薛曉芳　李曼　王瑋文　邵楓

摘要：利用社會環(huán)境剝奪建立的精神分裂癥動物模型，是當前研究精神分裂癥神經(jīng)生物學機制的一個熱點課題。作為一種重要的早期社會剝奪方式，出生后至斷乳前的母嬰分離日益受到關注。文章綜合闡述了母嬰分離對嚙齒類動物行為及神經(jīng)發(fā)育影響的最新研究成果，表明母嬰分離可以部分模擬精神分裂癥的行為及中樞表現(xiàn)，證實了該模型的可行性；并進一步分析了影響實驗結(jié)果的各種相關因素，為今后采用該模型進行深入研究提供一定的理論支持。

關鍵詞：母嬰分離；動物模型；精神分裂癥

分類號：B845

精神分裂癥的“神經(jīng)發(fā)育假說”提出，早期環(huán)境影響個體中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育，從而對精神分裂癥的發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生重要影響（Ellenbroek，van den Kroonenberg，&Cools，1998）。因此，通過干擾早期生活環(huán)境，誘導動物產(chǎn)生與精神分裂癥癥狀相類似行為的建模方式日益受到重視。其中，剝奪新生大鼠的早期生活環(huán)境的母嬰分離方式已被證實能引起長期的行為及神經(jīng)發(fā)育改變，能夠較好地模擬精神分裂癥的認知與行為異常，因此該模型已成為精神分裂癥研究的有效工具，對了解精神分裂癥的神經(jīng)生物學機制及開發(fā)新型抗精神分裂癥藥物具有重要價值（Weiss，Domeney，Moreau，Russig，&Feldon，2001）。

1.母嬰分離

新生嚙齒類動物的社會環(huán)境是指新生幼仔與母親及同窩仔鼠的交互作用（Weiss et al.，2001）。母親和同窩仔鼠構(gòu)成了個體社會環(huán)境的重要成分，提供如營養(yǎng)、熱量、軀體感覺、動覺、嗅覺及聽覺刺激等重要資源（Pryce&Feldon，2003）。早期社會環(huán)境剝奪包括斷奶前（出生后1-21天）的早期干預（early handling，EH）和母嬰分離（maternal separation，MS）兩種方式：早期干預即每天短暫地分離母鼠和仔鼠（3-15分鐘）；而母嬰分離則將仔鼠和母親長時間地（1-24小時）分開。一般認為，前者的剝奪時間較短，等同于正常情況下母親離開巢穴覓食等行為的時間，因此沒有構(gòu)成嚴重的剝奪（Liu et al.，1997）；而后者的剝奪時間較長，可以代表嚴重的環(huán)境剝奪（weiss et al.，2001）。

研究表明，經(jīng)歷母嬰分離的動物表現(xiàn)出一系列的擬精神分裂癥行為如潛伏抑制缺失（Ellenbroek&Cools，1995）、前脈沖抑制缺失（Ellenbroek et al.，1998），且這些行為異常直至青春期后才表現(xiàn)出來，并可被抗精神分裂癥藥物所逆轉(zhuǎn)（Hafner，Maurer，Lofner，&Riecherrossler，1993）。因此母嬰分離是一種較為理想的誘導建立精神分裂癥動物模型的環(huán)境剝奪方式。

