健康成人尿酶及微量蛋白研究分析

譚 艷，韓曉芳，賈海琴

（內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，內(nèi)蒙古 呼和浩特010017）

尿液酶及微量蛋白的分析檢測(cè)，做為一種無(wú)創(chuàng)傷性檢驗(yàn)，在臨床腎臟疾病的早期診斷起著重要的作用［1－2］。本文對(duì)120名健康成人尿海藻糖酶（trehalase，T）、尿 N－乙酰－β－D 氨基葡萄糖苷酶 （N－acetyl－D－glucosaminidase，NAG）、r－谷氨酰轉(zhuǎn)酞酶（gamma－glutamyl transferase，GGT）3種尿酶及尿β2－微球蛋白（β2－MG）進(jìn)行了研究分析。

1 對(duì)象和方法

1.1 病例選擇 在我院院進(jìn)行健康體檢、均排除肝腎等疾病者120名，男68名，女52名，年齡18－56歲。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 標(biāo)本采集 留晨尿，離心后進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)儀器：OLYMPUS AU2700

1.2.2 尿T測(cè)定 采用Sasai－Takedatsu M［3］測(cè)定方法，即將尿液標(biāo)本經(jīng)過(guò)SephadexG－25凝膠層析柱除去內(nèi)源性葡萄糖后加入海藻糖，海藻糖被海藻糖酶催化分解生成葡萄糖，檢測(cè)生成的葡萄糖，以每小時(shí)每升尿液中釋放多少微摩爾的葡萄糖量作為海藻糖酶的活性濃度（μmol／h.L）。葡萄糖測(cè)定采用葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化物酶偶聯(lián)法，試劑由北京中生公司提供。

1.2.3 尿 NAG（IU／L）測(cè)定采用比色法測(cè)定，尿β2－MG（mg／L）采用免疫比濁法測(cè)定。由于尿β2－MG受標(biāo)本存放時(shí)間、溫度及pH的影響，因此標(biāo)本采集后用1mol／L的NaOH調(diào)節(jié)到pH7－9并及時(shí)在2h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)［4］。尿 GGT（U／L）采用酶速率法測(cè)定；尿肌酐（g／L）采用速率比色法測(cè)定，試劑由OLYMPUS公司提供。檢測(cè)儀器：OLYMPUS AU2700。

1.2.4 為了消除尿量變化對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)的影響，尿T、NAG和GGT結(jié)果與尿肌酐（Cr）比值計(jì)算。

1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，呈正態(tài)分布數(shù)據(jù)比較用t檢驗(yàn)，呈偏態(tài)分布數(shù)據(jù)用中位數(shù)表示，數(shù)據(jù)比較用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)（Mann－Whitney檢驗(yàn)）。P＜0.05為具有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 120例健康者尿T、NAG 、GGT、β2－MG各項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果

尿T和β2－MG呈正偏態(tài)分布（Z＝1.124、1.12；P＝0.16、0.162），結(jié)果分別為6.95±3.92 μmol／h.gCr、0.14±0.09（mg／gCr）；尿 NAG、GGT呈偏態(tài)分布（Z＝1.626、1.369；P＝0.01、0.047），結(jié)果分別為6.2（5.3－7.7）、33.4（18.5－43.4）（U／gCr）［中位數(shù)（四分位數(shù)）］

2.2 120例健康者按性別分兩組，兩組尿T、NAG、GGT、β2－MG檢測(cè)結(jié)果男女間比較見(jiàn)附表1。

表1 不同性別尿T、NAG、GGT、β2－MG檢測(cè)結(jié)果

3 結(jié)果

3.1 尿海藻糖酶為近似正態(tài)分布，男女間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，按照95%的的參考范圍（±1.96s）為0－14.6μmol／h.gCr。

3.2 NAG為偏態(tài)分布，男女間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，第95 百分位數(shù)為 11.2；其參考范圍為 0－11.2 U／gCr。

3.3 GGT為偏態(tài)分布，男女間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，第95百分位數(shù)為56.6，其正常參考范圍為0－56.6 U／gCr。

3.4 尿β2－MG為正偏態(tài)分布，男女間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，按照95%的參考范圍（±1.96s）為0－0.32 U／gCr。

4 討論

尿海藻糖酶是近幾年發(fā)展的新的近端腎小管損害指標(biāo)，它僅產(chǎn)生于近端腎小管和小腸黏膜上皮細(xì)胞，由于在正常體液時(shí)帶有大量負(fù)電荷，血中濃度低、分子量大，故不能從腎小球?yàn)V過(guò)。因此，尿中海藻糖酶只源于近端腎小管上皮細(xì)胞。在腎小管上皮細(xì)胞受損時(shí)就會(huì)發(fā)生改變，即能早期、敏感地反映近端腎小管上皮細(xì)胞的損害［5，6］。NAG來(lái)源于近端小管上皮細(xì)胞的溶酶體，當(dāng)腎臟實(shí)質(zhì)性病變時(shí) 腎小管上皮細(xì)胞的破壞可使尿中NAG活性顯著增高，對(duì)于腎小管間質(zhì)病變NAG是一個(gè)很靈敏且特異性較強(qiáng)的反映腎實(shí)質(zhì)損傷的指標(biāo)［2，7］。β2－MG是可通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)的低分子量蛋白質(zhì)，幾乎全部被近曲小管重吸收，在近端腎小管損傷時(shí)尿β2－MG升高［2，7，8］。人體大多臟器含豐富的 GGT，但尤以腎臟含量最高。尿GGT是一種細(xì)胞分泌酶，主要來(lái)自腎近曲小管的刷狀緣，其生理功能是催化谷胱甘肽或其他谷胱?；亩嚯牡墓劝被D(zhuǎn)移到合適的受體上去。有報(bào)道認(rèn)為GGT可作為診斷早期腎損害的依據(jù)［9］。

本研究選擇120例健康者體檢者進(jìn)行了尿海藻糖酶及尿NAG、尿GGT、尿β2－MG的檢測(cè)分析，確立了尿海藻糖酶的正常參考范圍為0－14.6μmol／h.gCr、尿 NAG的正常參考范圍為0－11.2U／gCr、尿GGT的正常參考范圍為0－56.6U／gCr、尿β2－MG的正常參考范圍為0－0.32U／gCr。上述指標(biāo)正常參考范圍的確立，為其在臨床上合理應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，有助于臨床腎臟功能的判斷及腎臟損傷性疾病的診斷及治療。

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