方耀敏,姜文華,李亞秋,郝昀博,郝利銘*

(1.白城醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校,吉林 白城 137000;2.吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,吉林 長(zhǎng)春 130021;3.中南大學(xué)湘雅口腔醫(yī)學(xué)院,湖南 長(zhǎng)沙 410008)

·論 著·

CFTR在小細(xì)胞肺癌中表達(dá)及其意義的研究

方耀敏1,姜文華2,李亞秋2,郝昀博3,郝利銘2*

(1.白城醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校,吉林 白城 137000;2.吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,吉林 長(zhǎng)春 130021;3.中南大學(xué)湘雅口腔醫(yī)學(xué)院,湖南 長(zhǎng)沙 410008)

目的探討CFTR在小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其意義。方法取吉林省腫瘤醫(yī)院的手術(shù)標(biāo)本15例，患者均為男性，術(shù)前均未進(jìn)行過(guò)放射治療和化學(xué)治療，年齡為30～60歲。所取標(biāo)本入10%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋和切片，切片厚度為5 μm，進(jìn)行HE染色和CFTR免疫組織化學(xué)染色。結(jié)果癌細(xì)胞排列成條索狀，大部分癌細(xì)胞不表達(dá)CFTR，少部分癌細(xì)胞表達(dá)CFTR，且這些癌細(xì)胞體積相對(duì)癌巢周邊的癌細(xì)胞體積大。具有細(xì)胞分裂相的癌細(xì)胞不表達(dá)CFTR。結(jié)論CFTR的表達(dá)可能參與小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。

CFTR;小細(xì)胞肺癌;表達(dá);生長(zhǎng);分化

小細(xì)胞肺癌是一種惡性程度非常高的肺癌，其轉(zhuǎn)移速度快而廣泛，對(duì)人的生命危害程度高，發(fā)現(xiàn)時(shí)一般為晚期，預(yù)后極差。小細(xì)胞肺癌是一些具有神經(jīng)內(nèi)分泌性細(xì)胞或類神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞特性的一類癌細(xì)胞[1]。這些癌細(xì)胞是否具有生長(zhǎng)和分化能力？它們的生長(zhǎng)和分化與哪些因素有關(guān)？目前正在探索之中。在一些內(nèi)分泌細(xì)胞中，其分泌活動(dòng)與CFTR有關(guān)，那么小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的分泌活動(dòng)是否同CFTR的表達(dá)有關(guān)，目前，尚無(wú)研究報(bào)道。本研究以小細(xì)胞肺癌為材料，研究CFTR是否在小細(xì)胞肺癌細(xì)胞表達(dá)及其意義。

1 材料與方法

小細(xì)胞肺癌標(biāo)本15例，取自于吉林省腫瘤醫(yī)院手術(shù)標(biāo)本，經(jīng)病理科醫(yī)生診斷并確診為小細(xì)胞肺癌，所取標(biāo)本的患者術(shù)前均未進(jìn)行過(guò)放射治療和化學(xué)治療，患者均為男性，年齡為30～60歲。置所取標(biāo)本于10%中性甲醛，常規(guī)石蠟切片，切片厚度為5 μm，一部分切片行HE染色，另一部分切片行CFTR免疫組織化學(xué)的SP法染色。染色后的標(biāo)本采用Olympus顯微鏡觀察。

2 結(jié) 果

HE染色結(jié)果小細(xì)胞肺癌細(xì)胞排列成條索狀。大多數(shù)癌細(xì)胞的體積較小，細(xì)胞核較大，染色淺。癌細(xì)胞分裂相較多，癌細(xì)胞具有顯著的異型性(見(jiàn)圖1)。

CFTR的免疫組織化學(xué)染色結(jié)果大多數(shù)癌細(xì)胞呈陰性表達(dá)，但是，一些體積較大的癌細(xì)胞呈弱陽(yáng)性表達(dá)。癌巢邊緣的癌細(xì)胞均不表達(dá)CFTR。具有分裂相的細(xì)胞均不表達(dá)CFTR(見(jiàn)圖2)。

圖 1 小細(xì)胞肺癌(HE染色 400X)

圖 2 CFTR在小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)(SP法 400X)

3 討 論

肺癌包括非小細(xì)胞肺癌和小細(xì)胞肺癌兩大類，其中非小細(xì)胞肺癌所占比例為70%以上，小細(xì)胞肺癌占30%以下。雖然近些年來(lái)，由于戒煙活動(dòng)的開(kāi)展，小細(xì)胞肺癌的發(fā)病率降低到20%左右[2-3]，但是小細(xì)胞肺癌對(duì)人們的危害仍然很大。小細(xì)胞肺癌具有的分裂能力強(qiáng)、轉(zhuǎn)移快、很早就進(jìn)入淋巴道和血道進(jìn)行全身廣泛轉(zhuǎn)移的特征，是否同它的分泌特征有關(guān)？目前尚在研究中。因此，探討參與小細(xì)胞肺癌分泌和轉(zhuǎn)移功能的因素具有重要的理論和實(shí)際意義。CFTR是囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)因子，是一種氯離子通道。許多實(shí)驗(yàn)證明，氯離子通道對(duì)于細(xì)胞的遷移和分泌活動(dòng)具有重要的意義[4]。CFTR在小細(xì)胞肺癌上是否具有表達(dá)，目前尚無(wú)研究報(bào)道。本研究結(jié)果顯示：大多數(shù)小細(xì)胞癌細(xì)胞的體積較小，細(xì)胞分裂相較多，這符合該類型細(xì)胞的生物學(xué)特點(diǎn)。CFTR染色結(jié)果也顯示：大多數(shù)小細(xì)胞肺癌細(xì)胞不表達(dá)CFTR，只有少數(shù)位于癌巢中央的癌細(xì)胞表達(dá)CFTR，同時(shí)，表達(dá)CFTR的癌細(xì)胞的體積也比癌巢周邊癌細(xì)胞的體積大。一般來(lái)說(shuō)位于中央的癌細(xì)胞較癌巢周邊的癌細(xì)胞生長(zhǎng)和分化更快一些。所以，CFTR的表達(dá)可能是小細(xì)胞癌細(xì)胞處于一種生長(zhǎng)和分化的細(xì)胞功能狀態(tài)。

