繆 霞 杭州市第一人民醫(yī)院 杭州 310006

吳曉云 杭州市第三人民醫(yī)院

·藥學(xué)園地·

不同產(chǎn)地白術(shù)中六六六和滴滴涕殘留的測定

繆 霞 杭州市第一人民醫(yī)院 杭州 310006

吳曉云 杭州市第三人民醫(yī)院

白術(shù) 六六六 滴滴涕 有機(jī)氯 氣相色譜

白術(shù)Atractylodes Macrocephala Koidz.是浙江著名道地藥材“浙八味”之一，具有健脾益氣，燥濕利水的功效[1]，臨床使用廣泛，有“北參南術(shù)”之稱，全國各地廣為栽培。上世紀(jì)八、九十年代廣泛使用六六六、滴滴涕使部分地區(qū)土壤中的殘留量較高，因此一些中藥材中常常存在六六六、滴滴涕殘留含量超標(biāo)現(xiàn)象[2-4]。六六六、滴滴涕有致畸、致癌作用，危害較大。本文收集了12個(gè)不同產(chǎn)地的白術(shù)藥材，以氣相色譜法測定六六六、滴滴涕的含量，為白術(shù)藥材的農(nóng)藥殘留控制研究提供參考依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器與試劑 Agilent 6890氣相色譜儀，配Ni63電子捕獲檢測器（ECD）；α-666、β-666、γ-666、δ-666、ρ，ρ’-DDD、ρ，ρ’-DDE、o，ρ’-DDT和ρ，ρ’-DDT對照品標(biāo)準(zhǔn)溶液，批號分別為GBW-060081、GBW060082、GBW060083、GBW060084、GBW060105、GBW060104、GBW060103、GBW060102，濃度均為0.1mg/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心；石油醚（60～90℃，重蒸，分析純）；濃硫酸（分析純）。

1.2 藥 材 共收集了浙江臨安、浙江文成、浙江淳安、浙江東陽、浙江嵊縣、浙江新昌、浙江磐安、安徽亳州、四川雅安、福建柘榮、河北安國、江西修水十二個(gè)產(chǎn)地的白術(shù)樣品，均經(jīng)杭州市藥品檢驗(yàn)所郭怡飆主任中藥師鑒定為菊科植物白術(shù) Atractylodes Macrocephala Koidz.的干燥根莖。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：HP-5毛細(xì)管氣相色譜柱（0.32mm×30m×0.25μm）；載氣：氮?dú)?；流速?mL/min；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣口溫度：250℃；檢測器：Ni63電子捕獲檢測器（ECD）；ECD尾吹：15ml/min；ECD溫度：300℃；柱溫：初始100℃，10℃/min升至220℃，220℃保持20min；進(jìn)樣2μL。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 取對照品標(biāo)準(zhǔn)溶液，用石油醚配制成各對照品濃度分別為α、γ、δ-666：50μg/L、β-666、ρ，ρ’-DDD、ρ，ρ’-DDE、o，ρ’-DDT、ρ，ρ’-DDT：100μg/L的混合對照品溶液。用石油醚稀釋上述混合對照品溶液至一系列濃度，按2.1色譜條件測定，以對照品濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程，結(jié)果見表1。對照品溶液測定色譜圖見圖1所示，各對照品分離良好。

圖1 對照品色譜圖Fig 1 Chromatogram of standard1.α-666；2.β-666；3.γ-666；4.δ-666；5.ρ，ρ’-DDE；6.ρ，ρ’-DDD；7.o，ρ’-DDT；8.ρ，ρ’-DDT

2.3 精密度試驗(yàn) 混合對照品溶液稀釋5倍的對照品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算各對照品峰面積的RSD，結(jié)果見表1。

2.4 檢測限測定 取未檢出六六六、滴滴涕殘留的白術(shù)藥材供試品液，加入各不同濃度的對照品溶液，以信噪比為3的色譜峰作為檢測限量，以樣品提取方法中的取樣量和定容體積計(jì)算本法檢測限，結(jié)果見表1。

2.5 回收率試驗(yàn) 精密稱取未檢出六六六、滴滴涕殘留的白術(shù)藥材粉末2g，加入混合對照品溶液稀釋5倍的對照品溶液5.0ml，揮干，按樣品制備方法制備加標(biāo)樣品供試品液，按法測定，計(jì)算回收率，平行6份，結(jié)果見表1。

2.6 樣品溶液的制備與測定[5]精密稱取粉碎后過5號篩的白術(shù)粉末2g，加石油醚20mL，振蕩30min，濾過，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，轉(zhuǎn)移至10mL刻度試管中，石油醚定容至5mL。加入0.5mL濃硫酸凈化，漩渦混旋器混旋0.5min，10 000r/min離心5min，取上清液按2.1色譜條件測定。測定結(jié)果見表2。

表1 方法學(xué)考察結(jié)果

表2 不同產(chǎn)地白術(shù)六六六、滴滴涕殘留檢測結(jié)果 μg/kg

3 結(jié)論

本文采用GC-ecd法檢測白術(shù)中六六六、滴滴涕的含量方法操作簡單，結(jié)果可靠，可作為同類中藥材六六六、滴滴涕殘留量的檢測方法。

《中華人民共和國藥典》（2010年版一部）中對白術(shù)并未限定六六六、滴滴涕的含量，參考甘草、黃芪的限量指標(biāo)0.2mg/kg，本文所測的12批次白術(shù)藥材六六六、滴滴涕含量均未超標(biāo)，其中3批次未檢出六六六、滴滴涕，其余均有檢出六六六，其中2批次檢出滴滴涕。六六六、滴滴涕在我國已經(jīng)禁止生產(chǎn)和使用多年，但在土壤和水分中還有部分殘留，在生長過程中植物細(xì)胞內(nèi)可能得到富集。雖然本文所測12批次白術(shù)藥材六六六、滴滴涕含量均未超標(biāo)，但也需注意監(jiān)控，所測數(shù)據(jù)可作為相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)制定的參考。

［1］浙江食品藥品監(jiān)督管理局.浙江省中藥炮制規(guī)范［M］.杭州：浙江科學(xué)技術(shù)出版社，2005：33.

［2］粟華生，邱莉，周堅(jiān)，等.SPE-GC-ECD法測定人參藥材中21種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量［J］.藥物分析雜志，2010，30（8）：1484.

［3］王希堯，田春蓮，鄢景森，等.GC測定細(xì)辛藥材中的農(nóng)藥殘留量［J］.中國藥房，2011，22（31）：2947.

［4］周長征，楊春澍，王嘉琳.氣相色譜法測定細(xì)辛道地藥材中有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量［J］.中國中藥雜志，1998，23（10）：588.

［5］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）［S］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：附錄IX Q.

2013-04-20