楊玉琴 洪麗萍 陳月霞 李競梅 石晶萍 朱佳麗

·實(shí)驗(yàn)研究·

RP-HPLC測定阿那曲唑的含量

楊玉琴 洪麗萍 陳月霞 李競梅 石晶萍 朱佳麗

目的 建立阿那曲唑含量測定的反相高效液相色譜(RP-HPLC)法。方法 色譜柱Agilent XDB-C18柱(150 mm×4.6mm, 5 μm)；流動(dòng)相為乙腈-水(44:56), 流速1.0 ml/min, 檢測波長210 nm。結(jié)果阿那曲唑在5.00~18.00 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好, r=0.9995。平均回收率為99.69%, RSD為0.3%(n=6)。結(jié)論 本方法簡便、準(zhǔn)確, 可以用于阿那曲唑的定量分析。

反相高效液相色譜；阿那曲唑；含量測定

阿那曲唑是本公司生產(chǎn)的抗腫瘤類原料藥, 其制劑是艾達(dá)(阿那曲唑片), 主要適用于他莫昔芬及其它抗雌激素療法仍不能控制的絕經(jīng)后婦女的晚期乳腺癌。本文參考原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)［1］和藥典方法［2］對測定阿那曲唑含量的方法進(jìn)行了研究及各項(xiàng)驗(yàn)證, 結(jié)果表明使用RP-HPLC方法可以簡便、準(zhǔn)確測定阿那曲唑的含量。

1 儀器與試藥

瑞士Mettler Toledo XP205 電子分析天平, 美國安捷倫公司高效液相色譜儀Agilent1200 Series等。

阿那曲唑?qū)φ掌?批號為：100770-200401)購于中國藥品生物制品檢定所, 阿那曲唑(批號分別為：13070111, 13080111, 13090111), 試驗(yàn)用乙腈為色譜純, 配制用水為超純水。

2 方法

2.1 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)和色譜條件 色譜柱為：美國Agilent XDB C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)；流動(dòng)相為：乙腈-水(44：56)；流速1.0 ml/min；檢測波長210 nm；柱溫：30℃；流速：1.0 ml/min。在此色譜條件下, 理論板數(shù)以阿那曲唑峰計(jì)大于2000, 溶劑不干擾測定, 此色譜條件可行。

2.2 配制對照品溶液 稱取阿那曲唑?qū)φ掌愤m量, 用流動(dòng)相溶解并制成每1 ml含100 μg的對照品貯備液。

2.3 線性關(guān)系試驗(yàn) 分別精密吸取上述對照品貯備液適量,用流動(dòng)相稀釋制成濃度分別為：5、8、10、12、15、36 μg/ ml的樣品溶液, 按上述色譜條件分別依次進(jìn)樣20 μl, 橫坐標(biāo)(X)為阿那曲唑的濃度, 縱坐標(biāo)(Y)為峰面積積分值, 求得回歸方程為： Y=60.88 X+9.859 相關(guān)系數(shù)r=0.9995。

結(jié)果表明阿那曲唑的濃度和峰面積積分值在5.00~18.00 μg/ml的濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.4 精密度試驗(yàn) 取阿那曲唑?qū)φ掌啡芤?0.01012 mg/ml),進(jìn)樣體積為：20 μl, 重復(fù)進(jìn)樣6次, 結(jié)果阿那曲唑峰面積RSD值為0.1%。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取濃度為0.01015 mg/ml的樣品溶液, 在25℃下放置考察, 精密量取供試品溶液20 μl, 在放置0、2、4、6、8、12 h后分別測定1次, 共測定6次, 記錄峰面積, 阿那曲唑峰面積均值為618.17559, RSD值為0.4%, 結(jié)果表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取批號為13120111的樣品, 按照“2.8”項(xiàng)下方法同法制備6份供試品溶液, 結(jié)果阿那曲唑含量均值為99.90%, RSD為0.2%。

2.7 加樣回收率試驗(yàn) 采用加樣回收法。取已知阿那曲唑含量的樣品(13010111、13010211、13010311)適量, 分別精密加入阿那曲唑?qū)φ掌啡芤?0.02 mg/ml)10 ml, 按照“2.8”項(xiàng)下方法同法制備6份供試液, 分別依次進(jìn)樣20 μl, 計(jì)算得平均回收率為99.69%, RSD為0.3%

2.8 樣品含量測定 取本品, 精密稱定適量, 置100 ml量瓶中, 加乙腈約5 ml, 振搖使阿那曲唑溶解, 加流動(dòng)相稀釋至刻度, 搖勻, 制成每1 ml溶液中約含10 μg的溶液, 用0.45 μm微孔濾膜濾過, 分別依次進(jìn)樣20 μl, 按外標(biāo)法計(jì)算供試品中阿那曲唑的含量。

3 小結(jié)

作者分別選取了不同配置比例的流動(dòng)相, 不同廠家和規(guī)格的色譜柱進(jìn)行分析驗(yàn)證, 驗(yàn)證結(jié)果表明選擇最佳色譜條件是：流動(dòng)相：乙腈-水(44:56)；色譜柱：Agilent XDB C18(150 mm×4.6 mm, 5 μm)；柱溫：30℃；流速：1.0 ml/ min；波長：210 nm。

［1］ 國家食品藥品監(jiān)督管理局.WSI-(X-085)-2005Z國家藥品標(biāo)準(zhǔn).

［2］ 國家藥典委員會(huì).中國藥典(二部) .北京：化學(xué)工業(yè)出版社, 2010:45.

2014-03-14］

225321 泰州, 揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)有限公司質(zhì)量管理部質(zhì)量檢測中心

洪麗萍