朱夢(mèng)玉 邵春益 傅瑤

角膜內(nèi)皮細(xì)胞再生研究新進(jìn)展

朱夢(mèng)玉 邵春益 傅瑤

人角膜內(nèi)皮細(xì)胞的主要功能是維持角膜透明性，角膜內(nèi)皮單層發(fā)育成熟形成細(xì)胞接觸后，內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，但并沒(méi)有退出細(xì)胞周期。角膜內(nèi)皮細(xì)胞的增殖有多種因素的參與和影響，接觸抑制和G1期抑制使細(xì)胞增殖暫時(shí)停止；細(xì)胞因子TGF-β2抑制人角膜內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期S期，而EGF、FGF、NGF則能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖；ROCK抑制劑Y-27632能夠促進(jìn)角膜內(nèi)皮細(xì)胞的粘連，有助于內(nèi)皮細(xì)胞的損傷修復(fù)。體外培養(yǎng)角膜內(nèi)皮前體細(xì)胞、誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞向角膜內(nèi)皮細(xì)胞分化，為今后治療角膜內(nèi)皮失代償提供了新方向。

角膜；內(nèi)皮細(xì)胞；細(xì)胞周期；細(xì)胞增殖；干細(xì)胞

角膜的解剖結(jié)構(gòu)分為5層，由外向內(nèi)依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮層[1]。角膜內(nèi)皮層由單層角膜內(nèi)皮細(xì)胞組成，通過(guò)屏障功能和離子泵功能維持角膜的透明性[2-3]。其中，人角膜內(nèi)皮細(xì)胞（human corneal endothelial cells,HCECs）的形態(tài)完整和功能健全至關(guān)重要，同時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞密度必須保持在臨界值400 ～ 500個(gè)/mm2以上才能維持角膜的通透性[4]。由于體內(nèi)角膜內(nèi)皮細(xì)胞增殖受限，角膜內(nèi)皮層損傷修復(fù)的主要方式為內(nèi)皮細(xì)胞體積增大和周邊的細(xì)胞遷移，因此HCECs損耗過(guò)多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞密度降低或泵功能下降[5]，角膜內(nèi)皮層的功能受損則會(huì)引起角膜水腫、透明性下降進(jìn)而影響視功能，例如臨床上常見(jiàn)的大泡性角膜病變，F(xiàn)uch’s角膜變性等等。盡管穿透性角膜移植術(shù)和角膜內(nèi)皮移植術(shù)能夠重新恢復(fù)角膜透明性，但對(duì)供體角膜內(nèi)皮質(zhì)量和細(xì)胞數(shù)量要求較高，同時(shí)也存在術(shù)后免疫排斥、內(nèi)皮失功、繼發(fā)青光眼等問(wèn)題[6]。由于供體角膜尤其是適合內(nèi)皮移植的角膜嚴(yán)重缺乏，尋找新的方法來(lái)治療角膜內(nèi)皮失代償成為目前研究的焦點(diǎn)。因?yàn)镠CECs大多數(shù)處于細(xì)胞周期G1期，分裂增殖會(huì)暫時(shí)停止，所以HCECs難以用標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)方式實(shí)現(xiàn)增殖[7]。因此，通過(guò)信號(hào)通路或細(xì)胞因子等影響因素調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞克服G1期抑制是目前角膜內(nèi)皮增殖相關(guān)研究的熱點(diǎn)。本文將對(duì)HCECs增殖能力和再生的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

一、角膜內(nèi)皮細(xì)胞的增殖能力

角膜內(nèi)皮細(xì)胞的增殖能力在不同物種之間存在差異。鼠、兔和牛的角膜內(nèi)皮細(xì)胞具有較強(qiáng)的增殖能力，在體外培養(yǎng)時(shí)能夠快速地進(jìn)行增殖分化。而貓、猴和人的角膜內(nèi)皮細(xì)胞增殖能力較弱，在體外培養(yǎng)中增殖分化也相對(duì)較難[8]。

