Trp、5-HTP、5-HT均較強化訓練組有所下降，提示中藥沙苑子可通過抑制5-HT的合成前體，減少腦組織中5-HT的含量，而且沙苑子可使5-HIAA含量有所升高，說明其有效加速5-HT的分解，減少5-HT的積聚，使大鼠海馬和間腦5-HT水平對耐力運動反應(yīng)的敏感性降低，對其代謝過程、遞質(zhì)更新率及神經(jīng)元活性產(chǎn)生積極性影響，即可推遲運動疲勞的發(fā)生，又可及時消除疲勞。

究其原因，主要是由于沙苑子具有保肝作用［5，7］，肝臟的生理特性是主升發(fā)，喜調(diào)達而惡抑郁，通過調(diào)暢周身氣機，使氣機的升降出入運動協(xié)調(diào)平衡，從而維持各臟腑器官功能活動的正常。肝在調(diào)暢氣機的基礎(chǔ)上，還有疏通血脈、通調(diào)水道、疏泄膽汁、助脾胃運化、協(xié)調(diào)呼吸等功能。如果肝主疏泄的功能發(fā)生異常，還可進一步導致多種病理變化。所以古人有“百病生于氣”、“百病皆生于郁”之說。肝能協(xié)助及調(diào)節(jié)脾主運化的功能。加藥組補充沙苑子，減輕了大強度運動對肝臟所造成的不良影響，調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝，使大鼠海馬和間腦組織5-HT基礎(chǔ)水平降低，發(fā)揮推遲疲勞的作用。

筆者前期的研究結(jié)果顯示［13］，長時間耐力跑臺運動應(yīng)激使大鼠血清BCAA含量有所下降，AAA尤其是f-Trp含量上升，沙苑子可抑制BCAA下降、AAA上升趨勢；同時，長時間耐力跑臺運動使實驗大鼠血清f-Trp／BCAA、AAA／BCAA顯著增加，沙苑子對運動訓練引起的f-Trp／BCAA、AAA／BCAA升高有明顯的降低作用。由于沙苑子中含谷氨酸、亮氨酸、異亮氨酸等多種氨基酸，可以減少AAA進入大腦的量，利于腦中AAA與BCAA間的平衡，進而影響進入機體中樞神經(jīng)Trp量，減少5-HT生成，延緩中樞神經(jīng)疲勞的發(fā)生程度。另外，沙苑子中含有的抗氧化成分對大腦的結(jié)構(gòu)有一定的保護作用［9］，可以使其對神經(jīng)遞質(zhì)含量引起變化的相關(guān)酶的活性及其基因發(fā)揮調(diào)節(jié)功能，使5-HT的含量在補充沙苑子后有所下降，從而延緩中樞疲勞的發(fā)生。

4 結(jié)論

綜上所述，運動可使機體處于應(yīng)激狀態(tài)，Trp代謝顯著加強，5-HT含量顯著升高，尤其是在長時間大強度運動刺激后，中藥沙苑子可通過抑制5-HT的合成前體，減少腦組織中5-HT的含量，而且可以有效加速5-HT的分解，減少5-HT的積聚，既可推遲運動疲勞的發(fā)生，又可及時消除疲勞。

［1］鄧運龍，黃世林，王曉波，等.補血耐力復合膠囊對軍事五項運動員大負荷訓練期間身體機能的影響［J］.中國運動醫(yī)學雜志，2007，26（4）：479-481.

［2］國家食品藥品監(jiān)督管理局第九屆藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

［3］黃玉芳，卞慧敏，郭海英，等.開心散對老年大鼠記憶力和單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響［J］.中華老年醫(yī)學雜志，1998，17（3）：154-157.

［4］李承軍，劉瑞華，陳玉英，等.衰老大鼠的神經(jīng)遞質(zhì)代謝特點及溫腎陽中藥對代謝的影響［J］.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學雜志，1997，3（6）：19-25.

［5］劉春宇，顧振綸，韓蓉，等.沙苑子黃酮對CCl4及D-氨基半乳糖致急性肝損傷的保護作用［J］.中草藥，2005，36（12）：1838-1841.

［6］林松毅，劉靜波，程勝.復方中藥功能液抗疲勞作用的實驗研究［J］.食品科學，2005，26（11）：224-227.

［7］孫利兵，王尉平，顧振綸，等.沙苑子黃酮對CCl4致小鼠慢性肝纖維化的保護作用［J］.蘇州大學學報（醫(yī)學版），2010，（1）：90-93.

［8］王建義，江國榮，任光榮.健憶液對老年大鼠神經(jīng)、內(nèi)分泌及血液流變性的影響［J］.中國血液流變學雜志，2000，10（4）：192-195.

［9］王軻.沙苑子對運動訓練大鼠不同組織自由基代謝、ATP酶活性及血清激素水平影響的實驗研究［D］.西安：陜西師范大學碩士學位論文，2005.

