脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與短暫性腦缺血發(fā)作患者頸動(dòng)脈不穩(wěn)定粥樣斑塊的關(guān)系

遲海濤 金 蕊 叢 博 白 鷹

（大連大學(xué)附屬新華醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，遼寧 大連 116021）

脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與短暫性腦缺血發(fā)作患者頸動(dòng)脈不穩(wěn)定粥樣斑塊的關(guān)系

遲海濤 金 蕊 叢 博 白 鷹

（大連大學(xué)附屬新華醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，遼寧 大連 116021）

目的探討脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（Lp-PLA2）與短暫性腦缺血發(fā)作（TIA）患者頸動(dòng)脈不穩(wěn)定粥樣斑塊的關(guān)系。方法本研究通過對(duì)入組的TIA患者及對(duì)照者進(jìn)行頸動(dòng)脈彩色多普勒超聲檢查，采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)血漿Lp-PLA2水平。結(jié)果短暫性腦缺血發(fā)作患者頸動(dòng)脈不穩(wěn)定粥樣斑塊組Lp-PLA2水平高于穩(wěn)定粥樣斑塊組及無斑塊組（P＜0.05）。（P＜0.01）。結(jié)論血清Lp-PLA2是評(píng)價(jià)短暫性腦缺血發(fā)作的危險(xiǎn)因素的生物學(xué)指標(biāo)之一，檢測(cè)血清Lp-PLA2可以評(píng)價(jià)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性。

脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2；短暫性腦缺血發(fā)作；頸動(dòng)脈不穩(wěn)定粥樣斑塊

目前，對(duì)于短暫性腦缺血發(fā)作（TIA）來說，微栓子形成學(xué)說有重要地位。動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定，即斑塊糜爛、潰瘍、破裂是微栓子的重要來源。而炎癥在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生過程中起到的作用已得到充分的證實(shí)，有研究證實(shí)，脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2可以預(yù)測(cè)冠心病的風(fēng)險(xiǎn)及預(yù)后，而本研究的目的是探討Lp-PLA2與TIA患者頸動(dòng)脈不穩(wěn)定粥樣斑塊的關(guān)系，為該病的防治提供新的思路。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

收集2012～2013年間大連大學(xué)附屬新華醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院患者102名，所選病例診斷符合2002年美國TIA工作組提出的短暫性腦缺血發(fā)作標(biāo)準(zhǔn)。均經(jīng)詳細(xì)的神經(jīng)系統(tǒng)檢查及MRI等檢查確診。所有患者均具有頸動(dòng)脈系統(tǒng)短暫性腦缺血發(fā)作的臨床特征。除外椎-基底動(dòng)脈系統(tǒng)的短暫性腦缺血發(fā)作，排除動(dòng)脈炎、先天發(fā)育異常、糖尿病性、血液成分及血液流變學(xué)所致的短暫性腦缺血發(fā)作及合并有冠心病、外周血管病，嚴(yán)重的肝腎功能損害，免疫系統(tǒng)疾病，嚴(yán)重的感染，發(fā)病前2個(gè)月有手術(shù)及外傷史的患者。根據(jù)頸動(dòng)脈彩色多普勒超聲結(jié)果分為：無斑塊組34人（男16人，女18人）、穩(wěn)定性粥樣斑塊組34人（男20人，女14人）、不穩(wěn)定粥樣斑塊組34人（男18人，女16人）。

對(duì)照組年齡、性別與短暫性腦缺血發(fā)作組相匹配，經(jīng)病史詢問既往無腦血管病病史，且經(jīng)過頭顱MRI證實(shí)無卒中的健康體檢者34人（男16人，女18人）。

1.2 方法

1.2.1 Lp-PLA2的測(cè)定：美國ADL公司提供的人Lp-PLA2，所有研究對(duì)象于清晨空腹采集肘靜脈血3毫升，ELISA定量檢測(cè)試劑盒，操作流程按試劑盒說明書進(jìn)行。

各組于病程（對(duì)照組可在安靜狀態(tài)下采血）第3天空腹采血3mL，用EDTA作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30min內(nèi)于2～8℃ 1000 g離心15min，分離上血清液，置于Ep管。統(tǒng)一編號(hào)保存將標(biāo)本放于-80℃保存。為減小批間誤差和測(cè)量誤差，全部標(biāo)本采集完成后一次性成批檢測(cè)。

