■杜 強(qiáng)林黑著王 蕓黃 忠姜 松

（1.南海水產(chǎn)研究所，廣東廣州 510300；2.貴州省水產(chǎn)研究所，貴州貴陽 550025）

我國海域遼闊，海水魚資源豐富，是世界上水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)相對(duì)發(fā)達(dá)的國家之一，豐富多樣的海水種質(zhì)資源為我國水產(chǎn)業(yè)及國民經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展提供了重要的物質(zhì)基礎(chǔ)[1]。但隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展，由養(yǎng)殖規(guī)模擴(kuò)大、環(huán)境影響、飼料原料組分等因素引起水產(chǎn)動(dòng)物各種疾病的頻繁發(fā)生，嚴(yán)重影響了養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益。目前在人類的生理生化參數(shù)研究上比較系統(tǒng)，而對(duì)于魚類生理生化參數(shù)的研究報(bào)道相對(duì)不足，對(duì)魚病的判斷也還主要停留于定性描述，很難作出定量分析。

血液是動(dòng)物體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)的重要組成部分，起著物質(zhì)運(yùn)輸、生理調(diào)節(jié)及生理防御等重要功能[2]。血液指標(biāo)值能反映物種的屬性和動(dòng)物的生理狀態(tài)。魚類血液與其代謝、營養(yǎng)及健康狀況有著密切的聯(lián)系，因此血液指標(biāo)不僅被廣泛地用來評(píng)價(jià)魚類的健康、營養(yǎng)和對(duì)環(huán)境的適應(yīng)狀況，也是重要的生理、病理和毒理學(xué)指標(biāo)，而且在環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域、遺傳育種等方面也具有重要意義[3]。本文主要對(duì)幾種海水養(yǎng)殖魚類部分血清生化指標(biāo)進(jìn)行了比較研究。通過本研究來反映魚類之間某些血液生化指標(biāo)的差異，以豐富血液學(xué)研究內(nèi)容，為海水養(yǎng)殖魚類的遺傳育種、飼養(yǎng)繁殖和病理研究提供基礎(chǔ)資料。

1 材料和方法

1.1 材料來源和樣品采集

白鰳魚、斜帶髭鯛、紅魚、卵形鯧鲹和鱸魚采集于南海水產(chǎn)研究所深圳龍崗基地試驗(yàn)池塘其形態(tài)規(guī)格見表 1。養(yǎng)殖水鹽度27‰～31‰、水溫（26±4） ℃、NH4-N＜0.5 mg/l、DO＞5 mg/l，pH值為8.0～8.5。試驗(yàn)魚多為空腹或很少有食物，將魚用10 mg/l的丁香酚（購于上海醫(yī)療器械股份有限公司）麻醉后[4]，斷尾法取血5 ml，8 000 r/min離心10 min，取上清液血清，保存于-20℃，以備下一步測定[5]。待測樣品保存于4℃中，當(dāng)天完成測定。

1.2 測定項(xiàng)目及方法

血清葡萄糖，血脂類的膽固醇和甘油三酯，總蛋白和白蛋白含量，肝功類的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶，腎功類的尿素氮，使用配套的羅氏試劑盒在羅氏C311生化全自動(dòng)分析儀上分析測定。

表1 5種試驗(yàn)魚的形態(tài)規(guī)格測量

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel和SPSS17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，先對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差（One-way ANOVA）分析，若有顯著差異，再進(jìn)行Duncan's法多重比較，P＜0.05表示差異顯著，所有數(shù)值用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（mean±SE）”表示。

2 結(jié)果

本次試驗(yàn)共測定白鰳魚、斜帶髭鯛、紅魚、卵形鯧鲹和鱸魚血液生化指標(biāo)，結(jié)果見表2。所有測定值變異系數(shù)小于50%，大部分變異系數(shù)都小于20%，其測定數(shù)據(jù)可信[6]。

顯著性分析顯示，五種魚類的血糖、血脂和堿性磷酸酶都存在顯著差異（P＜0.05），測定值在2～7倍之間波動(dòng)變化?？偟鞍祝═P）測定值卵形鯧鲹和鱸魚未發(fā)生顯著變化。白鰳魚和斜帶髭鯛的尿素氮（UREAL）測定值未發(fā)生顯著變化。白鰳魚的白蛋白（ALB）和球蛋白（GLO）顯著高于其他魚類。斜帶髭鯛血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）測定值最高，鱸魚的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）測定值顯著低于其它幾種魚類。