［10］王天芳，楊維益，胡加天，等.中藥復方“體康復”對運動大鼠血清游離氨基酸影響的實驗研究［J］.中國運動醫(yī)學雜志，1998，17（4）：316-319.

［11］萬選才，楊天祝，徐承燾.現(xiàn)代神經(jīng)生物學［M］.北京：北京醫(yī)科大學中國協(xié)和醫(yī)科大學聯(lián)合出版社，1999.

［12］薛建國，童元元，戴慎，等.強身丹對21月齡大鼠記憶力及腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響［J］.中醫(yī)藥研究，1998，14（2）：23-26.

［13］楊瑾，熊正英.沙苑子對運動性疲勞大鼠血清BCAA、AAA的影響［J］.陜西師范大學學報，2010，38（2）：104-108.

［14］楊士友，黃世福，孫備.解百憂口服液對抑郁模型大鼠行為及中樞神經(jīng)遞質(zhì)的影響［J］.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學雜志，2000，6（11）：56-59.

［15］張慧敏，胡堯，程旭光.運動性疲勞與肝臟的關(guān)系［J］.中國臨床康復，2005，9（28）：220.

［16］張宗國.加味“八珍湯”中藥補劑對男子古典摔跤運動員血尿指標的影響研究［J］.北京體育大學學報，2006，29（8）：1066-1068.

［17］中國藥科大學.中藥辭海［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，1996.

［18］CAPERUTO E C，SANTOS R V，MELLO M T，et al.Effect of endurance training on hypothalamic serotonin concentration and performance［J］.Clin Exp Pharmacol Physiol，2009，36（2）：189-191.

［19］DOBREK L，THOR P J.Pathophysiological concepts of functional dyspepsia and irritable bowel syndrome future harmacotherapy［J］.Acta Pol Pharm，2009，66（5）：447-460.

［20］FUJINO K，YOSHITAKE T，INOUE O，et al.Increased serotonin release in mice frontal cortex and hippocampus induced by acute physiological stressors［J］.Neurosci Lett，2002，320（1-2）：91-95.

［21］GILLMAN K P，PEARCE S，AHMED N，et al.Lessons continue：serotonin toxicity［J］.Consult Pharm，2009，24（7）：474-476.

［22］JACOPO RIVA，STEFANO P，MARELLIA，et al.The effects of drug detection training on behavioral reactivity and blood neurotransmitter levels in drug detection dogs：A preliminary study［J］.J VET BEHAV，2012，7（1）：11-20.

［23］JIANSONG Z，LINGJIANG L I，SHAOJUN T，et al.Effects of serotonin depletion on the hippocampal GR／MR and BDNF expression during the stress adaptation［J］.Behav Brain Res，2008，195（1）：129-138.

［24］KIRBY LG ，ALLEN A R，LUCKI I.Regional differences in the effects of forced swimming on extracellular levels of 5-hydroxytryptamine and 5-hydroxyindoleacetic acid［J］.Brain Res，1995，682（1-2）：189-196.

［25］LIU Q，WONG-RILEY M T.Postnatal changes in the expressions of serotonin 1A，1B，and 2Areceptors in ten brain stem nuclei of the rat：implication for a sensitive period［J］.Neuroscience，2010，165（1）：61-78.

［26］MARCELLO L，ENZA L，F(xiàn)RANCESCO B，et al.Serotonin 5-HT7receptor agents：Structure-activity relationships and potential therapeutic applications in central nervous system disorders［J］.PHARMACOL THERAPEUT，2011，129（2）：120-148.

［27］ MEEUSEN R，THORRé K，CHAOULOFF F，et al.Effects of tryptophan and／or acute running on extracellular 5-HT and 5-HIAA levels in the hippocampus of food-deprived rats［J］.Brain Res，1996，740（1-2）：245-252.

［28］NEWSHOLOME E A.Application of knowledge of metabolic integration to the problem of metabolic limitations in middle distance and marathon running［J］.Acta Physiol Scand，1986，128 ［Suppl 556］：93-97.

［29］PITSILADISL Y P，STRACHANL A T，DAVIDSONL L，et al.Hyperprolactinaemia during prolonged exercise in the heat：evidence for a centrally mediated component of fatigue in trained cyclists［J］.Exp Physiol，2002，87（2）：215.

［30］ROBERTSON D A，BEATTIE J E，REID I C，et al.Regulation of corticosteroid receptors in the rat brain：the role of serotonin and stress［J］.Eur J Neurosci，2005，21（6）：1511-1520.

［31］SERRETTI A ，CALATI R，MANDELLI L，et al.Serotonin transporter gene variants and behavior：a comprehensive review［J］.Curr Drug Targets，2006，7（12）：1659-1669.