表1 各組研究對(duì)象一般資料（χ—±s）

1.2.2 彩色多普勒超聲檢查：應(yīng)用美國GE公司VIVID3型彩色多普勒超聲診斷儀，7.5～10.0MHz探頭，對(duì)所有研究對(duì)象進(jìn)行檢查。檢查內(nèi)容包括血管解剖形態(tài)、內(nèi)膜情況、有無斑塊、斑塊回聲性質(zhì)及大小、管腔是否狹窄及狹窄程度。根據(jù)動(dòng)脈粥樣硬化的不同二維超聲表現(xiàn)將斑塊分型。Ⅰ型：脂質(zhì)型斑塊，為超聲顯示均勻的低回聲內(nèi)膜增厚；Ⅱa型：纖維脂質(zhì)型斑塊，為超聲顯示表面有連續(xù)輪廓的回聲較強(qiáng)的纖維帽，斑塊內(nèi)部脂質(zhì)沉積有明顯的低回聲區(qū)，如伴有斑塊內(nèi)出血?jiǎng)t表現(xiàn)為無回聲區(qū)；Ⅱb型：纖維型斑塊，為超聲顯示局部較均勻的強(qiáng)回聲，斑塊表面有連續(xù)的回聲輪廓；Ⅲ型：鈣化型斑塊，為斑塊內(nèi)纖維化、鈣化，局部回聲增強(qiáng)，后方伴聲影或有明顯的聲衰減；Ⅳ型：潰瘍型斑塊，為斑塊表面不規(guī)則，有時(shí)呈“穴狀”或“壁龕”樣影像，潰瘍邊緣回聲低。Ⅰ、Ⅱb、Ⅲ型屬于穩(wěn)定性斑塊，Ⅱa、Ⅳ為不穩(wěn)定性斑塊。

1.2.3 觀察指標(biāo)所有研究對(duì)象均進(jìn)行肝腎功能、血糖、血脂、C反應(yīng)蛋白檢測(cè)，測(cè)量血壓、體質(zhì)量、身高、體質(zhì)指數(shù)。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理對(duì)所有計(jì)量資料進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，正態(tài)分布計(jì)量資料以χ—±s，計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)、率或構(gòu)成比表示。計(jì)數(shù)資料的比較采用χ2檢驗(yàn)。兩組計(jì)量資料均數(shù)間的比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組計(jì)量資料均數(shù)間的比較采用單因素方差分析（F檢驗(yàn)），其中兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。設(shè)α＝0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P＜0.05差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。使用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。

2 結(jié) 果

2.1 研究對(duì)象一般資料

102名病例組中無斑塊組、穩(wěn)定性粥樣斑塊組、不穩(wěn)定粥樣斑塊組與對(duì)照組34人的基本資料比較，各組性別，年齡，吸煙指數(shù)及體質(zhì)量指數(shù)無顯著性差異。見表1。

2.2 病例組與對(duì)照組Lp-PLA2水平

TIA各亞組血清Lp-PLA2水平均高于正常對(duì)照組，差別顯著。TIA各亞組間比較，不穩(wěn)定斑塊組血清Lp-PLA2水平高于穩(wěn)定斑塊組和無斑塊組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 各組間TIA的比較