1.體內(nèi)角膜內(nèi)皮細(xì)胞的增殖能力：HCECs來(lái)源于胚胎期神經(jīng)嵴細(xì)胞，角膜內(nèi)皮層從出生后開(kāi)始發(fā)育，HCECs會(huì)在角膜內(nèi)皮單層發(fā)育成熟后停止增殖，且內(nèi)皮細(xì)胞在正常條件下將終生保持無(wú)復(fù)制狀態(tài)。所以，嬰幼兒和成人體內(nèi)HCECs分裂增殖速率遠(yuǎn)不能滿足死亡或受損細(xì)胞的替換，導(dǎo)致HCECs密度隨著年齡增長(zhǎng)和損傷而降低。據(jù)統(tǒng)計(jì)，人體中HCECs的數(shù)量平均每年減少0.3﹪～ 0.6﹪[9]。但是，盡管成人體內(nèi)的HCECs在細(xì)胞周期G1期受到抑制停止增殖，但沒(méi)有退出細(xì)胞周期，仍具有分裂增殖的能力[8]。

2.體外角膜內(nèi)皮細(xì)胞的增殖能力：從供體角膜分離得到的HCECs能夠在體外培養(yǎng)成活，且能進(jìn)行有限次數(shù)的傳代[7]。Gerde等[10]使用Ki67染色離體角膜損傷模型的HCECs，研究結(jié)果顯示在損傷部位的HCECs Ki67染色陽(yáng)性，而損傷外周沒(méi)有Ki67染色，由此推斷當(dāng)細(xì)胞接觸抑制解除時(shí)，存在有絲分裂原的HCECs能夠進(jìn)入和完成細(xì)胞周期。

體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)HCECs的活力受角膜供體年齡和角膜不同部位影響。年輕供體與老齡供體的HCECs相比，年輕供體的內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)速度更快而且可傳代次數(shù)更多[11-12]；中央和周邊部HCECs的相對(duì)增殖能力也不相同，與周邊部HCECs相比，中央和中央旁的內(nèi)皮細(xì)胞具有較高的密度、較高的細(xì)胞表面變異系數(shù)，且六邊形細(xì)胞所占百分比較低。另外，雖然各部位的HCECs密度均會(huì)隨年齡的增長(zhǎng)而降低，但周邊部細(xì)胞密度的降低率最低，提示周邊部的內(nèi)皮細(xì)胞有祖細(xì)胞或干細(xì)胞樣特性，可能周邊部是角膜內(nèi)皮再生的部位，可以向中央?yún)^(qū)提供內(nèi)皮細(xì)胞[13]。

二、與角膜內(nèi)皮細(xì)胞增殖相關(guān)的因素

1.接觸抑制現(xiàn)象：角膜內(nèi)皮層來(lái)源于胚胎期的神經(jīng)嵴間充質(zhì)細(xì)胞，隨著眼部的發(fā)育，細(xì)胞由角膜的周邊部向中央增殖和遷移從而形成單層角膜內(nèi)皮，內(nèi)皮細(xì)胞在細(xì)胞連接形成后因接觸抑制停止增殖。Joyce等[14]使用初生大鼠的角膜內(nèi)皮細(xì)胞研究細(xì)胞接觸抑制，結(jié)果顯示角膜內(nèi)皮細(xì)胞增殖分化停止和成熟的細(xì)胞間連接形成的時(shí)間有相關(guān)性，且p27Kip1蛋白的表達(dá)量也會(huì)相應(yīng)增加。由此推測(cè)，細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶抑制因子（CDK inhibitors，CKIs）參與調(diào)節(jié)角膜內(nèi)皮細(xì)胞接觸抑制，其中CKIs家族主要成員Cip/Kip和INK誘導(dǎo)細(xì)胞停留于G1期[13]。Joyce等[15]、Yoshida等[16]對(duì)比p27Kip1蛋白水平在大鼠與人的角膜內(nèi)皮細(xì)胞融合與亞融合培養(yǎng)接觸抑制中的差異，研究發(fā)現(xiàn)p27Kip1蛋白水平在融合培養(yǎng)中的含量是亞融合培養(yǎng)的20倍，當(dāng)融合培養(yǎng)使用EDTA解除細(xì)胞間連接后，p27Kip1蛋白的含量大大地減少。以上結(jié)果表明，p27Kip1蛋白在細(xì)胞接觸抑制中起著重要作用。