2.母嬰分離對動物行為的影響

2.1前脈沖抑制

驚反射是人與動物對于威脅刺激的一種迅速反應，對適應環(huán)境具有重要意義（李量，邵楓，2003）。驚反射的前脈沖抑制（prepulse inhibition，PPI）是指由出現(xiàn)在強的驚反射刺激之前一定時間內(nèi)的弱感覺刺激對驚反射所產(chǎn)生的抑制作用（Hoffman&Ison，1980；李量，邵楓，2003）。Braff等人首先證明，在某些精神分裂癥病人中存在PPI缺失的現(xiàn)象（Braft et al.，1978；李量，邵楓，2003）。Ellenbroek等（1998）的研究表明，母嬰分離對PPI的影響具有延遲效應，即母嬰分離的雄性或雌性大鼠均表現(xiàn)出PPI的顯著降低，但這一異常只在青春期之后（69天）才表現(xiàn)出來，而青春期之前（34天）的前脈沖抑制表現(xiàn)正常，這種現(xiàn)象與精神分裂癥病人的臨床表現(xiàn)具有相似性；此外，母嬰分離所導致的PPI的降低可以被抗精神分裂癥藥物所逆轉(zhuǎn)（Ellenbroek et al.，1998）。進一步的研究表明，母嬰分離對PPI的影響依賴于不同的遺傳背景，母嬰分離能誘導Wistar大鼠的PPI降低，但不影響Fisher 344和Lewis大鼠的PPIfEllenbroek&Cools，2000）；此外，母嬰分離對PPI的效應因前脈沖測驗范式參數(shù)的不同而有差異，如研究表明，出生后第9天的24小時母嬰分離能誘發(fā)成年大鼠PPI的顯著降低，但這種效應僅出現(xiàn)在前脈沖刺激（prepulse）與驚嚇刺激（pulse）間隔50-100ms時，當兩者間隔時間更長（250-1000ms）時，母嬰分離對PPI的影響消失（Ellenbroek，et al.，2004）。

2.2潛伏抑制

潛伏抑制（1atent inhibition，LI）現(xiàn)象普遍存在，是指反復前呈現(xiàn)一種刺激而不進行強化，與非前呈現(xiàn)的對照組相比，前呈現(xiàn)對隨后該刺激的條件化學習造成干擾的現(xiàn)象（Lehmann et al.，1998）。Gray等（1995）綜合多個研究得出結(jié)論：LI缺失是人類精神分裂癥陽性癥狀的特征之一，它與腦內(nèi)多巴胺活性的增高密切相關。目前為止，關于母嬰分離影響LI的研究沒有得出一致的結(jié)果，如Ellenbroek和Cools（1995）研究表明，斷奶前的母嬰分離可引起利用厭惡性條件化范式測定的LI缺失；而Feldon等人利用一系列母嬰分離程序（新生第12，14，16，18天每天6小時或出生1-21天每天4小時母嬰分離）以及3種不同的條件化范式（雙向主動逃避、條件化情感反應、條件化味覺厭惡）進行的研究均得出一致結(jié)果表明，母嬰分離組動物的LI現(xiàn)象顯著強于對照組動物（Lehmann，Stohr，&Feldon，2000；Lehmann et al.，1998；Weiss et al.，2001），，因此，Weiss等認為，母嬰分離導致LI提高是更為可靠的行為結(jié)果（Weiss et al.，2001）。

2.3逆反學習能力（Reversal learning）

由早期不利環(huán)境因素引起的認知損傷還包括行為靈活性等方面的障礙（Oitzl，et al，2000）。研究者利用水迷宮范式探索了母嬰分離對逆反學習能力即行為靈活性造成的影響。水迷宮范式是采用分為4個象限的注水圓池，首先將大鼠要探測的平臺置于某一固定象限，經(jīng)過若干訓練后將平臺置于對角象限，觀察大鼠找到平臺的時間及其他指標對大鼠進行訓練。利用Brown Norway大鼠進行的研究表明，出生后第3天進行的24小時母嬰分離能引起成年大鼠（12個月）逆反學習能力的損傷（Oitzl et al.，2000）；此外，與對照組動物相比，出生后第8天的CD1小鼠被給予24小時母嬰分離后，在6個月時同樣表現(xiàn)出適應新環(huán)境時的行為靈活性降低（Enthoven，de Kloet，&Oitzl，2008）。但是，Lehmann的研究表明，出生后第4天、第9天或第18天分別進行的24小時的母嬰分離可引起成年Wistar大鼠的逆反學習能力的顯著提高（Lehmann，Pryee，Bettschen，&Feldon，1999）。

