郝秀紅，趙強(qiáng)元，郭建巍，李艷君，錢揚(yáng)會(huì)，劉力娟

海軍總醫(yī)院 檢驗(yàn)科，北京 100048

金黃色葡菌球菌(staphylococcus aureus)是臨床最常見的致病菌，主要引起皮膚及軟組織化膿性感染，當(dāng)宿主免疫功能低下時(shí)，該菌可侵入機(jī)體引起呼吸道等感染，嚴(yán)重者可致敗血癥。文獻(xiàn)報(bào)道[1-3]耐甲氧西林金黃色葡菌球菌(methicillinresistant staphylococcus aureus，MRSA)的分離率呈逐年增高趨勢(shì)，尤其是該菌引起的感染位居革蘭陽性菌檢出率榜首[4-7]，因此了解我院血培養(yǎng)中金葡菌感染分布和耐藥狀況，加強(qiáng)對(duì)MRSA的檢測(cè)，對(duì)于控制和預(yù)防院內(nèi)感染的流行及指導(dǎo)臨床治療具有重要意義。

材料和方法

1 材料 菌株來源：155株金黃色葡萄球菌分離自2003-2011年從本院臨床送檢的血培養(yǎng)標(biāo)本。細(xì)菌分離鑒定按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行。質(zhì)控菌株：金黃色葡萄球菌ATCC25923。儀器與試劑：血培養(yǎng)瓶為北京伯泰技術(shù)開發(fā)中心產(chǎn)品；BacT ALERT 3D血培養(yǎng)儀、VITEK微生物分析儀及GPI卡和藥敏培養(yǎng)基為法國(guó)生物梅里埃產(chǎn)品；BIOMIC藥敏測(cè)試儀為威士達(dá)公司產(chǎn)品。藥敏紙片部分購于中國(guó)天壇生物制品鑒定所，部分為英國(guó)OXOID產(chǎn)品。抗生素：利奈唑胺((LNZ)、萬古霉素(VAN)、苯唑西林(OXA)、阿齊霉素(AZM)、呋喃妥因(NIT)、復(fù)方新諾明(SXT)、四環(huán)素(TCY)、頭孢唑啉(CZO)、環(huán)丙沙星(CIP)、左氧氟沙星(LVX)、克林霉素(CLX)、紅霉素(ERY)、青霉素(PEN)。數(shù)據(jù)分析：病原菌耐藥性分析采用WHONET5.4軟件進(jìn)行分析。

2 方法 無菌條件下采集靜脈血，成人8~10 ml、兒童3~5 ml、嬰幼兒1~2 ml，注入相應(yīng)可中和抗生素的血培養(yǎng)瓶，置BacT/ALERT 3D血培養(yǎng)儀中進(jìn)行連續(xù)振蕩培養(yǎng)和監(jiān)測(cè)，儀器報(bào)警有陽性瓶時(shí)，立即轉(zhuǎn)種于中國(guó)蘭和血平板(如厭氧瓶報(bào)警同時(shí)轉(zhuǎn)種厭氧血平板)，置35℃培養(yǎng)24~48 h，有菌生長(zhǎng)則繼續(xù)鑒定，接種同時(shí)作涂片染色；如5 d儀器未報(bào)陽性，則按陰性報(bào)告。

結(jié) 果

1 MRSA檢出情況 從2003-2011年我院血培養(yǎng)檢出革蘭陽性球菌604株，金葡菌155株，其中MRSA 110株，MRSA在金葡菌中平均發(fā)生率為70.9%，每年檢出情況見表1。

2 金葡菌耐藥情況 2007年以前金葡菌所做藥敏抗生素種類有7種，2007年增至9種，2008年以后增加到12種。幾年來一直沿用的萬古霉素對(duì)金葡菌敏感性較好，沒有發(fā)現(xiàn)耐藥株；對(duì)呋喃妥因敏感性次之，平均耐藥率為2.0%，對(duì)青霉素平均耐藥率最高為93.9%，對(duì)其他幾種抗生素耐藥情況見表2。

3 金葡菌多藥耐藥情況 金葡菌對(duì)抗生素的多藥耐藥以七重耐藥平均檢出率最高，其中MRSA多藥耐藥率明顯高于甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(methicillin sensitive staphylococcus aureus，MSSA)，檢出情況見表3。

表1 血培養(yǎng)中金葡菌檢出情況Tab.1 Staphylococcus aureus detected in blood culture

表2 2003-2011年血培養(yǎng)中金葡菌耐藥情況Tab.2 Drug resistance of Staphylococcus aureus in blood culture from 2003 to 2011