表2 試驗(yàn)魚血清血糖、血脂蛋白參數(shù)和肝腎功能指標(biāo)測定結(jié)果

3 討論

血液是具有黏滯性的循環(huán)于心血管系統(tǒng)中的流動(dòng)組織，與組織間液和淋巴液組成細(xì)胞外液，其生化成分能反映動(dòng)物的組織器官代謝狀態(tài)。目前，很多學(xué)者采用臨床醫(yī)學(xué)生化技術(shù)和方法，測定研究了鱸魚（Lateolabrax japonicus）[7-8]、紅鰭笛鯛（Lutjanus erythopterus）[9]、鯔魚（Mugil cephalus）[10]、卵 形 鯧 鲹（Trachinotus ovatus）[11-12]和歐洲鰻鱺（Anguillaanguilla）[13-14]等海水養(yǎng)殖魚類血液的部分生化指標(biāo)。因進(jìn)行研究工作的條件不同(分析測試手段日益更新、儀器分析誤差大等)，導(dǎo)致對(duì)同種魚的測定結(jié)果之間出現(xiàn)一定的差異，不便進(jìn)行不同魚類之間生化指標(biāo)的比較研究。本試驗(yàn)以白鰳魚、斜帶髭鯛、紅魚、卵形鯧鲹和鱸魚幾種常見海水養(yǎng)殖魚類為對(duì)象，測定對(duì)比它們在血糖、血脂以及肝腎功能方面的差異。測定結(jié)果顯示，五種魚類的血糖、血脂和堿性磷酸酶都存在顯著差異，除卵形鯧鲹和鱸魚之間的蛋白參數(shù)未出現(xiàn)顯著變化外，其他指標(biāo)均存在顯著變化。這表明在相同環(huán)境下，不同海水養(yǎng)殖魚類有生理生化差異。

魚體中的血糖含量處于動(dòng)態(tài)平衡，易受到環(huán)境因子的刺激而發(fā)生波動(dòng)，一般活動(dòng)性強(qiáng)的魚類，其血糖含量較高[15]。在本試驗(yàn)所測定的幾種魚類，血糖含量由高至低依次是鱸魚＞紅魚＞卵形鯧鲹＞白鰳魚＞斜帶髭鯛，這與本試驗(yàn)環(huán)境下觀察到的魚類的活動(dòng)劇烈程度大致相符。膽固醇和甘油三酯是動(dòng)物體內(nèi)血脂的主要組成部分，其含量的變化會(huì)影響魚體代謝和蛋白含量，本試驗(yàn)中血脂含量波動(dòng)較大，與不同魚類的生活習(xí)性和特點(diǎn)有關(guān)，這與對(duì)淡水魚的血液生化指標(biāo)研究結(jié)果相似[6]。

在血液蛋白組成方面,白蛋白含量遠(yuǎn)小于球蛋白含量,其比值也應(yīng)當(dāng)小于1[11]。同時(shí)血液中某種血細(xì)胞的含量通常與其生理功能相關(guān)[16]。從表2中的蛋白參數(shù)比較，白鰳魚的血清總蛋白、白蛋白和球蛋白相對(duì)比其他魚類高（紅魚的球蛋白除外），斜帶髭鯛最低。通常球蛋白含量越高，血液中紅細(xì)胞的脆性越小，當(dāng)生活環(huán)境發(fā)生不良變化時(shí)，血液細(xì)胞蛋白組成會(huì)發(fā)生較大變化，為了抵御外來影響，蛋白組成會(huì)出現(xiàn)變化，因而血清蛋白可以用來診斷魚類健康、營養(yǎng)等狀況[17]。本試驗(yàn)未對(duì)幾種魚類不同環(huán)境下的血清做對(duì)比，這有待進(jìn)一步的研究。

AST、ALT和ALP是反映肝腎最敏感的酶學(xué)指標(biāo)，正常時(shí)含量較低，因此其活性變化對(duì)肝病的診斷治療具有重要價(jià)值[18]。在本試驗(yàn)中，不同魚類的酶值有一定差異，斜帶髭鯛的AST和ALT相對(duì)較大，ALP的大小依次為白鰳魚＞紅魚＞斜帶髭鯛＞鱸魚＞卵形鯧鲹。UREAL作為診斷人腎功能損壞與否的重要指標(biāo)，具有較高的敏感性與特異性[19]，但對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的檢測還少有報(bào)道。本試驗(yàn)中幾種魚類尿素氮含量在0.48～1.74區(qū)間變化，但變異系數(shù)相對(duì)其他指標(biāo)較大，其中卵形鯧鲹和白鰳魚超過了30%，這對(duì)血清尿素氮還需做進(jìn)一步的測定統(tǒng)計(jì)。除白鰳魚的ALP測定值對(duì)比變化較大外，總體來看所測肝腎功能血液生化指標(biāo)的變化范圍相對(duì)較小，這可能與池塘養(yǎng)殖條件、環(huán)境對(duì)魚類產(chǎn)生刺激的因素較少有關(guān)，同時(shí)也表明同種魚類在同一環(huán)境下，其生理生化指標(biāo)可以具有較為理想的穩(wěn)定性。

對(duì)魚類血液生化指標(biāo)的研究有待通過大量的對(duì)比研究和統(tǒng)計(jì)分析來探討魚類的血液指標(biāo)變化區(qū)間和規(guī)律，進(jìn)而系統(tǒng)有效地評(píng)價(jià)魚類的營養(yǎng)健康狀況及對(duì)環(huán)境變化的適應(yīng)能力。這不僅在魚類生理基礎(chǔ)理論認(rèn)知方面是必要的，而且對(duì)實(shí)際的生產(chǎn)養(yǎng)殖也具有深刻的意義。