衛(wèi)紅偉

乙型肝炎病毒DNA定量檢測(cè)與臨床的關(guān)系

衛(wèi)紅偉

目的 探討乙型肝炎病毒DNA的定量檢測(cè)和臨床的關(guān)系。方法 選取2010年6月至2012年6月期間來本院肝病?？凭驮\的128例患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析, 所選取的患者均通過ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))來檢測(cè)乙型肝炎的病毒血清標(biāo)志物, FQ-PCR(熒光定量聚合酶連反應(yīng))來檢測(cè)HBV-DNA的含量。結(jié)果 HBcAb、HBeAg、HBsAg的HBV-DNA的陽性率為98.6%, HBcAb、HBeAg、HBsAg為25.2%, HBeAg、HBsAg為100%, HBcAb、HBsAg為20%, HBeAb、HBcAb、HBsAb為14.5%, HBcAb、HBeAb為20%, HBsAb為5.6%。全陰的為0。結(jié)論各種類型的乙型肝炎患者都有一定程度HBV-DNA復(fù)制, HBeAg的陽性患者其HBV-DNA的水平最高, 將HBV-DNA和HBeAg定量聯(lián)合進(jìn)行診斷, 可以為早期的乙型肝炎篩查以及治療提供可靠的依據(jù)。

乙型肝炎病毒；DNA定量檢測(cè)；關(guān)系

為了探討乙型肝炎病毒DNA的定量檢測(cè)和臨床的關(guān)系,本次研究選取2010年6月~2012年6月期間來河南省宜陽縣人民醫(yī)院肝病?？凭驮\的128例患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析, 所選取的患者均通過ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))來檢測(cè)乙型肝炎的病毒血清標(biāo)志物, FQ-PCR(熒光定量聚合酶連反應(yīng))來檢測(cè)HBV-DNA的含量?，F(xiàn)將大致研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年6月至2012年6月期間來本院肝病?？凭驮\的128例患者, 其中男73例, 女55例, 年齡在12~76歲之間, 平均(34.8±14.5)歲, 所選取的患者都符合病毒性肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)。且各類型的肝炎患者之間的資料沒有明顯的差異, 結(jié)果具有可比性。

1.2 檢測(cè)的儀器和試劑 HBV血清檢測(cè)標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒和HBV核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)試劑盒；熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)分析儀均產(chǎn)自上?？迫A生物技術(shù)公司。

1.3 方法 在患者晨起空腹時(shí)抽取5 ml靜脈血, 將血清離心分裝在-20℃下保存?zhèn)溆?。然后通過ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))來檢測(cè)乙型肝炎的病毒血清標(biāo)志物, 操作步驟按照試劑盒的規(guī)定進(jìn)行。通過FQ-PCR(熒光定量聚合酶連反應(yīng))來檢測(cè)HBV-DNA的含量, 每一次檢驗(yàn)都設(shè)立強(qiáng)陽性、弱陽性以及陰性作為內(nèi)標(biāo), 將四個(gè)已經(jīng)通過的陽性標(biāo)準(zhǔn)品作為外標(biāo)。在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)做好室內(nèi)的質(zhì)控。

1.4 觀測(cè)的指標(biāo) 觀測(cè)患者血清學(xué)的診斷指標(biāo)和HBVDNA的陽性率以及定量檢測(cè)的結(jié)果情況；血清學(xué)的診斷分組：第一組為HBcAb、HBeAg、HBsAg, 第二組為HBcAb、HBeAg、HBsAg, 第三組為HBeAg、HBsAg, 第四組為HBcAb、HBsAg, 第五組為HBeAb、HBcAb、HBsAb, 第六組為HBcAb、HBeAb, 第七組為HBsAb以及全陰。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理, 以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的基礎(chǔ)。