2.4空間學習能力（spatial learning）

已有研究表明早期母嬰分離損傷了成年大鼠（90天）的空間學習能力（Garner et al.，2007；Oitzl et al.，2000）；而另一項研究發(fā)現(xiàn)，母嬰分離對動物空間學習能力的影響依賴于不同的年齡。在青春期之前（22-24天），母嬰分離大鼠的空間學習能力受到了損傷，而在成年期（92-94天）這種損傷不僅被逆轉(zhuǎn)而且母嬰分離組動物的空間學習能力優(yōu)于對照組（Frisone，F(xiàn)rye，&Zimmerberg，2002）。Oitzl等（2000）利用Brown Norway大鼠進行的縱向研究表明，在大鼠的衰老期（30-32個月），母嬰分離并沒有引起普遍的空間學習能力下降，僅僅造成了隔離組內(nèi)個體差異的擴大。

2.5焦慮樣行為

利用曠場（open field）范式進行的研究發(fā)現(xiàn)，給予某些抗抑郁和抗焦慮藥物后嚙齒類動物進入曠場中心區(qū)域的時間增加（Borsini，Podhorna，&Marazziti，2002；Prut&Belzung，2003），因此研究者認為，對中心區(qū)域的回避反映了在新異環(huán)境中焦慮或應激水平的提高（Gregus et al.，2005；Jaworska，Dwyer&Rusak，2008；Ramos&Mormede，1998）。母嬰分離的研究結(jié)果表明，與對照組動物相比，出生后第9天被給予24小時母嬰分離的Wistar大鼠及出生后前2周，3-5小時/天母嬰分離的SD大鼠在成年階段都表現(xiàn)出中心區(qū)域停留時間的顯著降低，提示焦慮水平的顯著增加（Lambas-Sefias et al.，2009；Rentesi et al.，2010；Rees，Steiner，F(xiàn)leming，2006）；此外，對于雌性動物而言，母嬰分離對動物焦慮樣行為的影響與其發(fā)情周期密切相關（Romeo et al.，2003），即雌性激素水平與母嬰分離對焦慮樣行為影響之間存在交互作用。如蒙古沙鼠的研究發(fā)現(xiàn)，母嬰分離的雌性動物在發(fā)情期時的焦慮水平顯著高于對照組（Jaworska et al.，2008），；但對于處于發(fā)情間期的雌性C57BL/6小鼠，母嬰分離動物的焦慮水平低于對照組動物（Romeo et al.，2003）。

2.6攻擊行為

關于攻擊行為的研究表明，與對照組動物相比，出生后1-14天、3小時/天的母嬰分離能誘發(fā)青少年雄性Wistar大鼠的玩耍，打斗行為（play-fighting）及成年期攻擊行為的顯著增加（Veenema，2009）。母嬰分離的大鼠表現(xiàn)出對陌生入侵者頸后部的攻擊次數(shù)顯著增加，攻擊性拖和咬的頻率顯著升高，而表示順從的游戲行為頻率顯著降低（veenema&Neumann，2009）。在成年期的居留者，入侵者測試（resident-intruder test）中，母嬰分離成年雄性Wistar大鼠的攻擊行為顯著高于對照組動物（veenema，et al，2006）。這些結(jié)果表明，母嬰分離可引起雄性大鼠攻擊行為增加（Veenema，2009）。然而，母嬰分離對攻擊行為的影響同樣具有種屬差異，與雄性Wistar大鼠不同，雄性C57BL/6小鼠的母嬰分離組動物的攻擊性行為的潛伏期顯著長于對照組動物（veenema，Bredewold&Neumann，2007）。

3.母嬰分離對神經(jīng)發(fā)育的影響

3.1母嬰分離對神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)的影響

3.1.1多巴胺系統(tǒng)

