余 波 譚詩(shī)文 冉懋韜 徐景峨

（貴州省畜牧獸醫(yī)研究所，貴州貴陽(yáng) 550005）

1 發(fā)病情況及臨床癥狀

2012年9月，貴州省都勻市某養(yǎng)豬場(chǎng)存欄母豬42頭，經(jīng)產(chǎn)和初產(chǎn)懷孕母豬出現(xiàn)產(chǎn)死胎、木乃伊和弱仔的現(xiàn)象。弱仔豬產(chǎn)出7天后死亡。仔豬體溫突然升高至41～42℃，精神不振，后軀站立不穩(wěn)或臥地不起，運(yùn)動(dòng)失調(diào)，食欲減退，糞便稀黃。隨即用青霉素和長(zhǎng)效土鏈霉素、黃芪多糖治療，患病豬在治療過(guò)程中陸續(xù)死亡，發(fā)病率約為70%～80%，患病仔豬死亡率達(dá)100%。

2 病理剖檢

對(duì)病死豬進(jìn)行病理剖檢，其結(jié)果如下：死胎、木乃伊胎有充血、出血、水腫和體腔積液的現(xiàn)象，而實(shí)質(zhì)臟器無(wú)明顯病理變化。仔豬腦充血、出血；肝、脾有散在灰白色壞死灶；腎有點(diǎn)狀出血；全身淋巴結(jié)充血，腫大；胃底部胃壁增厚，有膠凍樣液體、條狀出血斑和出血點(diǎn)。

3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)與結(jié)果

3.1 細(xì)菌學(xué)檢查

取死亡仔豬肝、肺、淋巴結(jié)等處的病料接種于普通瓊脂平板、麥康凱瓊脂，于37℃培養(yǎng)24小時(shí)。普通瓊脂平板上有菌落生成，為圓形、邊緣整齊光滑、灰白色。麥康凱培養(yǎng)基上有紅色菌落。

3.2 生化鑒定

該菌株能分解發(fā)酵甘露醇、麥芽糖、葡萄糖、乳糖，產(chǎn)生靛基質(zhì)，不產(chǎn)生硫化氫，不分解尿素，M.R.試驗(yàn)陽(yáng)性，V-P試驗(yàn)陰性。

3.3 病毒檢測(cè)

取病死豬的肝、肺、腎、淋巴結(jié)等處的組織病料，應(yīng)用TIAN amp病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒分別提取總DNA/RNA，應(yīng)用本研究室余波等建立的豬偽狂犬病毒（PRV）、豬細(xì)小病毒（PPV）、豬圓環(huán)病毒 2型（PCV2）多重PCR診斷方法[1]檢測(cè)PRV、PPV、PCV2這3種病毒，PRV目的片段大小為300bp，PCV2目的片段大小為420b p，PPV目的片段大小為680bp，結(jié)果見(jiàn)圖1，樣品于300bp、420b p處分別表達(dá)出了條帶，與PRV、PCV2目的條帶大小相符。同時(shí)應(yīng)用豬瘟病毒（CSFV）RT-PCR檢測(cè)試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒 （PRRSV） 系列RT-PCR檢測(cè)試劑盒分別檢測(cè)CSFV和PRRSV，試劑盒為北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司產(chǎn)品（批號(hào)：20120214），CSFV和 PRRSV目的片段大小均為278b p，無(wú)明顯條帶表達(dá)，結(jié)果見(jiàn)圖2、圖3，說(shuō)明存在PRV與PCV-2混合感染。

圖1 PRV、PCV-2和PPV多重PCR結(jié)果

圖2 CSFV RT-PCR結(jié)果

圖3 PRRSV RT-PCR結(jié)果

3.4 血清學(xué)檢測(cè)

進(jìn)一步對(duì)送檢母豬和瀕死仔豬血清分別用豬瘟病毒（CSFV）、豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）、豬偽狂犬病毒（PRV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2） 的ELISA抗體診斷試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒為北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司產(chǎn)品（批號(hào)：20111202）。檢測(cè)結(jié)果可驗(yàn)證3.2中的鑒定結(jié)果，見(jiàn)表1。

表1 豬血清學(xué)ELISA抗體檢測(cè)結(jié)果

4 診斷結(jié)果

通過(guò)臨床癥狀、病理變化和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，綜合確診該疫情為豬偽狂犬病毒、豬圓環(huán)病毒2型和豬黃痢的混合感染。

5 防治措施

病情確診后，立即用生石灰對(duì)豬舍進(jìn)行徹底消毒，對(duì)發(fā)病豬進(jìn)行嚴(yán)格隔離與治療。未感染豬群應(yīng)緊急注射豬偽狂犬病毒g E基因缺失疫苗（Bartha-K61株）。對(duì)該場(chǎng)的豬圓環(huán)病毒2型抗體檢測(cè)分析以后，結(jié)合實(shí)際情況，未建議該場(chǎng)使用豬圓環(huán)病毒2型弱毒疫苗。同時(shí)，在飼料中加喂氟苯尼考，飲水中添加黃芪多糖、電解多維、葡萄糖，增加豬群的抗病能力，連用7天，30天后疫情得到有效控制。

6 小結(jié)與討論

豬場(chǎng)中發(fā)病情況常為多種因素導(dǎo)致的數(shù)種病菌并發(fā)感染或繼發(fā)感染，同時(shí)許多病原體發(fā)生變異以及新病原體出現(xiàn)，從而造成一些豬傳染病以非典型或綜合征的形式出現(xiàn)，使豬病的診斷和防治難度增加[2-4]。

豬偽狂犬病毒和豬圓環(huán)病毒直接危害畜體，嚴(yán)重時(shí)造成機(jī)體免疫抑制，多種疫病繼發(fā)感染，使病情加重，藥物的有效性降低以及疫苗接種失敗。病例中仔豬沒(méi)有豬瘟、豬藍(lán)耳病毒的母源抗體，可能是由豬偽狂犬病毒、豬圓環(huán)病毒引起的免疫抑制。對(duì)該場(chǎng)的豬圓環(huán)病毒2型抗體檢測(cè)分析以后，結(jié)合實(shí)際情況，未建議該場(chǎng)使用豬圓環(huán)病毒2型弱毒疫苗，避免大規(guī)模免疫后加大了圓環(huán)病毒2型的凈化難度。

針對(duì)目前規(guī)?；i場(chǎng)疫病的復(fù)雜情況，樹(shù)立保健和預(yù)防觀念，采取合理的免疫程序，建立完善的預(yù)防機(jī)制，同時(shí)對(duì)患病豬制定科學(xué)的用藥方案，正確配伍，協(xié)同用藥，辨證施治，綜合治療。

[1]余波，譚詩(shī)文，冉懋韜，等.檢測(cè)PRV野毒株、PCV-2及PPV多重PCR方法的建立及初步應(yīng)用.畜牧與獸醫(yī)，42（5）：15-18.

[2]殷震，劉景華.動(dòng)物病毒學(xué)（第2版）.北京：科學(xué)出版社，1997：631-640.

[3]陳鐘鳴，張定東，方光遠(yuǎn)，等.PRRSV、CSFV和JEV混合感染的多聯(lián)PCR診斷.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2008，29（12）：23-27.

[3]郝昭遠(yuǎn)，孔令芳.當(dāng)前規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)豬病流行特點(diǎn)及防治對(duì)策.山東畜牧獸醫(yī)，2009，30（7）：46-47.

[4]仇華吉，童光志.病毒性繁殖障礙：養(yǎng)豬業(yè)面臨的新課題.中國(guó)獸醫(yī)雜志，2007，37（3）：49-50.