表3 血培養(yǎng)中155株金葡菌對(duì)常用抗生素多重耐藥情況Tab.3 Multiple drug resistance of 155 Staphylococcus aureus srains to commonly used antibiotics from 2003 to 2011(n, %)

討 論

金葡菌在血培養(yǎng)中分離率較高，多年來該菌一直位居我院前3位[8]，僅次于大腸埃希氏菌和表皮葡萄球菌。統(tǒng)計(jì)顯示連續(xù)9年金葡菌和MRSA在我院血培養(yǎng)檢測(cè)中的檢出數(shù)量除個(gè)別年份(2005年和2007年)外，呈逐年增長(zhǎng)趨勢(shì)，尤其是2008年以后增長(zhǎng)較為明顯，但每年MRSA在金葡菌中的發(fā)生率有所不同，9年來我院血培養(yǎng)中MRSA平均發(fā)生率為70.9%，2005-2008年MRSA發(fā)生率相對(duì)較低。金黃色葡萄球菌體外藥敏試驗(yàn)顯示，多年來萬古霉素、利奈唑胺對(duì)其敏感性較好，沒有發(fā)現(xiàn)耐藥株，是治療MRSA重癥病人的首選藥物，呋喃妥因?qū)鹌暇拿舾行源沃?008-2011年耐藥率均在10%以下，平均耐藥率為2.0%；復(fù)方新諾明對(duì)金葡菌的耐藥率(除2009年外)9年來均在40%以下，平均耐藥率為25.7%；青霉素耐藥率連年高達(dá)80%以上，平均耐藥率為93.9%，幾乎無抗菌活性；金葡菌對(duì)常用抗生素的耐藥性從低到高依次為利奈唑胺、萬古霉素、呋喃妥因、復(fù)方新諾明、四環(huán)素、左氧氟沙星、克林霉素、環(huán)丙沙星、頭孢西丁、頭孢唑啉、阿齊霉素、紅霉素、青霉素。表3顯示金葡菌對(duì)抗生素常呈現(xiàn)多藥耐藥，以七重耐藥率最高，占21.6%。MRSA和MSSA相比，二者對(duì)多藥耐藥有明顯的差別，MRSA對(duì)各類受試抗菌藥物的多藥耐藥率較MSSA顯著升高，前者以八重耐藥最高(34.6%)，后者以一、二重耐藥最高(41.5%)。

MRSA的多藥耐藥已成為臨床治療金葡菌感染的一大難題，雖然目前我院萬古霉素對(duì)金葡菌抗菌活性較好，無耐藥性，但近年來國(guó)外陸續(xù)出現(xiàn)的萬古霉素中介和耐藥的金葡菌隨時(shí)讓我們提高警惕，特別是國(guó)內(nèi)己出現(xiàn)異質(zhì)性耐萬古霉素葡萄球菌感染的報(bào)道[9]，應(yīng)引起臨床足夠的重視。

1 Panlilio AL， Culver DH， Gaynes RP， et al. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus in U.S. hospitals， 1975-1991［J］. Infect Control Hosp Epidemiol， 1992， 13（10）： 582-586.

2 NNIS System. National Nosocomial Infections Surveillance （NNIS）System Report， data summary from January 1992 through June 2003，issued August 2003［J］. Am J Infect Control， 2003， 31（8）：481-498.

3 李家泰，齊慧敏，李耘. 2002-2003年中國(guó)醫(yī)院和社區(qū)獲得性感染革蘭陽性細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)研究［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2005，28（3）：254-265.

4 樓玲莉，楊瑩，吳都．綜合重癥監(jiān)護(hù)病房病原菌分布及耐藥情況分析［J］.現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)，2011，23（6）：667-669．

5 郝秀紅，陸季蘅，馬驄，等. 2007年我院細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)［J］.軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，30（4）：495-497.

6 簡(jiǎn)翠，孫自鏞，張蓓，等．2008年武漢同濟(jì)醫(yī)院細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)［J］.中國(guó)感染與化療雜志，2009，9（6）：421-426．

7 王賀，張小江，劉文靜，等．2009年北京協(xié)和醫(yī)院細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)［J］.中國(guó)感染與化療雜志，2011，11（3）：161-167．

8 郝秀紅，馬驄，陸季蘅，等．血培養(yǎng)分離菌5年變遷與耐藥性分析［J］.軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，30（2）：158-160．

9 謝憶虹，彭梅，糜祖煌，等．一株攜帶VanB基因的異質(zhì)性耐萬古霉素表皮葡萄球菌的發(fā)現(xiàn)［J］.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2006，26（5）：582-585．