2.G1期抑制：為了研究HCECs是否能被誘導(dǎo)分化從而克服G1期抑制，Joyce等[17]通過(guò)體外siRNA誘導(dǎo)使細(xì)胞p21Cip1蛋白和p16INK4a蛋白水平降低，研究發(fā)現(xiàn)進(jìn)入細(xì)胞周期的HCECs數(shù)量增加，但p27Kip1蛋白水平降低只對(duì)年輕供體的HCECs產(chǎn)生作用。此研究證實(shí)了通過(guò)減少CKIs可以使HCECs克服G1期抑制，從而可以促進(jìn)細(xì)胞增殖分裂。還有研究表明核轉(zhuǎn)錄因子E2F2的主要作用是激活細(xì)胞進(jìn)入S期[18]，McAlister等[19]使用腺病毒載體將E2F2轉(zhuǎn)入體外HCECs中，結(jié)果顯示E2F2異位表達(dá)能夠誘導(dǎo)HCECs進(jìn)入S期，且HCECs密度顯著增加，由此證實(shí)異位表達(dá)E2F2對(duì)HCECs的增殖分裂有促進(jìn)作用。

3.生長(zhǎng)因子：轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β2（transforming growth factor-β2,TGF-β2)是穩(wěn)定的多功能多肽生長(zhǎng)因子，內(nèi)源性TGF-β2在正常人房水中被激活且高濃度表達(dá)，對(duì)修復(fù)HCECs有重要作用[20]。研究表明TGF-β2的某些特定成分只在胚胎期的HCECs中存在，成人期不表達(dá)[21]。外源性和內(nèi)源性TGF-β2均能抑制HCECs進(jìn)入細(xì)胞周期S期。TGF-β2對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖抑制作用有顯著的濃度和時(shí)間依賴性，可能與先后誘導(dǎo)p27Kip1蛋白和p21Cip1蛋白表達(dá)量的增加將內(nèi)皮細(xì)胞拘留在G1/G0期有關(guān)[8]。TGF-β2以劑量依賴的方式抑制HCECs的增殖，而TGF-β I型受體激酶抑制劑可以阻斷此作用。在HCECs的遷移過(guò)程中，暴露于TGF-β2的HCECs會(huì)增加細(xì)胞移行，且加入成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2( fi broblast growth factor 2,FGF-2)后有協(xié)同作用。另外，由有絲分裂原激活的蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路參與HCECs的遷移，TGF-β2和FGF-2都能誘導(dǎo)p38磷酸化且共同作用時(shí)會(huì)產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)[22]。

細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)也與HCECs的增殖有關(guān)。HCECs表達(dá)了一系列正性生長(zhǎng)因子的受體，如表皮生長(zhǎng)因子（epidermal growth factor,EGF）、FGF、神經(jīng)生長(zhǎng)因子（nerve growth factor,NSF）等，這些細(xì)胞因子對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用[13]。其中，EGF與受體結(jié)合后發(fā)生磷酸化作用能夠發(fā)起信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)使HCECs進(jìn)入細(xì)胞周期，從而刺激內(nèi)皮細(xì)胞的增殖[23-24]。特異性抑制蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP1B）的活性，能夠維持EGF誘導(dǎo)的EGF受體酪氨酸自體磷酸化作用，同時(shí)也能增加進(jìn)入細(xì)胞周期的HCECs的數(shù)量。因此，抑制正性生長(zhǎng)因子信號(hào)的下調(diào)可能增加增殖的HCECs數(shù)量[25]。

