吳秀萍 謝源福 楊樂藝 吳雄 王增燕

乳腺癌患者中Ki-67蛋白的表達及其意義

吳秀萍 謝源福 楊樂藝 吳雄 王增燕

目的 檢測Ki-67蛋白在乳腺癌組織中的表達, 及其與乳腺癌腫瘤病理核分裂像計數(shù)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床病理學(xué)指標間的關(guān)系。方法 采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測乳腺癌組織中Ki-67蛋白的表達, 分析陽性表達與乳腺癌病理核分裂像計數(shù)、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、雌激素受體(ER)和孕激素受體(PR)、人表皮生長因子受體-2(HER-2)表達之間的關(guān)系。結(jié)果 Ki-67蛋白在乳腺癌病理核分裂像計數(shù)的表達與惡性程度具有顯著的相關(guān)性；Ki-67蛋白在ER和PR陽性組中表達顯著低于ER和PR陰性組, 而在HER-2陽性組中表達顯著高于HER-2陰性組。結(jié)論 Ki-67可作為判斷乳腺癌患者預(yù)后及療效的重要標志物, 同時聯(lián)合檢測Ki-67和其他乳腺癌病理學(xué)指標有助于了解乳腺癌生物學(xué)行為, 為治療和預(yù)后提供思路。

乳腺癌；Ki-67蛋白；病理核分裂像計數(shù)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；ER；PR；HER-2

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤, 近年來研究發(fā)現(xiàn), 已知雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和人類表皮生長因子受體-2(HER-2)均于乳腺癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。Ki67的發(fā)現(xiàn), 被認為是能夠有效評估腫瘤細胞增殖活性的重要標志物。本科針對Ki-67與乳腺癌腫瘤病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床病理學(xué)指標(ER、PR、HER-2)之間的關(guān)系開展了研究,報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2011年1月至2013年3月手術(shù)切除的乳腺癌組織標本300例, 均為女性, 患者年齡32~81歲,平均(44.9±3.7)歲。所有患者均經(jīng)術(shù)后病理組織學(xué)確診乳腺癌, 且術(shù)前未經(jīng)過放療、化療等輔助治療。腋窩淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移者94例, 無轉(zhuǎn)移者206例。

1.2 病理核分裂像計數(shù)評價標準 所有病理組織的核分裂像計數(shù)參照Bloom-Richardson系統(tǒng)的Nottingham改良方案,計算出在乳腺組織細胞生長活躍密集區(qū)域隨機挑選20個高倍視野(×400), 計算每10個高倍視野(10HPF)中的細胞核分裂像數(shù), 0~1個/10HPF：1分；2~3個/10HPF：2分；>3個/HPF：3分, 分數(shù)越高, 表示癌細胞惡性程度越高［1］。本研究中, 1分有13例, 為低度惡性組；2分有188例, 為中度惡性組；3分有99例, 為高度惡性組。

1.3 Ki-67、ER、PR和HER-2測定方法 所有乳腺癌病理學(xué)指標均采用免疫組織化學(xué)染色方法進行測定：石蠟包埋組織塊切片后脫蠟至水, DAB染色后用蘇木精復(fù)染, 封固采用中性樹膠。陰性對照采用PBS緩沖液替代一抗。Ki-67蛋白的測定采用相對定量法, 選取陽性信號最強區(qū)域(×400)計數(shù)200個腫瘤細胞中陽性細胞數(shù)目, 同時計算陽性細胞占200個細胞比例。ER和PR陽性：癌細胞核陽性細胞>1%；HER-2陽性：浸潤性癌細胞膜強陽性細胞>30%［1］。其中ER陽性組192例, 陰性組108例；PR陽性組162例, 陰性組138例；HER-2陽性組60例, 陰性組240例。

1.4 實驗試劑和儀器 所有試劑盒、免疫組織化學(xué)染色試劑及Ki-67、ER、PR和HER-2的一抗、二抗均購自北京中山生物技術(shù)有限公司。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 SPSS 13.0軟件分析, 計量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差( x-±s)表示, 組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料采用百分比表示, P＞0.05, 差異無統(tǒng)計學(xué)意義, P＜0.05, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Ki-67蛋白表達與病理組織的核分裂像計數(shù)關(guān)系 Ki-67蛋白表達與病理組織的核分裂像計數(shù)關(guān)系, 見表1。

2.2 Ki-67蛋白表達與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系 Ki-67蛋白表達與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系, 見表2。

2.3 Ki-67蛋白表達與ER、PR和HER-2表達之間的關(guān)系Ki-67蛋白表達與ER、PR和HER-2表達之間的關(guān)系, 見表3。

表1 Ki-67蛋白表達與病理組織的核分裂像計數(shù)關(guān)系( x-±s)

表2 Ki-67蛋白表達與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系( x-±s)

表3 Ki-67蛋白表達與ER、PR和HER-2表達之間的關(guān)系( x-±s)