3 討 論

LP-PLA2屬于水解磷脂酶的家族PLA2的一種，也被稱血小板活化因子乙酰水解酶（PAF-AH）[1-2]，是能夠產(chǎn)生催化脂蛋白與相關(guān)細(xì)胞膜上的甘油磷脂二位?；ユI水解產(chǎn)生，進(jìn)一步形成非酯化脂肪酸和溶血磷脂的一類酶族，該酶的活性在血清中表達(dá)與含量成正相關(guān)，分子量為50 kD （≈5.0×104），是非Ca2+依賴的活性磷脂酶。人血清中LPPLA2在成熟的巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的作用下產(chǎn)生，并導(dǎo)致血小板的活化，LP-PLA2促動(dòng)脈硬化的機(jī)制：血清中的LP-PLA2與脂蛋白顆粒緊密結(jié)合在一起，大部分與低密度脂蛋白結(jié)合，小部分與高密度脂蛋白、極低密度脂蛋白結(jié)合。LP-PLA2與低密度脂蛋白結(jié)合形成LDL-LP-PLA2復(fù)合物，由管腔進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)膜后，氧化作用后，低密度脂蛋白上的卵磷脂轉(zhuǎn)化成卵磷脂。LP-PLA2水解氧化的卵磷脂，生成氧化型游離脂肪酸和溶血磷脂膽堿[3]，合成促炎性介質(zhì)的刺激黏附因子和細(xì)胞因子，導(dǎo)致單核細(xì)胞在管腔外向內(nèi)膜聚集。單核細(xì)胞轉(zhuǎn)化衍生為巨噬細(xì)胞，吞噬氧化型LDL變成泡沫細(xì)胞，從而聚集形成動(dòng)脈粥樣硬化性斑塊，細(xì)胞因子和蛋白酶以及降解產(chǎn)生纖維帽的平滑肌細(xì)胞和膠原基質(zhì)，使斑塊變得脆弱、破裂，導(dǎo)致血栓形成和心血管事件的發(fā)生[4]。

動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定，即斑塊糜爛、潰瘍、破裂是微栓子的重要來源。形成微栓子是短暫性腦缺血發(fā)作的一個(gè)主要原因，LPPLA2的臨床價(jià)值在于其可作為評(píng)價(jià)頸動(dòng)脈硬化不穩(wěn)定斑塊的一個(gè)獨(dú)立因素[5]。

本研究檢測(cè)了短暫性腦缺血發(fā)作患者和正常對(duì)照組血清，結(jié)果顯示病例組LP-PLA2的含量顯著高于正常對(duì)照組[6-7]，不穩(wěn)定斑塊組血清Lp-PLA2水平高于穩(wěn)定斑塊組和無斑塊組，提示疾病過程中頸動(dòng)脈硬化出現(xiàn)的程度不同，Lp-PLA2水平表達(dá)不同，可通過檢測(cè)血清Lp-PLA2評(píng)價(jià)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性，為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)治療TIA提供客觀的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。通過及早確定頸動(dòng)脈硬化斑塊的不穩(wěn)定性及其類型，可按個(gè)體化原則給予有效的干預(yù)，將會(huì)給TIA的治療帶來一場革命性的進(jìn)步。

[1] Falk E,Shah PK,Fuster V.Coronary plaque disruption[J].Circulation, 1995,92(3)∶657-671.

[2] Kristensen SD,Ravn HB.Insights into the pathophysiology of unstable coronary artery disease[J].Cardiol,1997,80(5A)∶5E-9E.

[3] Weintraub HS.Idemifying the vulnerable patient with ruptureprone plaque[J].Cardiol,2008,101(12A)∶3-10.

[4] Daniels LB,Laughlin GA.Lipoprotein-associated phospholirme A2 is an independent predictor of incident coronary heart disease in an apparently healthy older population∶the Rancho Bernardo Study[J].Coll Cardiol,2008,51(9)∶913-919.

[5] Kim JY,Hyun YJ,Jang Y,et a1.Lipoprotein-associated phospholipase A2 activity is associated with coronary artery disease and markers of oxidative stress∶a case-cornrol study [J].Clin Nutr,2008, 88(3)∶630-637.

[6] Brilalds ES,Khera A.Associmion of lipoprotein-associated phospholipese A2 mass and activity with coronary and aortic atherosclerosis∶findings from the Dallas Heart Study[J].Clin Chern,2008, 54(12)∶1975-1981.

[7] Lavi S,Mcconnell JP.Local production of lipoprotein- associated phospholipase A2 and lysophosphatidy lcholine in the coronary circulation∶ association with early coronary atherosclerosis and endothelial dysfunction in humans[J].Circulation,2007,115(21)∶2715-2721.

R743.3

B

1671-8194（2013）13-0115-02