4.Rho/ROCK通路：Rho蛋白及其下游的Rho相關(guān)卷曲螺旋形成蛋白激酶（rho associated coiledcoil forming protein kinase,ROCK）是培養(yǎng)成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞點(diǎn)狀緊密連接的基本要素，Rho/ROCK通路對(duì)調(diào)節(jié)細(xì)胞連接和細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性有重要作用[26]。Pipparelli等[27]研究指出ROCK抑制劑Y-27632作用于體外HCECs能夠促進(jìn)細(xì)胞連接和抑制凋亡、增加增殖的細(xì)胞數(shù)量和促進(jìn)體外或動(dòng)物模型中角膜內(nèi)皮的損傷修復(fù)。Y-27632沒(méi)有毒性作用，對(duì)細(xì)胞的活力也沒(méi)有影響。Y-27632對(duì)誘導(dǎo)HCECs的增殖沒(méi)有直接作用，但能夠顯著地增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞連接、修復(fù)損傷和改變體內(nèi)外細(xì)胞的形態(tài)，其中Y-27632對(duì)HCECs的細(xì)胞連接的影響有時(shí)間和劑量依賴性[28]。

三、體外角膜內(nèi)皮細(xì)胞的增殖培養(yǎng)

1.角膜內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)方法：使用組織工程或角膜內(nèi)皮細(xì)胞替換療法，將體外培養(yǎng)的HCECs直接注射入體內(nèi)，這種方式有助于緩解供體角膜的缺乏[29-30]。從供體角膜分離的HCECs可以在體外培養(yǎng)，內(nèi)皮細(xì)胞能在細(xì)胞接觸抑制解除后進(jìn)入和完成細(xì)胞周期，且能夠有限次數(shù)地傳代。Li等[7]發(fā)現(xiàn)了一種有效的體外分離、培養(yǎng)和擴(kuò)增HCECs的方法，使用膠原酶A從供體角膜消化分離得到HCECs，置于無(wú)血清高鈣培養(yǎng)液中，在經(jīng)過(guò)短暫的胰蛋白酶/EDTA處理后，HCECs能夠在添加激素的上皮細(xì)胞培養(yǎng)液（SHEM）中增殖，形成六邊形的單層細(xì)胞并含有特征性的細(xì)胞連接。

多種用于離體培養(yǎng)HCECs的培養(yǎng)液已被報(bào)導(dǎo)，但實(shí)驗(yàn)的結(jié)果與供體角膜活力相關(guān)，因此Peh等[31]使用成對(duì)的供體角膜對(duì)比研究，消除供體角膜活力的影響，結(jié)果顯示使用OptiMEM-I培養(yǎng)液和Ham's F12/M199培養(yǎng)液的HCECs更有活力，能夠傳三代且表達(dá)特征性標(biāo)志物，而其它培養(yǎng)液中內(nèi)皮細(xì)胞只能傳一代或者兩代。隨著細(xì)胞傳代的次數(shù)增加，內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)會(huì)向成纖維細(xì)胞樣改變，最終造成內(nèi)皮細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化[32-33]。

Okumura等[34]研究發(fā)現(xiàn)在體外培養(yǎng)HCECs時(shí)，培養(yǎng)液中加入TGF-β受體選擇性抑制劑SB431542后，呈成纖維細(xì)胞樣改變的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量顯著下降。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，體外培養(yǎng)中HCECs的生長(zhǎng)受初始的細(xì)胞種植密度影響，當(dāng)種植密度不理想會(huì)導(dǎo)致HCECs飽和狀態(tài)時(shí)的密度減小且增殖能力降低[35]。Peh等[36]研究發(fā)現(xiàn)在體外培養(yǎng)時(shí)，HCECs接種的最適密度為不少于10 000個(gè)/cm2。

