實(shí)驗(yàn)性動(dòng)物種植體周圍炎齦溝液中IL-1β與IL-6的測(cè)定

石卓瑾

種植體周圍炎是由于細(xì)菌聚集和機(jī)體免疫反應(yīng)引起的種植體周圍軟硬組織的炎癥反應(yīng)。種植體周圍齦溝液量及其中的細(xì)胞因子能夠反映種植體周圍軟硬組織炎癥情況，可作為種植體周圍炎癥早期診斷的指標(biāo)［1］。本實(shí)驗(yàn)建立比格犬實(shí)驗(yàn)性種植體周圍炎模型，檢測(cè)齦溝液量、齦溝液中IL-1β、IL-6含量的變化，探求種植體周圍炎齦溝液中上述細(xì)胞因子的表達(dá)水平。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料 成年比格犬5條(浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心);Straumann種植體(ITI，瑞士);Whatman 3#濾紙(Whatman公司，英國(guó));IL-1β、IL-6 試劑盒(Immunotech，法國(guó))。

1.2 實(shí)驗(yàn)過(guò)程 成年比格犬5條，全麻下拔除雙側(cè)下頜第二、三、四前磨牙，同期植入種植體，每側(cè)3枚，共計(jì)30枚。術(shù)后給予抗菌素，喂軟食。3個(gè)月后行二期手術(shù)連接基樁，采用Whatman 3#濾紙測(cè)齦溝液量;采用ELISA法測(cè)其中IL-1β、IL-6含量。種植體頸部栓結(jié)絲線，停止口腔衛(wèi)生護(hù)理，喂軟食，建立種植體周圍炎的動(dòng)物模型。2個(gè)月后再次測(cè)量其齦溝液量及上述細(xì)胞因子含量。

1.3 齦溝液的采集 每顆種植體選擇近遠(yuǎn)中2個(gè)位點(diǎn)采集齦溝液。將預(yù)先稱重的Whatman 3#濾紙(2 mm*20 mm)插入齦溝內(nèi)，有阻力時(shí)停止，停留30s后取出，置入EP管，稱重后加入PBS 200μl，置-70℃冷貯待檢。

1.4 IL-1β、IL-6的檢測(cè) 采用ELISA法按照相應(yīng)試劑盒使用說(shuō)明操作。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 12.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

兩組間齦溝液量，齦溝液內(nèi)IL-1β、IL-6含量有顯著差異(P ＜0.05)。齦溝液量，IL-1β、IL-6含量三者之間出現(xiàn)相應(yīng)增長(zhǎng)現(xiàn)象(表1)。

表1 種植體周圍炎組與健康種植體組齦溝液量和IL-1β、IL-6水平比較(x ± s，n=30)

3 討論

在眾多炎癥和免疫指標(biāo)中，炎性細(xì)胞因子在種植體周圍炎反應(yīng)及組織重建中的作用受到特別的關(guān)注，某些炎性細(xì)胞因子已經(jīng)被用于診斷和監(jiān)測(cè)種植體周圍組織的破壞。本實(shí)驗(yàn)比較正常種植體與種植體周圍炎的齦溝液量變化，發(fā)現(xiàn)在種植體周圍炎顯著升高，提示齦溝液量在一定程度上反映種植體周圍組織的炎癥狀況。

IL-1β是調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵因子，可影響骨和成纖維細(xì)胞的代謝。研究表明，牙周炎患者齦溝液中IL－1β水平顯著高于正常人［2］。IL-6是一種多效應(yīng)細(xì)胞因子，可誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞分化并分泌免疫球蛋白;參與骨吸收。這些功能都與組織的破壞有關(guān)［3］。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)種植體周圍炎時(shí)齦溝液中IL-1β、IL-6水平顯著升高，表明它們與種植體周圍炎關(guān)系密切，可作為種植體周圍炎早期診斷的有效檢測(cè)指標(biāo)，但其作用機(jī)制、兩者之間的聯(lián)系需要進(jìn)一步的研究。

［1］Heasman P.Peri-implant diseases.Dent Update，2010，37(8):511-516.

［2］Hultin M.Microbiological findings and host response in patients with peri-implantitis.Clin Oral Implants Res，2002，13(4):349.

［3］吳亞菲.牙周治療前后齦溝液中白細(xì)胞介素-6水平的變化.華西口腔醫(yī)學(xué)雜志，2001，19(2):99-101.