大量研究已證實了精神分裂癥與腦內(nèi)多巴胺系統(tǒng)的關系，多巴胺受體拮抗劑能被用來緩減精神分裂癥的癥狀，而多巴胺受體的激動劑苯丙胺能誘發(fā)某些類似精神分裂癥的精神癥狀，多巴胺模型也是研究得最早和最廣泛的一個擬精神分裂癥動物模型（李量，邵楓，2003）。母嬰分離的研究表明，與對照組動物相比，母嬰分離大鼠對多巴胺激動劑安非他明及阿撲嗎啡的行為反應顯著增高（Brake et al.，2004；Rots et al.，1996）；此外，注射安非他明后，母嬰分離大鼠的腦內(nèi)伏隔核多巴胺的釋放量亦顯著高于對照組（Hall et al.，1999）。關于母嬰分離對中腦邊緣多巴胺系統(tǒng)影響的研究表明，母嬰分離大鼠的伏隔核內(nèi)多巴胺代謝產(chǎn)物高香草酸（HVA）水平顯著高于對照組動物（Arborelius&Eklund，2007）；而對于多巴胺的黑質(zhì)紋狀體系統(tǒng)，母嬰分離顯著提高黑質(zhì)內(nèi)酪氨酸羥化酶的mRNA水平（Rots et al.，1996），并可導致可卡因引起的腹側(cè)紋狀體多巴胺釋放量的顯著增加（Kosten，Zhang，&Kehoe，2003）。

中腦-皮層-邊緣多巴胺系統(tǒng)的伏隔核是連接前腦和邊緣結(jié)構(gòu)（控制認知和行為）的關鍵性皮層下腦區(qū)，分布著從海馬、內(nèi)側(cè)前額葉皮層、杏仁體、扣帶回的谷氨酸能纖維，以及腹側(cè)被蓋的多巴胺能纖維，處理與情感和認知有關的信息，與精神分裂癥的發(fā)生密切相關（Biorklund&Dunnett，2007）。大量研究已證實，伏隔核內(nèi)多巴胺系統(tǒng)的主要作用在于保證行為靈活性，即根據(jù)環(huán)境變化而相應地調(diào)整行為反應，從而在潛伏抑制和逆反學習的神經(jīng)機制中發(fā)揮關鍵性作用（Floresco，Zhang，&Enomoto，2009；邵楓，王瑋文，劉美，金睞，2008）。因此母嬰分離對潛伏抑制和逆反學習的影響可能是通過干擾中腦伏隔核多巴胺系統(tǒng)的功能而實現(xiàn)的。

3.1.25-羥色胺系統(tǒng)

臨床研究證實，精神分裂癥患者表現(xiàn)出腦內(nèi)5-羥色胺（5-hydoxytryptomine，5-HT）代謝異常（金睞，王瑋文，劉美，邵楓，2009）。母嬰分離的研究證實，早期母嬰分離可引起大鼠腦內(nèi)5-HT系統(tǒng)及其相關分子發(fā)生改變（Vazquez et al.，2002）。例如，與對照組動物相比，母嬰分離的大鼠在青春期之前（35天）表現(xiàn)出前額葉、紋狀體、中腦和海馬內(nèi)5-HT含量的顯著增加，但這幾個腦區(qū)內(nèi)的5-HT代謝率（5-HIAA/5-HT ratios）不存在顯著差異（Llorente et al.，2010）；早期母嬰分離僅引起成年大鼠下丘腦內(nèi)5-HT代謝率提高，但對海馬內(nèi)5-HT代謝率沒有顯著影響（Hafner et al.，1993）；母嬰分離大鼠的海馬CAl區(qū)5-HT1A受體和5-HT1B受體水平均顯著升高（vazquez et al.，2002）；對于老年的Brown Norway大鼠，母嬰分離組動物的海馬CA1及CA3區(qū)內(nèi)5-HT1A受體mRNA水平也顯著高于對照組動物（Sibug，Oitzl，Workel，&de Kloet，2001）。由此可見，母嬰隔離可導致大鼠腦內(nèi)5-HT的活動增強，這與臨床研究相一致（譚立文，陳曉崗，李樂華，廖衛(wèi)平，2001；Schiller，Zuckerman，&Weiner，2006）。