2.角膜內(nèi)皮前體細(xì)胞增殖培養(yǎng)：Yokoo等[37]研究發(fā)現(xiàn)位于周邊部的HCECs的增殖能力較強(qiáng)，周邊部的內(nèi)皮細(xì)胞有祖細(xì)胞或干細(xì)胞樣特性，可以向中央部提供內(nèi)皮細(xì)胞，可能是HCECs的前體細(xì)胞，可通過(guò)克隆培養(yǎng)方法在體外擴(kuò)增。從HCECs分離出前體細(xì)胞的克隆球有優(yōu)先自我更新能力，通過(guò)克隆球得到的HCECs可以成功培養(yǎng)出具有功能性的HCECs系[28]。使用克隆形成試驗(yàn)分離得到的前體細(xì)胞與原始細(xì)胞相比，富集的前體細(xì)胞含有更長(zhǎng)的端粒、更有活性的端粒酶和更有活力的子代[38]。因此，可以通過(guò)克隆形成試驗(yàn)篩選得到年輕的內(nèi)皮前體細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)。

四、干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為角膜內(nèi)皮細(xì)胞

誘導(dǎo)干細(xì)胞或多潛能干細(xì)胞等分化成角膜內(nèi)皮細(xì)胞為HCECs再生的研究開(kāi)辟了新方向。

1.角膜內(nèi)皮細(xì)胞干細(xì)胞/祖細(xì)胞：近年來(lái)，有研究認(rèn)為角膜內(nèi)皮也可能存在有干細(xì)胞或祖細(xì)胞。Lgr5激酶是Wnt信號(hào)通路的靶目標(biāo)，是老鼠的腸、胃和毛囊等干細(xì)胞的標(biāo)記物[39-41]，因此Lgr5陽(yáng)性可以證明細(xì)胞具有某些干細(xì)胞/祖細(xì)胞特性。Hirata-Tominaga等[42]研究發(fā)現(xiàn)Lgr5在人角膜周邊內(nèi)皮有特異性表達(dá)，且細(xì)胞中Lgr5的持續(xù)表達(dá)能通過(guò)Wnt信號(hào)通路保持內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)和抑制向間葉細(xì)胞轉(zhuǎn)化，由此推斷Lgr5可能對(duì)于保持HCECs的完整性也有作用。角膜內(nèi)皮細(xì)胞Lgr5的表達(dá)證實(shí)HCECs有某些干細(xì)胞/祖細(xì)胞的特性，且LGR5的表達(dá)量與HCECs的增殖能力呈正相關(guān)。不僅如此，在人角膜邊緣部的小梁網(wǎng)與角膜內(nèi)皮邊緣部（包括Schwalbe線）之間也發(fā)現(xiàn)存在已知的干細(xì)胞標(biāo)記物。McGowan等[43]研究發(fā)現(xiàn)損傷后的角膜會(huì)表達(dá)額外的干細(xì)胞標(biāo)記物Oct-3/4和Wnt-1與分化標(biāo)記物Pax-6和Sox-2，其中Pax-6和Sox-2在角膜內(nèi)皮邊緣部也表達(dá)。由此表明，可能有角膜內(nèi)皮干細(xì)胞存在于角膜后部邊緣部且參與角膜損傷中初始的內(nèi)皮細(xì)胞損傷修復(fù)，也參與正常HCECs的緩慢替代過(guò)程。

2.胚胎干細(xì)胞：由于人胚胎干細(xì)胞的獲取受到倫理學(xué)的約束，所以相關(guān)研究很有限。Lu等[44]使用老鼠胚胎干細(xì)胞條件培養(yǎng)液(embryonic stem cell conditioned medium,ESC-CM)誘導(dǎo)培養(yǎng)離體HCECs，研究發(fā)現(xiàn)使用含有25﹪ESC-CM的培養(yǎng)液能夠顯著增加人角膜內(nèi)皮增殖細(xì)胞的數(shù)量，可能與抑制p21的表達(dá)和細(xì)胞凋亡有關(guān)。