一般認(rèn)為，在細(xì)胞的增殖和遷移過(guò)程中，細(xì)胞內(nèi)K+外流可導(dǎo)致細(xì)胞的增殖和遷移。通常情況下，細(xì)胞內(nèi)的K+濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于細(xì)胞外的K+濃度，而細(xì)胞膜上的K+通道通常是開(kāi)放的，K+具有向細(xì)胞外進(jìn)行流動(dòng)的趨勢(shì)，只有當(dāng)細(xì)胞內(nèi)外的其他離子濃度發(fā)生改變時(shí)，K+才出現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)外的流動(dòng)[5]。

Pan J等人研究小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株時(shí)發(fā)現(xiàn)，H146和H348大量表達(dá)CFTR時(shí)，K+的外流減少。當(dāng)K+的外流減少時(shí)，Cl-和水分子會(huì)逐漸進(jìn)入細(xì)胞，從而使細(xì)胞的體積可逐漸增大[6]。這種細(xì)胞體積的增大可能伴隨著細(xì)胞分化狀態(tài)的改變。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果還顯示，當(dāng)細(xì)胞處于分裂時(shí)，即具有分裂相的細(xì)胞不表達(dá)CFTR，當(dāng)細(xì)胞體積增大時(shí)，細(xì)胞卻表達(dá)少量的CFTR。這些表達(dá)CFTR的細(xì)胞均位于癌巢中央，在癌巢周邊的癌細(xì)胞均不表達(dá)CFTR。這種表達(dá)方式可能同小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和狀態(tài)有關(guān)。CFTR的表達(dá)是否參與了癌細(xì)胞的分化，以及CFTR參與分化的機(jī)制，有待進(jìn)一步研究。

[1] von Pawel J,Schiller J H,Shepherd F A,et al.Topotecan versus cyclophosphamide,doxorubicin,and vincristine for the treatment of recurrent small-cell lung cancer[J].J Clin Oncol,1999,17(2):658-667.

[2] 周小昀，李龍蕓.小細(xì)胞肺癌的治療進(jìn)展與現(xiàn)狀[J].癌癥進(jìn)展雜志,2007,5(5)：475-488.

[3] 曲 昂，王俊杰.小細(xì)胞肺癌靶向治療回顧[J].中國(guó)腫瘤臨床與康復(fù),2009,16(2)：174-181.

[4] LeSimple P,Liao Jie,Robert R,et al.Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator trafficking modulates the barrier function of airway epithelial cell monolayers[J].J Phystol,2010,588(Pt 8):1195-1209.

[5] 甕占平，王 波.鉀離子通道與腫瘤關(guān)系研究進(jìn)展[J].國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志,2005,25(6)：488-491.

[6] Pan Jie,Bear C,Farragher S,et al.Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator modulates neurosecretory function in pulmonary neuroendocrine cell-related tumor cell line models[J].Am J Respir Cell Mol Biol,2002,27(5):553-560.

TheexpressionanditssignificanceofCFTRinsmallcelllungcancer

FANG Yao-min1,JIANG Wen-hua2,LI Ya-qiu2,HAO Yun-bo3,HAO Li-ming2*

(1.Baicheng Medical College,Baicheng,Jilin Province，137000;2.Basic Medical College of Jilin University,Changchun,Jilin Province，130021;3.Sentral South University Xiangya School of Stomatology,Changsha,Hunan Province，410008，China)

ObjectiveTo study the expression and its significance of CFTR in small cell lung cancer.Methods15 operating specimen were gained from Cancer Hospital of Jilin Province,and all patients were male who had not been cured with radiation therapy and chemotherapy before operation,and who were at the age of 30～60 years.The specimen was put into 10% formalin and paraffin embed and cut section into 5 μm.The section was stained with HE and immunohistochemistry of CFTR.ResultsThe cancer cell arranged as cords,and CFTR didn’t express in most small cell lung cancers，but in the few cancer cells which volumes were larger than those around cancer nest. The cancer cells with cellular fission didn’t express the CFTR.ConclusionThe expression of CFTR might involved in growing and differentiation of small cell lung cancer.

CFTR;small cell lung cancer;expression;growing;differentiation

R734.2

A

2013-05-19)

1673-2995(2013)05-0321-03

方耀敏(1965-)，男(漢族)，講師，碩士.

郝利銘(1964-)，男(漢族)，教授,博士.