研究表明，在出生后的發(fā)育過程中，5-HT系統(tǒng)對腦內(nèi)調(diào)節(jié)焦慮的神經(jīng)回路的建立具有重要作用（GrOSS&Hen，2004）。經(jīng)過出生后2-15天，3h/天的母嬰隔離后，SD大鼠表現(xiàn)出高焦慮樣行為，并且下丘腦對5-HT1A受體激動劑8-OH-DPAT的反應增高（Lambas-Sefias et al.，2009）；與此相一致，采用出生后第9天24h單一隔離的方法處理的大鼠同樣表現(xiàn)出大鼠焦慮水平及下丘腦5-HT活動增強（Rentesi et al.，2010）。因此，母嬰隔離這一動物模型可以較好地模擬精神分裂癥引起的5-HT變化以及與之相關的焦慮樣行為。

3.2母嬰分離對腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子的影響

神經(jīng)營養(yǎng)因子對神經(jīng)元的生存和分化、突觸的可塑性以及形態(tài)維持發(fā)揮重要作用。精神分裂癥患者大腦組織的尸檢結(jié)果證實海馬及前額葉內(nèi)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（Brain-derived neurotrophicfactor，BDNF）水平發(fā)生變化（Durany et al.，2001；Issa，Wilson，Terry，&Pillai，2010）。母嬰分離的研究結(jié)果表明，早期母嬰分離可引起小鼠前額葉、紋狀體內(nèi)BDNF水平（Ognibene et al.，2008）以及海馬內(nèi)BDNF mRNA水平、BDNF蛋白水平的顯著降低（Roceri，Hendriks，Racagni，Ellenbroek，&Riva，2002）。進一步的研究發(fā)現(xiàn)，母嬰分離對腦內(nèi)BDNF的影響與動物的年齡階段密切相關。例如，在出生后第10-15天被給予3小時/天母嬰分離的大鼠，第16天時，母嬰分離組動物的海馬內(nèi)BDNF mRNA水平顯著低于對照組；第20天時，海馬內(nèi)BDNF mRNA水平在兩組間無顯著性差異：而在第30天和第60天，實驗組動物的海馬內(nèi)BDNF mRNA水平則顯著高于對照組（Kuma et al.，2004）。而Roceri等的另一項研究則表明，出生后第2-14天的母嬰分離能引起17天大鼠的海馬及前額葉內(nèi)BDNF mRNA水平的顯著升高；但到35天時，實驗組與對照組間無顯著性差異：而至成年期（90天）時，母嬰分離組大鼠的前額葉內(nèi)BDNF mRNA水平顯著低于對照組（Mita Roceri et al.，2004）。上述兩個實驗得出的結(jié)論并不一致，比較可以發(fā)現(xiàn)，首先兩者采取的隔離方式并不一致，Kuma等人對大鼠進行隔離的時間較短，而且是出生后一段時間才給予隔離，而對BDNF測量的時間包含青春期這一重要發(fā)育時間段。由于大部分母嬰分離模式采用的是出生后1-2周進行的長時程隔離模式，所以我們認為Roceri等人的研究更有代表性，對于母嬰隔離對大鼠各個年齡段腦內(nèi)BDNF的影響及其變化趨勢還需要進一步的研究。

已知BDNF作為神經(jīng)營養(yǎng)因子參與了神經(jīng)元的增殖、分化及營養(yǎng)等作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，BDNF在中腦多巴胺系統(tǒng)神經(jīng)元的出生后發(fā)育和突觸可塑性方面發(fā)揮更為重要的作用。如出生后早期的BDNF干預（增強或抑制）可相應調(diào)節(jié)中腦多巴胺神經(jīng)元的發(fā)育（Oo et al.，2009）。因此母嬰分離導致BDNF的變化可能參與調(diào)節(jié)了其所誘發(fā)的行為和神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)發(fā)育異常的中樞機制。