2 結(jié)果

128例患者血清學(xué)的診斷指標(biāo)和HBV-DNA的陽性率以及定量檢測(cè)的結(jié)果情況, 詳見表1。

表1 患者血清學(xué)的診斷指標(biāo)和HBV-DNA的陽性率以及定量檢測(cè)的結(jié)果情況［n (%)］

3 討論

近幾年, 發(fā)展了多種準(zhǔn)確的、敏感的、先進(jìn)的用于HBVDNA定量檢測(cè)的方法, 根據(jù)其原理主要有酶標(biāo)記探針PCR技術(shù)和熒光標(biāo)記探針的PCR技術(shù)。后者省時(shí), 自動(dòng)化的程度高, 而且可以免除PCR后處理的步驟, 減少了PCR產(chǎn)物對(duì)環(huán)境的污染, 現(xiàn)在已經(jīng)成為了HBV-DNA定量檢測(cè)的主要方法。采用該方法對(duì)HBV-DNA進(jìn)行定量檢測(cè)的范圍為3~8, 如果檢測(cè)的值比最低的檢測(cè)水平-3低, 將結(jié)果判斷為陰性。在進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)時(shí), 將陰性的結(jié)果忽略不計(jì)或者計(jì)算為0, 而求得HBV-DNA對(duì)數(shù)的平均值的計(jì)算結(jié)果, 這種方法是不合理的。如果要合理的反映不同類型的乙型肝炎病毒患者體內(nèi)的HBV-DNA的含量, 應(yīng)該采用中位數(shù)的差異H來進(jìn)行HBVDNA的含量比較。

我國現(xiàn)在屬于乙型肝炎大國, 發(fā)病率在全世界排在前幾位。有研究表明, HBsAg的流行率大約為9.75%, 當(dāng)人體感染了乙型肝炎病毒之后會(huì)出現(xiàn)不同的癥狀以及臨床表現(xiàn)。HBeAg呈陽性表示患者體內(nèi)的乙型肝炎病毒在活躍的復(fù)制,表明其具有很強(qiáng)的傳染性［2］。HBcAb、HBeAg、HBsAg的HBV-DNA的陽性率為98.6%, , HBeAg、HBsAg為100%, 說明本組患者的HBeAg陽性血清指標(biāo)的模式組主要為第一組和第三組, 而且其HBV-DNA的陽性率以及HBV-DNA的定量都比其他各組要高, 說明HBeAg有可能與HBV-DNA的含量之間存在一定的正相關(guān)性［3］。HBcAb、HBeAg、HBsAg為25.2%, HBV-DNA 的對(duì)數(shù)的平均值為(5.03±1.86), HBcAb、HBsAg為20%, HBV-DNA 的對(duì)數(shù)的平均值為(6.28±0.48), 說明當(dāng)e系統(tǒng)的抗原陰轉(zhuǎn)時(shí), HBV-DNA還是有可能被檢測(cè)到,雖然其含量比第一組和第三組低。HBeAb、HBcAb、HBsAb為14.5%, HBV-DNA 的對(duì)數(shù)的平均值為(3.54±0.45), 說明HBsAb是一種保護(hù)性的抗體。

綜上所述, 各種類型的乙型肝炎患者都有一定程度HBV-DNA復(fù)制, HBeAg的陽性患者其HBV-DNA的水平最高, 將HBV-DNA和HBeAg定量聯(lián)合進(jìn)行診斷, 可以為早期的乙型肝炎篩查以及治療提供可靠的依據(jù)。

［1］ 李金明.乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物測(cè)定及結(jié)果解釋的若干問題.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2006,29(5):385.

［2］ 潘春燕.溶血對(duì)乙型肝炎病毒DNA 定量檢測(cè)的影響.左江醫(yī)學(xué), 2008,36(1):53.

［3］ 劉勇.乙型肝炎病毒的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)展及臨床應(yīng)用.中國實(shí)用內(nèi)科雜志, 2007,27(3):236.

471600 河南省宜陽縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科