3.多潛能干細(xì)胞：骨髓來(lái)源的內(nèi)皮祖細(xì)胞（bone marrow-derived endothelial progenitor cells,BEPCs）能夠在體外誘導(dǎo)分化為角膜內(nèi)皮樣細(xì)胞，誘導(dǎo)后BEPCs的特性有助于修補(bǔ)角膜內(nèi)皮層的功能障礙[45]。而使用骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)液誘導(dǎo)HCECs，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞周期蛋白G1，從而刺激HCECs增殖且保持內(nèi)皮細(xì)胞的特征性形態(tài)[46]。以上研究成果為多潛能干細(xì)胞分化為HCECs的研究提供了新思路。

4.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞：誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)具有類似胚胎干細(xì)胞的分化能力，可以分化為全身各種類型的體細(xì)胞，同時(shí)不會(huì)引起倫理學(xué)問(wèn)題和免疫排斥反應(yīng)，因此iPSCs有可能作為組織工程角膜內(nèi)皮重建的種子細(xì)胞。Zhao等[47]將iPSCs與HCECs共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)在形態(tài)學(xué)上iPSCs向HCECs方向轉(zhuǎn)化。iPSCs作為HCECs移植療法中潛在的種子細(xì)胞，證實(shí)其是否能分化為HCECs仍然有待進(jìn)一步研究。

五、問(wèn)題與展望

雖然對(duì)HCECs增殖能力和再生機(jī)制仍在不斷探索，HCECs體外培養(yǎng)擴(kuò)增技術(shù)也不斷地完善，但目前仍存在許多問(wèn)題，譬如HCECs體外培養(yǎng)增殖有限、生長(zhǎng)因子等的促增殖作用還不明確、尚未找到理想的干細(xì)胞和替代細(xì)胞、再生細(xì)胞的特性和功能與正常HCECs仍有差距等等。要解決這些問(wèn)題，有必要對(duì)HCECs生理功能和再生能力的相關(guān)理論做反復(fù)驗(yàn)證，并且從分子水平和基因?qū)用孢M(jìn)一步研究調(diào)控HCECs增殖的機(jī)制，為今后角膜內(nèi)皮細(xì)胞失代償?shù)闹委熖峁┬路较颉?/p>

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Research progress on corneal endothelial cells regeneration

Zhu Mengyu,Shao Chunyi,Fu Yao.Department of Ophthalmology,Ninth people’s Hospital,Shanghai Jiaotong University School of Medicine,Shanghai 200011,China

Fu Yao,Email: fuyaofy@sina.com

Human corneal endothelial cells play a key role in maintaining corneal transparency.Division of the cells cease and arrest in G1 phase when cell-cell contact formed,but they don’t exit the cell cycle.There are many factors involved in corneal endothelial cell proliferation,TGF- β2 inhibits human corneal endothelial cells into the S phase of the cell cycle,whereas EGF,FGF,NGF can promote cell proliferation; ROCK inhibitor Y-27632 can promote adhesion of endothelial cells.Culture of corneal endothelial precursor cells,and inducing pluripotent stem cells into corneal endothelial cell may provide a new method for the treatment of corneal endothelial dysfunction.

Cornea；Endothelial cells；Cell cycle；Cell proliferation；Stem cell

2014-02-10)

（本文編輯：蔡曉珍）

10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2014.02.007

國(guó)家自然科學(xué)基金（81370992、81000366、31000443）；市科委基礎(chǔ)研究重點(diǎn)項(xiàng)目連續(xù)支持項(xiàng)目（11JC1407000）；上海市浦江人才計(jì)劃（12PJD025）；上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士創(chuàng)新基金項(xiàng)目（BXJ201227）

200011 上海，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院眼科

傅瑤，Email：fuyaofy@sina.com

朱夢(mèng)玉,邵春益,傅瑤.角膜內(nèi)皮細(xì)胞再生研究新進(jìn)展[J/CD].中華細(xì)胞與干細(xì)胞雜志:電子版,2014,4(2):116-121.