3.3母嬰隔離對神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響

母鼠在調(diào)節(jié)仔鼠對應激的反應性方面發(fā)揮重要作用（Rosenfeld，Suchecki，&Levine，1992）。Cirull等人提出，母鼠對仔鼠的下丘腦一垂體，腎上腺軸（Hypothalamic-pituitary-adrenal axis，HPA軸）反應可能產(chǎn)生顯著的抑制性影響（cirulli et al.，2009）。大量研究表明，在成年期可以引起腎上腺皮質(zhì)強烈反應的刺激在新生大鼠的某個時期所引起的反應顯著降低，這一時期被稱為應激低反應期（stress hyporesponsive period，SHRP）（Rosenfeld et al.，1992；Sapolsky&Meaney，1986）。在應激低反應期，新生大鼠對某種刺激同樣可以分泌促腎上腺皮質(zhì)激素，但即使在高水平的促腎上腺皮質(zhì)激素刺激下，腎上腺皮質(zhì)酮的分泌仍表現(xiàn)出最低水平（Rosenfeld et al.，1992）。雖然構(gòu)成大鼠應激低反應期的機制尚不清楚，但研究已證實，應激低反應期大約從新生第4天開始持續(xù)到第14天。由于下丘腦-垂體-腎上腺系統(tǒng)沒有完全成熟且受到抑制性加工，因此這個時期仔鼠血液中的皮質(zhì)酮處于較低且穩(wěn)定的狀態(tài)（Cirulli et al.，2009；Rosenfeld et al.，1992）。

母鼠至少通過兩種方式調(diào)節(jié)仔鼠HPA軸的反應性：維持HPA軸對外界刺激的“不反應”狀態(tài)：或者抑制已經(jīng)激活的HPA軸活性（cimlli et al.，2009）。母鼠對應激反應的抑制效應可以通過去除抑制的來源即母嬰分離得以證實。如研究表明，將幼鼠與其母鼠分離8或24小時后，與對照組相比，母嬰分離組幼鼠的皮質(zhì)酮基線水平及對應激反應的皮質(zhì)酮水平均顯著增高（Stanton，Gutierrez，&Levine，1988），進一步研究證實，這一效應可持續(xù)至青少年（Veenema&Neumann，2009）甚至成年（Rots et al.，1996；Sutanto，Rosenfeld，deKloet，&Levine，1996）。此外，與對照組動物相比，母嬰分離組大鼠還表現(xiàn)出促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）的基線水平增高（Rentesi et al.，2010；Rots et al.，1996）；海馬各亞區(qū)內(nèi)糖皮質(zhì)激素受體表達、糖皮質(zhì)激素受體mRNA水平、鹽皮質(zhì)激素受體以及下丘腦室周核及垂體糖皮質(zhì)激素受體mRNA水平的顯著降低（sutanto et al.，1996）。Meaney等的研究同樣指出，出生后兩周每天3-6小時的母嬰分離可引起血清皮質(zhì)酮和促腎上腺皮質(zhì)激素水平的顯著提高，以及海馬和下丘腦內(nèi)糖皮質(zhì)激素與其受體的結(jié)合下降（Plotsky&Meaney，1993）。研究表明青少期時隔離組大鼠應對壓力時的皮質(zhì)酮反應較對照組低，而到成年時無差異（Rees et al，2006）。綜上，母嬰分離可以導致仔鼠對應激反應的異常，但研究結(jié)果還具有不一致性，其中仔鼠性別及隔離時間的不同可能是導致這些不一致的原因。因此若想得出更具說服力的結(jié)論，在后續(xù)試驗中應嚴格控制這些因素。

