2013年1月6日,“高光學(xué)純度D-乳酸重組大腸桿菌的構(gòu)建及發(fā)酵工藝的研究”和“高產(chǎn)琥珀酸重組大腸桿菌的構(gòu)建及工業(yè)化關(guān)鍵技術(shù)的研究”項(xiàng)目通過了湖北省科技廳組織的成果鑒定。兩項(xiàng)科技成果均達(dá)到了國際先進(jìn)水平。
這兩項(xiàng)科技成果由湖北工業(yè)大學(xué)高層次人才科研啟動(dòng)資金資助?!案吖鈱W(xué)純度D-乳酸重組大腸桿菌的構(gòu)建及發(fā)酵工藝的研究”利用同源重組和位點(diǎn)特異性重組技術(shù),無痕敲除了野生型大腸桿菌蔗糖啟動(dòng)子抑制基因cscR和其它競爭性代謝產(chǎn)物的關(guān)鍵基因adhE、frdBC、pta、pflB、aldA,并通過厭氧馴化,獲得了D-乳酸厭氧發(fā)酵的大腸桿菌工程菌HBUT-D。建立了工程菌菌株高產(chǎn)D-乳酸的發(fā)酵及分離純化工藝,D-乳酸產(chǎn)量達(dá)到88.15 g·L-1,光學(xué)純度為99%。該項(xiàng)技術(shù)有助于環(huán)保型生物降解型材料的推廣使用,符合綠色低碳經(jīng)濟(jì)的發(fā)展方向。
“高產(chǎn)琥珀酸重組大腸桿菌的構(gòu)建及工業(yè)化關(guān)鍵技術(shù)的研究”利用同源重組和位點(diǎn)特異性重組技術(shù),無痕敲除了野生型大腸桿菌琥珀酸代謝競爭旁路的ldhA、adhE、pflB、poxB、ackA、mgsA、aspC和sfcA基因,獲得了高產(chǎn)琥珀酸大腸桿菌工程菌菌株,該菌株在厭氧條件下能利用工業(yè)廢棄玉米漿和葡萄糖結(jié)晶廢糖液生產(chǎn)琥珀酸,琥珀酸產(chǎn)量達(dá)到92g·L-1。該技術(shù)對我國生物基材料的開發(fā)利用及產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程具有重要的指導(dǎo)意義。