基底細(xì)胞樣型乳腺癌中葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白－1（GLUT－1）的表達(dá)及臨床意義

章 革，衛(wèi)廣輝

（1.營口市婦產(chǎn)兒童醫(yī)院 病理科，遼寧 營口115000；2.營口市中心醫(yī)院 病理科）

我們針對乳腺癌中惡性程度高、年輕化、易轉(zhuǎn)移、易復(fù)發(fā)的基底細(xì)胞樣型乳腺癌（basal－like breast carcinomas，BLBCS）為研究對象，深入探討葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白－1［1］在基底細(xì)胞樣型乳腺癌中的表達(dá)及與該腫瘤生物學(xué)行為特征的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 收集2005年5月－2011年6月營口市婦產(chǎn)兒童醫(yī)院及相關(guān)單位手術(shù)切除的乳腺癌患者石蠟標(biāo)本，經(jīng)免疫組化證實(shí)ER、PR、HER－2陰性，CK5／6陽性的標(biāo)本145例，non－BLBCS36例。乳腺癌患者均為女性，年齡28－72歲（BLBCS組平均年齡46.9歲、non－BLBCS組平均年齡49歲），所有切片均由兩名資深病理醫(yī)師復(fù)檢，并按照2003年WHO乳腺腫瘤病理學(xué)分類形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)［2］診斷。所有患者術(shù)前均未放行、化療。18例正常乳腺組織為癌旁乳腺組織（距癌組織邊緣≥4cm），經(jīng)病理醫(yī)師確認(rèn)為正常乳腺組織。

1.2 方法 兔抗人GLUT－1抗體購自福州邁新公司，工作濃度1∶100。SP法抗小鼠試劑盒購自福州邁新公司，參照試劑盒說明操作，關(guān)鍵步驟如下：切片常規(guī)脫蠟至水，高壓修復(fù)抗原，3%H2O2孵育箱孵育10min，DAB顯色，蘇木精對比染色，透明封固，以PBS代替一抗做陰性對照，胎盤組織做陽性對照。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) 參照 Cooper等［3］報道，GLUT－1的表達(dá)主要定位于乳腺癌細(xì)胞胞膜和（或）細(xì)胞質(zhì)，陽性標(biāo)準(zhǔn)為染成棕黃色，無色或者淡黃色為陰性，棕黃色或褐色為陽性。1%－10%癌細(xì)胞著色為（＋）、10%－50%癌細(xì)胞著色為（＋＋）、＞50%癌細(xì)胞著色為（＋＋＋）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，采用χ2檢驗(yàn)及Fishers確切概率檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 GLUT－1在 BLBCS、non－blbcs乳腺組織中的表達(dá) 見表1。

表1 GLUT－1在BLBCS、non－blbcs及正常乳腺組織中的表達(dá)

2.2 GLUT－1的表達(dá)與BLBCS各臨床病理特征之間的關(guān)系 GLUT－1的表達(dá)水平與腫瘤直徑、病理學(xué)分期呈正相關(guān)（P＜0.05），與患者年齡等指標(biāo)無相關(guān)性（P＜0.05），淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性組 GLUT－1的表達(dá)明顯高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05，表2）。

表2 臨床病理特征與GLUT－1表達(dá)的相關(guān)性

3 討論

基底細(xì)胞樣乳腺癌，是按乳腺癌基因表達(dá)系譜分類出的一種乳腺癌亞型?；准?xì)胞樣型乳腺癌的基因表達(dá)特點(diǎn)是：ER、PR和HER－2陰性表達(dá)，同時至少表達(dá)一種基底細(xì)胞角蛋白（CK5／6、CK14或CK17等）和（或）EGFR［4］?；准?xì)胞樣型乳腺癌細(xì)胞核異型性明顯，核分裂像多見，細(xì)胞增殖活性高，組織學(xué)分級絕大多數(shù)為Ⅱ—Ⅲ級。組織形態(tài)學(xué)多呈實(shí)性片狀分布，常見伴有惡性腫瘤凝固性壞死，易通過血道轉(zhuǎn)移至肺、腦。BLBCS因其獨(dú)特的腫瘤生物學(xué)行為和分子生物學(xué)表型特點(diǎn)，而成為近年來，臨床診療與學(xué)術(shù)領(lǐng)域研究、關(guān)注的熱點(diǎn)。

葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白－1（GLUT－1），是哺乳動物細(xì)胞糖跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的主要載體，主要功能是運(yùn)載葡萄糖進(jìn)入上皮細(xì)胞并參與及促進(jìn)細(xì)胞生物代謝。它在正常組織中的表達(dá)僅限于紅細(xì)胞及組織屏障間，如血腦屏障等。

有研究表明，GLUT－1表達(dá)與直腸腺癌、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌、腎癌、食管癌、非小細(xì)胞肺癌、膽囊癌、膀胱癌、胃腸上皮化生癌、胰腺癌等密切相關(guān)，其表達(dá)水平與腫瘤轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)［51011］。而有關(guān)GLUT－1表達(dá)與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及腫瘤預(yù)后評估等方面的研究報道少見。

有學(xué)者報道，在惡性腫瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)中，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1呈高表達(dá)，提示GLUT－1在去分化、胚胎化的腫瘤細(xì)胞短周期分裂過程中，對瘤細(xì)胞能量和生物合成物質(zhì)的需求提供了細(xì)胞生物學(xué)介導(dǎo)、蓄積及轉(zhuǎn)運(yùn)，同時，加快糖酵解及形成腫瘤新生血管系統(tǒng)，作為對微循環(huán)缺血、缺氧的代償［6］，并通過該項途徑攝取大量葡萄糖，來補(bǔ)充細(xì)胞異常增殖的需求。我們在實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)：在基底細(xì)胞樣型乳腺癌的免疫組化標(biāo)記中，特別在腫瘤凝固性壞死灶與正常組織相接壤區(qū)域，可見GLUT－1的高表達(dá)。另有學(xué)者提出：隨著腫瘤體積的增加，臨床分期的進(jìn)展，腫瘤缺氧更加嚴(yán)重。需氧增加，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞表達(dá)GLUT－1，通過局部誘導(dǎo)獲得營養(yǎng)。刺激內(nèi)皮細(xì)胞增生、分化、遷移、生成新血管。同時，加重的缺氧也誘導(dǎo)缺氧誘導(dǎo)因子表達(dá)進(jìn)一步刺激血管生成［7］。作為對微環(huán)境缺血、缺氧的代償，借以維持腫瘤內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，從而達(dá)到腫瘤細(xì)胞逃脫缺血、缺氧的損害。符合樊健等的觀點(diǎn)。同時，在大樣本的比對中：GLUT－1的高表達(dá)，多集中在組織學(xué)分級Ⅱ－Ⅲ級，且隨著組織學(xué)分級的加深，陽性表達(dá)呈明顯上調(diào)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況是決定其預(yù)后的重要因素［8］。本研究組腋下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與GLUT－1高表達(dá)呈正相關(guān)。提示：GLUT－1的高表達(dá)參與基底細(xì)胞樣型乳腺癌的惡性轉(zhuǎn)化、增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移、以及腫瘤分子學(xué)介導(dǎo)密切相關(guān)，與郝朗松等［9］的觀點(diǎn)一致。

本實(shí)驗(yàn)研究采用免疫組織化學(xué)方法，對乳腺癌、癌旁組織和正常乳腺組織中GLUT－1的表達(dá)和分布情況進(jìn)行檢測分析，結(jié)果顯示，GLUT－1在基底細(xì)胞樣乳腺癌、非基底細(xì)胞樣乳腺癌、癌旁組織和乳正常腺組織中，均有不同程度的表達(dá)。GLUT－1的陽性表達(dá)在乳腺正常組織、癌旁組織、其他浸潤性癌組織和基底細(xì)胞樣癌組織中，依次順序增高，且在各實(shí)驗(yàn)組之間的差異均有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義；GLUT－1的表達(dá)與BLBCS的組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，及TNM分期呈正相關(guān)；同時，該研究結(jié)果提示：在BLBCS的發(fā)生、發(fā)展過程中，GLUT－1過表達(dá)，提供了BLBCS癌細(xì)胞的過度增殖、異常分化及凋亡異常的生物學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)，促進(jìn)乳腺組織發(fā)生癌變。因此，我們認(rèn)為：葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（GLUT－1）的高表達(dá)，標(biāo)志著乳腺上皮細(xì)胞的異常增殖，提示GLUT－1在乳腺癌的發(fā)生與發(fā)展過程中，具有重要的生物學(xué)促進(jìn)作用，可作為乳腺癌預(yù)后良否判斷的重要指標(biāo)之一。

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