4.影響母嬰分離研究結(jié)果的因素分析

綜上所述，母嬰分離能夠誘發(fā)動物長期的行為及神經(jīng)發(fā)育異常，而且這些改變可以在一定程度上模擬精神分裂癥的認知功能障礙和神經(jīng)生物學的發(fā)病機制。但上述研究結(jié)果中存在一定的不一致性，造成這些不一致結(jié)果的因素主要包括以下幾個方面。

4.1母嬰分離的頻率和持續(xù)時間

不同實驗研究之間母嬰分離的頻率和持續(xù)時間存在很大差異，或是在斷奶前（21天）的某一天（通常為第9天）進行單一24小時母嬰分離，或是在連續(xù)幾天內(nèi)進行每天幾小時（3～6小時）的重復母嬰分離（Lehmann et al.，2000），不同頻率和持續(xù)時間的母嬰分離可能產(chǎn)生不同的影響。例如，在分離時間相同的情況下，母嬰分離的頻率對仔鼠行為產(chǎn)生不同程度的影響。出生后第9天單獨24小時的母嬰分離對Wistar大鼠的PPI產(chǎn)生微弱的影響（Ellenbroek et al.，1998），，而出生后第9天和第11天每天12小時的母嬰分離則嚴重干擾Wistar大鼠的PPI和空間學習記憶功能（Garner et al.，2007），提示分離頻率越高，對行為和神經(jīng)發(fā)育的影響可能越大。

同樣，在相同的發(fā)育階段，持續(xù)時間不同的母嬰分離對動物的行為也產(chǎn)生不同的影響。例如，Roman等觀察了出生后1-21天每天6小時和15分鐘的母嬰分離對Wistar大鼠的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與15分鐘的母嬰分離組動物相比，每天6小時的母嬰分離組動物表現(xiàn)出更為顯著的探究行為和冒險行為（Roman et al.，2006）。因此持續(xù)時間較長的母嬰分離可能誘發(fā)更為顯著的行為異常。

4.2母嬰分離的社會剝奪程度

一般而言，母嬰分離的社會剝奪分為兩種：一種是在母嬰分離過程中，仔鼠僅與母親分開，但仍與同窩仔鼠在一起（部分社會剝奪）（Ellenbmek et al.，1998，）；另一種是同時與母親及同窩仔鼠分開被單獨隔離（完全社會剝奪）（Weiss et al.，2001），，由此造成了母嬰社會剝奪強度的差異。Weiss等人指出，完全社會剝奪可能引起更大程度的發(fā)育改變。Stephanie L.等人的實驗證實了完全社會剝奪的大鼠在壓力反應測驗時皮質(zhì)酮的反應顯著低于部分社會剝奪的大鼠（Rees et al.，2006）。

4.3母嬰分離的起始時間

在不同的實驗研究中，不僅母嬰分離的頻率和持續(xù)時間不同，母嬰分離的開始時間和結(jié)束時間也不完全相同（Weiss et al.，2001）。而正如前所述，大鼠斷奶前的發(fā)育過程中存在應激低反應期（SHRP）（Rosenfeld et al.，1992；Sapolsky&Meaney，1986），因此在大鼠發(fā)育的不同階段進行母嬰分離成為研究的另一個重要變量（Lehmann et al.，1999）。例如，出生后15-21天進行母嬰分離可引起空間學習能力損傷，但在出生后2到7天進行相同程序的母嬰分離沒有造成空間學習能力損傷（Frisone et al.，2002）。PPI的研究結(jié)果表明，出生后第9天（SHRP中期）的單一24小時母嬰分離可干擾大鼠的PPI，但是在第13天（SHRP末期）的單一24小時母嬰分離則不產(chǎn)生影響（Ellenbroek&Cools，2002）；若在出生后第3、6、9天分別進行24小時母嬰分離，結(jié)果表明在應激低反應期（第6天和第9天）進行的母嬰分離對PPI的影響更大（Ellenbroek et al.，1998），即母嬰分離對PPI的長期影響存在一個關鍵的時間范圍（Ellenbroek&Cools，1998）。以上研究結(jié)果提示，不同發(fā)育階段的母嬰分離對不同的認知行為產(chǎn)生不同的影響，因此分離處理的時間點是造成眾多研究結(jié)果不一致的重要因素。