3 討論

3.1 Ki-67蛋白與乳腺癌組織學(xué)的相關(guān)性 Ki-67抗原只與增生細胞核反應(yīng), 無組織特異性, 在各類惡性腫瘤組織中, Ki-67的表達都遠高于正常組織, 可以由此有效評估細胞增殖水平。早在1983年, Ki-67就因其僅和增生的細胞核反應(yīng),具有操作簡單、特異性強的特點, 成為了病理科免疫組化染色的常用增殖細胞免疫標記之一［2］。已有較多研究顯示：Ki-67的表達和乳腺癌的病理學(xué)分級和臨床分期, 包括淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。值得注意的是, Ki-67在正常乳腺組織和乳腺上皮細胞纖維腺瘤中的表達水平遠遠低于乳腺癌細胞,陽性率<3%；且Ki- 67陽性的乳腺癌患者比陰性患者預(yù)后差,提示Ki-67。有可能成為未來乳腺癌分型的指標。

3.2 Ki-67蛋白與ER、PR、HER-2乳腺癌病理學(xué)指標的關(guān)系 雌、孕激素與乳腺癌發(fā)病與轉(zhuǎn)歸密切相關(guān), 一般來說, ER和PR陽性的乳腺癌分化程度高、惡性度較低、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移慢、預(yù)后較好, 這可能與ER、PR陽性的乳腺癌患者對于內(nèi)分泌治療較ER、PR陰性患者更加敏感有關(guān)［3］。且目前多數(shù)研究認為Ki-67蛋白的表達和ER及PR呈負相關(guān), ER、PR表達陰性者的Ki-67指數(shù)顯著高于陽性者, 這與Ki-67蛋白表達水平較高的乳腺癌患者預(yù)后較差是一致的［4］。

HER-2屬于表皮生長因子受體家族中的一員, 定位于17號染色體長臂2區(qū)1帶, 平時靜止狀態(tài)時調(diào)節(jié)細胞生長、增殖和分化；當遭到激活時, 具備腫瘤轉(zhuǎn)化的特性, 其過量表達提示乳腺癌惡性程度高, 對于內(nèi)分泌治療效果較差, 生存期較短, 預(yù)后不佳, 被認為是預(yù)測乳腺癌預(yù)后重要的生物學(xué)因子。多數(shù)研究顯示HER-2表達與Ki-67呈正相關(guān), 提示可以利用它們作為預(yù)測化療和內(nèi)分泌治療療效的重要敏感性指標。具體為：HER-2蛋白和Ki67蛋白表達下降越明顯,則化療和內(nèi)分泌治療的療效就越肯定［5］。

在作者對于Ki-67蛋白在乳腺癌組織中的表達情況的研究中, 發(fā)現(xiàn)①Ki-67蛋白在病理組織分型趨向惡性、淋巴結(jié)存在轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者組織中表達更高, 說明Ki-67可以用于乳腺癌患者的疾病評估和預(yù)后分析；②Ki-67與ER、PR呈負相關(guān), 與HER-2呈正相關(guān), 提示Ki-67可以和ER、PR、HER-2共同作為乳腺癌臨床病理學(xué)指標來預(yù)測患者對于化療和內(nèi)分泌治療的療效, 為患者術(shù)后進一步治療提供參考。

［1］ 邢家亮.Ki-67表達與乳腺癌臨床病理學(xué)指標的相關(guān)性分析.山東大學(xué), 2012.

［2］ 劉毅, 張洪蘭, 陳昊, 等.新輔助化療對乳腺癌患者Ki-67、ER、Her-2和 p53的影響及意義.中國腫瘤外科雜志, 2012, 4(6): 348-351.

［3］ 吳秀平,杜毅力,曹永政, 等.探討超聲彈性成像參數(shù)與乳腺癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Ki-67表達的相關(guān)性.中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù), 2012, 28(5):921-924.

［4］ 王永南,王頎,張安秦, 等.Ki-67與分子亞型預(yù)測乳腺癌新輔助化療敏感性的研究.中華腫瘤防治雜志, 2012,19(23):1805-1809.

［5］ 徐立坤, 李涌濤. Ki-67 和 BRCA1 在≤35 歲乳腺癌組織中的表達及臨床意義. 實用腫瘤學(xué)雜志, 2012, 27( 2):123-128.

The expression and clinical significance of Ki - 67 protein in breast cancer patients

Wu Xiuping, Xie Yuanfu, Yang Leyi, et al.
Zhangzhou hospital affiliated to fujian medical university zhang zhou 363000, China

Objective To investigate the Ki-67 expression in the tissue of breast cancer and the relationship between the Ki-67 and mitotic count, lymph node metastasis and clinical pathological parameters.Methods To test the Ki-67 expression in the tissue of breast cancer with immunohistochemistry and analyze the relationship between the Ki-67 and mitotic count, lymph node metastasis,ER,PR and HER-2.Results The Ki-67 expression in mitotic count and malignant degree has significant correlation .The Ki-67 expression in the ER and PR positive group is significantly lower than that in the ER and PR negative group.The Ki-67 expression in the HER-2 positive group is significantly higher than that in the HER-2 negative group.Conclusions Ki-67 can serve as a judge for the efficacy of breast cancer prognosis, and the combined detection of Ki-67 and other clinical pathological parameters for breast cancer can help to understand the biological behavior of breast cancer.

Breast cancer； Ki-67 protein; Mitotic count; Lymphatic metastasis; ER; PR; HER-2

363000 福建醫(yī)科大學(xué)附屬漳州市醫(yī)院普外三科乳腺外科(吳秀萍 楊樂藝 吳雄 王增燕)；福建醫(yī)科大學(xué)附屬漳州市醫(yī)院放療科(謝源福)

謝源福 E-mail：xieyanfu111@163.com