4.4母鼠的影響

研究表明，哺乳時期的母鼠與幼鼠間存在相互影響（Liu，Diorio，Day，F(xiàn)rancis，&Meaney，2000；Liu et al.，1997）。Ellenbroek等利用half litterprocedure（每窩動物中一半分離，留下一半和母鼠在一起），即隔離期的母鼠有仔鼠可以哺育，這種研究范式對母鼠的影響較小，結(jié)果表明，half litter procedure引起的仔鼠PPI降低的效應介于對照組和完全母嬰分離組之間，提示母鼠的行為也受到了隔離的影響（Ellenbroek&Cools，2002）。此外，交叉飼養(yǎng)的研究結(jié)果表明，沒有經(jīng)過母嬰分離的仔鼠如果被經(jīng)過母嬰分離的母鼠哺育后同樣表現(xiàn)出成年期的PPI改變，這一研究結(jié)果進一步證實，母嬰分離的最終結(jié)果不僅取決于其對仔鼠造成的影響同樣依賴于其對母鼠的影響（Ellenbroek&Cools，2002）。

4.5溫度

母嬰分離不僅剝奪了母愛行為同時也剝奪了母鼠對仔鼠的保溫作用（Weiss&Feldon，2001），因此母嬰分離期間溫度的控制是一個重要的因素。已有研究表明，分離期間的不同溫度對仔鼠腦內(nèi)多巴胺系統(tǒng)的發(fā)育有重要影響（zimmerberg&Shartrand，1992）。例如，與對照組相比，早期在巢穴溫度下進行母嬰分離的大鼠，成年時對安非他明的敏感性更低；而在室溫下進行母嬰分離的大鼠，成年時對安非他明的敏感性則更高（zimmerberg&Shartrand，1992）。為避免分離期間溫度差異對實驗研究的影響，目前大部分的研究將分離期間仔鼠獲得的溫度控制在25-33℃之間（Weiss&Feldon，2001）。

4.6遺傳因素

母嬰分離對行為及神經(jīng)發(fā)育的影響同樣依賴于不同的遺傳背景。在PPI的研究中，Ellenbroke等人的研究指出，母嬰分離可引起Wistar大鼠的PPI顯著降低，但不影響Fischer 344，Lewis及SD大鼠的PPI（Weiss et al.，2001；Ellenbroek&Cools，2000）。同時，母嬰分離亦導致Wistar大鼠對阿撲嗎啡的敏感性提高以及Fischer大鼠對阿撲嗎啡的敏感性降低，但不影響Lewis對阿撲嗎啡的敏感性（Ellenbroek&Cools，2000）。由于精神分裂病人同時表現(xiàn)出PPI的降低和對阿撲嗎啡敏感性的提高，所以Ellenbroke等人認為，相比Fischer 344和Lewis品系，Wistar大鼠可能是更適合于作為精神分裂癥動物模型研究的品系（Ellenbroek&Cools，2000）。

5.小結(jié)與展望

綜合以上研究資料，精神分裂癥的母嬰分離動物模型可以部分地模擬精神分裂癥的行為和中樞表現(xiàn)，有望用于精神分裂癥的癥狀治療研究。但該模型仍不能完全模擬精神分裂癥的行為及中樞發(fā)育異常。且諸如母嬰分離的時間點、持續(xù)時間、分離期間仔鼠所處的環(huán)境溫度、被試的品系等對實驗結(jié)果也有不同程度的影響。因此在今后的實驗中還應該嚴格控制實驗條件，使該模型能更好的模擬精神分裂癥，從而在心理、行為、系統(tǒng)、細胞、和基因幾個水平上將精神分裂癥社會隔離動物模型的研究發(fā)展到一個新的階段。